| 中文摘要 | 第1-15页 |
| Abstract | 第15-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-38页 |
| 第一节 DNA倍体在肿瘤临床应用进展 | 第18-24页 |
| 1 DNA倍体在泌尿系统肿瘤的临床应用进展 | 第18-22页 |
| ·DNA倍体在膀胱肿瘤临床应用进展 | 第18-21页 |
| ·DNA倍体在肾脏肿瘤的临床应用进展 | 第21页 |
| ·DNA倍体在前列腺肿瘤的临床应用进展 | 第21-22页 |
| 2 DNA倍体在妇科肿瘤的临床应用进展 | 第22-23页 |
| 3 DNA倍体在头颈部肿瘤的临床应用进展 | 第23-24页 |
| 第二节 CYFRA21-1在肿瘤临床应用进展 | 第24-30页 |
| 1 CYFRA21-1在泌尿系统肿瘤的临床应用进展 | 第24-26页 |
| ·CYFRA21-1在膀胱肿瘤临床应用进展 | 第24-25页 |
| ·CYFRA21-1在其它泌尿系统肿瘤的临床应用进展 | 第25-26页 |
| 2 CYFRA21-1在妇科肿瘤的临床应用进展 | 第26-27页 |
| 3 CYFRA21-1在头颈部肿瘤的临床应用进展 | 第27-28页 |
| 4 CYFRA21-1在肺癌的临床应用进展 | 第28-30页 |
| 第三节 分析技术研究进展 | 第30-35页 |
| 1 流式细胞术分析DNA倍体 | 第30-33页 |
| 2 电化学发光免疫分析法分析CYFRA21-1 | 第33-34页 |
| 3 荧光定量RT-PCR法分析CYFRA21-1 | 第34-35页 |
| 第四节 本文研究内容和科学意义 | 第35-38页 |
| 第二章 材料与方法 | 第38-59页 |
| 一 实验材料 | 第38-43页 |
| 1 标本的收集 | 第38页 |
| 2 实验仪器设备 | 第38-39页 |
| 3 主要试剂 | 第39-43页 |
| ·流式DNA分析试剂 | 第39-40页 |
| ·CYFRA21-1电化学发光分析试剂 | 第40-41页 |
| ·CYFRA21-1荧光定量PCR分析试剂 | 第41-42页 |
| ·RNA提取试剂盒(飞捷生物公司"RNAfast1000"产品) | 第41页 |
| ·cDNA合成试剂盒(美国Promega公司产品) | 第41页 |
| ·RT-PCR检测试剂(美国Promega公司产品) | 第41-42页 |
| ·荧光定量PCR检测试剂 | 第42页 |
| ·引物的设计与合成 | 第42页 |
| ·18S rRNA primer内对照试剂 | 第42页 |
| ·琼脂糖电泳试剂 | 第42页 |
| ·细胞培养试剂 | 第42-43页 |
| 二 实验方法 | 第43-59页 |
| 1 FCM DNA倍体的分析 | 第43-47页 |
| ·尿液标本的采集 | 第43页 |
| ·尿液标本的标准化处理 | 第43页 |
| ·荧光抗体标记 | 第43-44页 |
| ·流式细胞仪的标准化检测及分析 | 第44-47页 |
| 2 CYFRA21-1的分析 | 第47-48页 |
| ·尿液标本的采集 | 第47页 |
| ·尿液标本的处理 | 第47页 |
| ·电化学发光免疫分析仪检测及分析 | 第47-48页 |
| 3 PCR相关实验 | 第48-56页 |
| ·RNA提取实验 | 第48-49页 |
| ·反转录实验 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR反应 | 第50-51页 |
| ·FQ-RT-PCR反应 | 第51-56页 |
| ·引物分装 | 第51页 |
| ·荧光定量PCR实验 | 第51-53页 |
| ·DNA的琼脂糖电泳 | 第53页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第53-54页 |
| ·PCR产物纯化 | 第54页 |
| ·扩增效率的计算 | 第54-55页 |
| ·重复性检测 | 第55页 |
| ·标准曲线的建立 | 第55页 |
| ·CYFRA21-1mRNA表达水平相对定量分析: | 第55-56页 |
| 4 细胞相关实验 | 第56-58页 |
| ·膀胱癌T24细胞培养有关试剂的配置 | 第56-57页 |
| ·培养基的配置 | 第56页 |
| ·小牛血清的处理 | 第56页 |
| ·抗生素的配制 | 第56页 |
| ·胰酶消化液 | 第56-57页 |
| ·1×PBS(pH7.4)的配制 | 第57页 |
| ·细胞复苏 | 第57页 |
| ·换液 | 第57页 |
| ·传代 | 第57页 |
| ·细胞保种 | 第57-58页 |
| ·细胞计数 | 第58页 |
| 5 敏感性特异性分析 | 第58页 |
| 6 统计学分析 | 第58-59页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第59-85页 |
| 1 膀胱癌等不同组别尿液流式DNA倍体状况 | 第59-62页 |
| 2 膀胱癌患者尿液流式DNA倍体与膀胱癌病理分级和临床分期的关系 | 第62-65页 |
| 3 流式DNA异倍体率与膀胱癌临床分期的关系 | 第65页 |
| 4 流式分析SPF在膀胱癌的辅助诊断价值 | 第65-67页 |
| 5 流式分析G_0/G_1期CV值在膀胱癌的辅助诊断价值 | 第67-68页 |
| 6 膀胱癌患者尿液流式DNA倍体对膀胱癌预后的评估 | 第68-69页 |
| 7 流式DNA倍体分析的敏感性、特异性、假阳性率、假阴性率、阳性似然比和阴性似然 | 第69-70页 |
| 8 CYFRA21-1含量的变化在膀胱癌辅助诊断价值 | 第70-71页 |
| 9 CYFRA21-1含量与膀胱癌病理分级和临床分期的关系 | 第71-72页 |
| 10 CYFRA21-1含量的变化对膀胱癌预后的评估 | 第72-74页 |
| 11 FQ-RT-PCR方法检测膀胱癌患者组织及尿液中CYFRA21-1含量变化 | 第74-81页 |
| ·RNA的纯度和完整性分析 | 第74-75页 |
| ·FQ-RT-PCR的扩增效率检测 | 第75-76页 |
| ·重复性检测: | 第76页 |
| ·标准曲线的建立 | 第76-79页 |
| ·CYFRA21-1在膀胱组织、细胞T24株和尿液中表达水平分析 | 第79-81页 |
| 12 CYFRA21-1含量检测的敏感性、特异性、假阳性率、假阴性率、阳性似然比和阴性似然比 | 第81-82页 |
| 13 流式DNA倍体与CYFRA21-1的辅助诊断价值评价 | 第82页 |
| 14 流式DNA倍体分析与CYFRA21-1检测的敏感性、特异性临床应用价值 | 第82-85页 |
| 第四章 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-97页 |
| 缩略语及中英文对照表 | 第97-101页 |
| 已发表和待发表论文情况 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
