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毒害艾美球虫cDNA文库的构建和基因筛选

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-23页
   ·鸡球虫的基础生物学第12-18页
     ·鸡球虫的分类地位和种类第12-13页
     ·鸡球虫的生活史第13页
     ·鸡球虫生物学特点第13-14页
     ·鸡球虫的致病力第14-15页
     ·鸡球虫病的流行特点和临床症状第15-16页
     ·鸡球虫病的诊断第16-17页
     ·鸡球虫病的防治第17-18页
   ·毒害艾美球虫研究进展第18-23页
     ·发现命名第18页
     ·流行状况第18-19页
     ·形态特征第19页
     ·潜在期和孢子化时间第19页
     ·生活史第19-20页
     ·致病性第20页
     ·基因水平的研究第20-21页
     ·致弱研究第21-22页
     ·展望第22-23页
第二章 毒害艾美球虫的生物学鉴定第23-29页
   ·材料与方法第23-26页
     ·试验动物第23页
     ·实验虫株第23页
     ·主要仪器第23页
     ·主要试剂及溶液配制第23-24页
     ·基本生物学指标测定第24-25页
     ·虫种的 PCR 鉴定第25-26页
   ·结果第26-28页
     ·普通生物学鉴定结果第26-27页
     ·PCR 鉴定结果第27-28页
   ·讨论第28-29页
第三章 毒害艾美球虫孢子化卵囊 CDNA 文库的构建第29-41页
   ·材料与方法第29-37页
     ·试验动物第29页
     ·试验虫种第29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·主要试剂及溶液的配制第30-31页
     ·孢子化卵囊的收集与纯化第31页
     ·总 RNA 的提取第31-32页
     ·第一链cDNA 的合成第32页
     ·通过 LD-PCR 扩增第一链cDNA第32-33页
     ·蛋白酶 K 的消化第33页
     ·Sfi I 消化第33页
     ·cDNA 片段的分离纯化第33-34页
     ·cDNA 与λTripIEx2 载体的连接第34页
     ·连接产物与 Lambda phage packaging protein 的包装第34-35页
     ·细菌的划线培养第35页
     ·测定未扩增文库的滴度第35页
     ·文库的扩增第35-36页
     ·扩增文库滴度的测定第36页
     ·扩增文库重组率的测定第36-37页
   ·结果分析第37-39页
     ·孢子化卵囊的收集与纯化第37页
     ·孢子化卵囊总 RNA 的提取第37-38页
     ·双链cDNA 的合成第38页
     ·cDNA 文库的构建和鉴定第38-39页
   ·讨论第39-41页
第四章 毒害艾美球虫阳性血清的制备第41-46页
   ·材料与方法第41-43页
     ·虫种和实验动物第41页
     ·主要仪器第41页
     ·主要试剂及配制第41-42页
     ·鸡阴性血清的制备第42页
     ·鸡阳性血清的制备第42页
     ·兔抗鸡阳性血清的制备第42-43页
     ·免疫血清的检测第43页
   ·结果第43-44页
     ·鸡抗 E.necatrix 阳性血清 ELISA 检测结果分析第43-44页
     ·兔抗 E.necatrix 阳性血清 ELISA 检测结果分析第44页
   ·讨论第44-46页
第五章 毒害艾美球虫 CDNA 表达文库的筛选第46-56页
   ·材料与方法第46-51页
     ·实验材料第46页
     ·菌株和质粒第46页
     ·实验仪器第46-47页
     ·主要试剂及配制第47-48页
     ·菌株的培养第48页
     ·抗血清的预吸附第48页
     ·cDNA 文库的筛选第48-49页
     ·阳性克隆的鉴定和测序第49-50页
     ·文库质粒转化及 EST 序列的获得第50-51页
   ·结果第51-54页
     ·阳性克隆的筛选结果第51页
     ·阳性克隆 PCR 扩增结果第51-52页
     ·阳性克隆 PCR 测序结果第52-53页
     ·文库转化的 PCR 鉴定结果第53页
     ·文库质粒转化后得到的序列及比对结果第53-54页
   ·讨论第54-56页
第六章 全文结论第56-57页
   ·从普通生物学和分子生物学对实验虫株进行鉴定第56页
   ·毒害艾美耳球虫 cDNA 文库的构建第56页
   ·毒害艾美耳球虫 cDNA 文库筛选第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
个人简历第64页

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