中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩写及中英文对照 | 第9-11页 |
目录 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-45页 |
第一节 植物钙信号系统 | 第13-23页 |
第二节 动植物中的胞外Ca~(2+)信号 | 第23-33页 |
第三节 钙信使在植物适应非生物逆境中的作用 | 第33-43页 |
本研究的目的及意义 | 第43-45页 |
第二章 水稻OsCAS基因的克隆、表达载体的构建及转化 | 第45-67页 |
第一节 水稻OsCAS基因的克隆 | 第45-57页 |
一、实验材料及试剂 | 第45-46页 |
二、实验方法 | 第46-49页 |
1.水稻OsCAS基因的RT-PCR扩增 | 第46-47页 |
2.目的基因与T-vector连接 | 第47-49页 |
三、实验结果分析 | 第49-56页 |
1.水稻总RNA的提取及RT-PCR扩增目的基因 | 第49-50页 |
2.目的基因与T-vector连接 | 第50-51页 |
3.OsCAS基因及蛋白结构分析 | 第51-56页 |
四、讨论 | 第56-57页 |
第二节 表达载体的构建及水稻转化 | 第57-67页 |
一、实验材料及方法 | 第57-62页 |
1.表达载体的构建 | 第57-58页 |
2.表达载体对农杆菌EHA105的转化 | 第58-59页 |
3.根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第59-62页 |
二、实验结果分析 | 第62-66页 |
1.pCUbi1390-CASs和pCUbi1390-CASa表达载体的构建及对农杆菌的转化 | 第62-63页 |
2.根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第63-66页 |
三、讨论 | 第66-67页 |
第三章 OsCAS基因的功能分析 | 第67-91页 |
一、实验材料及方法 | 第68-77页 |
1.UBQp::CAS::EGFP载体构建及转化洋葱表皮细胞 | 第68-72页 |
2.载体pcDNA_3-CAS的构建及转化HEK239细胞 | 第72-73页 |
3.转基因植株的鉴定 | 第73-76页 |
4.植物组织叶绿素含量的测定 | 第76-77页 |
5.脯氨酸的提取及含量测定 | 第77页 |
二、实验结果分析 | 第77-87页 |
1.pcDNA_3-CAS载体构建及转化HEK293动物细胞系 | 第77-79页 |
2.CAS的细胞学定位 | 第79-81页 |
3.转基因植株的鉴定 | 第81-82页 |
4.转基因植株当代的表型分析 | 第82-83页 |
5.转基因植株T_1代分析 | 第83-87页 |
三、讨论 | 第87-91页 |
1.pcDNA_3-CAS载体转化HEK293动物细胞系 | 第87-88页 |
2.OsCAS在植物体中的表达部位及亚细胞定位 | 第88页 |
3.OsCAS的功能分析 | 第88-91页 |
结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-107页 |
致谢 | 第107-108页 |