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水稻OsCAS(Calcium-sensing Receptor)基因的克隆及功能分析

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩写及中英文对照第9-11页
目录第11-13页
第一章 文献综述第13-45页
 第一节 植物钙信号系统第13-23页
 第二节 动植物中的胞外Ca~(2+)信号第23-33页
 第三节 钙信使在植物适应非生物逆境中的作用第33-43页
 本研究的目的及意义第43-45页
第二章 水稻OsCAS基因的克隆、表达载体的构建及转化第45-67页
 第一节 水稻OsCAS基因的克隆第45-57页
  一、实验材料及试剂第45-46页
  二、实验方法第46-49页
   1.水稻OsCAS基因的RT-PCR扩增第46-47页
   2.目的基因与T-vector连接第47-49页
  三、实验结果分析第49-56页
   1.水稻总RNA的提取及RT-PCR扩增目的基因第49-50页
   2.目的基因与T-vector连接第50-51页
   3.OsCAS基因及蛋白结构分析第51-56页
  四、讨论第56-57页
 第二节 表达载体的构建及水稻转化第57-67页
  一、实验材料及方法第57-62页
   1.表达载体的构建第57-58页
   2.表达载体对农杆菌EHA105的转化第58-59页
   3.根癌农杆菌介导的水稻转化第59-62页
  二、实验结果分析第62-66页
   1.pCUbi1390-CASs和pCUbi1390-CASa表达载体的构建及对农杆菌的转化第62-63页
   2.根癌农杆菌介导的水稻转化第63-66页
  三、讨论第66-67页
第三章 OsCAS基因的功能分析第67-91页
 一、实验材料及方法第68-77页
  1.UBQp::CAS::EGFP载体构建及转化洋葱表皮细胞第68-72页
  2.载体pcDNA_3-CAS的构建及转化HEK239细胞第72-73页
  3.转基因植株的鉴定第73-76页
  4.植物组织叶绿素含量的测定第76-77页
  5.脯氨酸的提取及含量测定第77页
 二、实验结果分析第77-87页
  1.pcDNA_3-CAS载体构建及转化HEK293动物细胞系第77-79页
  2.CAS的细胞学定位第79-81页
  3.转基因植株的鉴定第81-82页
  4.转基因植株当代的表型分析第82-83页
  5.转基因植株T_1代分析第83-87页
 三、讨论第87-91页
  1.pcDNA_3-CAS载体转化HEK293动物细胞系第87-88页
  2.OsCAS在植物体中的表达部位及亚细胞定位第88页
  3.OsCAS的功能分析第88-91页
结论第91-93页
参考文献第93-107页
致谢第107-108页

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