| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-39页 |
| ·鸡球虫病的危害、防治现状与需求 | 第17-18页 |
| ·鸡球虫病疫苗的研究现状及进展 | 第18-24页 |
| ·活疫苗 | 第18-20页 |
| ·重组疫苗 | 第20-23页 |
| ·新型佐剂的研究 | 第23页 |
| ·展望 | 第23-24页 |
| ·鸡球虫入侵相关分子的研究 | 第24-29页 |
| ·微线蛋白 | 第25-26页 |
| ·蛋白激酶 | 第26-27页 |
| ·热激蛋白 | 第27-28页 |
| ·糖酵解酶 | 第28页 |
| ·展望 | 第28-29页 |
| ·抑制性消减杂交(SSH)技术及其在寄生虫学中的应用 | 第29-39页 |
| ·抑制性消减杂交技术的原理 | 第29-30页 |
| ·抑制性消减杂交技术的优缺点及关键点 | 第30-31页 |
| ·抑制性消减杂交技术的研究进展 | 第31-32页 |
| ·抑制性消减杂交技术(SSH)在寄生虫学研究中的应用 | 第32-38页 |
| ·展望 | 第38-39页 |
| 第二章 柔嫩艾美耳球虫孢子发育阶段虫体消减cDNA文库的构建 | 第39-54页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·材料与方法 | 第39-48页 |
| ·实验动物 | 第39-40页 |
| ·实验虫株 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子的制备 | 第40-41页 |
| ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子总RNA的提取 | 第41页 |
| ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子mRNA的分离 | 第41-42页 |
| ·E.tenella孢子发育阶段虫体cDNA消减文库的构建 | 第42-48页 |
| ·E.tenella孢子发育阶段虫体cDNA消减文库重组比率及插入片段长度分析 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-52页 |
| ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子的收集和纯化 | 第48-49页 |
| ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子总RNA的提取 | 第49页 |
| ·双链cDNA的合成和RsaI酶切效率的分析 | 第49-51页 |
| ·接头连接效率的检验 | 第51-52页 |
| ·消减cDNA文库重组率及插入片段长度分析 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 cDNA微阵列技术分析柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊和子孢子差异表达基因 | 第54-81页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·材料和方法 | 第54-61页 |
| ·实验动物 | 第54页 |
| ·实验虫株 | 第54-55页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子的收集 | 第55页 |
| ·引物合成及微阵列的制作和分析 | 第55页 |
| ·用于芯片制备的消减杂交克隆的筛选 | 第55-56页 |
| ·cDNA微阵列的制作 | 第56页 |
| ·芯片杂交实验 | 第56-58页 |
| ·芯片扫描及数据处理 | 第58-59页 |
| ·差异表达基因杂交数据的在线分析 | 第59页 |
| ·差异表达基因的测序和分析 | 第59页 |
| ·差异表达基因的实时定量PCR验证 | 第59-61页 |
| ·结果 | 第61-78页 |
| ·cDNA微阵列的构建 | 第61-62页 |
| ·差异表达基因芯片杂交结果 | 第62-69页 |
| ·基因芯片杂交数据的聚类分析 | 第69-73页 |
| ·差异表达基因的测序及生物信息学分析 | 第73-76页 |
| ·差异表达基因的实时定量PCR验证 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| 第四章 柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊和子孢子阶段虫体差异表达新基因全长cDNA的克隆与分析 | 第81-123页 |
| ·引言 | 第81页 |
| ·材料与方法: | 第81-90页 |
| ·实验动物 | 第81页 |
| ·实验虫株 | 第81-82页 |
| ·主要试剂 | 第82页 |
| ·主要仪器 | 第82页 |
| ·EST来源 | 第82页 |
| ·RACE引物 | 第82-84页 |
| ·全长cDNA扩增的引物 | 第84页 |
| ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子的收集 | 第84页 |
| ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子Total RNA的提取 | 第84-85页 |
| ·新基因的3’和5’RACE扩增: | 第85-88页 |
| ·PCR产物的回收 | 第88页 |
| ·回收产物pGEM-T-easy Vector连接转化 | 第88页 |
| ·阳性克隆的鉴定及测序 | 第88-89页 |
| ·全长序列的拼接 | 第89页 |
| ·新基因全长cDNA序列的扩增 | 第89页 |
| ·新基因全长cDNA的克隆和测序 | 第89-90页 |
| ·新基因全长cDNA编码蛋白的生物信息学分析 | 第90页 |
| ·结果 | 第90-120页 |
| ·E.tenella孢子化卵囊和子孢子差异表达新基因全长cDNA的获得 | 第90-92页 |
| ·差异表达新基因全长cDNA序列的生物信息学分析 | 第92-120页 |
| ·讨论 | 第120-123页 |
| 第五章 柔嫩艾美耳球虫新基因在大肠杆菌中的表达 | 第123-139页 |
| ·引言 | 第123页 |
| ·材料与方法 | 第123-128页 |
| ·实验材料 | 第123-124页 |
| ·实验方法 | 第124-128页 |
| ·结果 | 第128-137页 |
| ·重组原核表达质粒的构建 | 第128-130页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第130-136页 |
| ·重组表达蛋白抗原性的鉴定 | 第136-137页 |
| ·讨论 | 第137-139页 |
| 第六章 柔嫩艾美耳球虫重组蛋白免疫保护效果的初步研究 | 第139-145页 |
| ·引言 | 第139页 |
| ·材料与方法 | 第139-142页 |
| ·材料 | 第139-140页 |
| ·方法 | 第140-142页 |
| ·结果 | 第142-143页 |
| ·增重 | 第142页 |
| ·卵囊产量 | 第142页 |
| ·肠道病变记分 | 第142-143页 |
| ·讨论 | 第143-145页 |
| 第七章 全文结论 | 第145-147页 |
| 参考文献 | 第147-159页 |
| 致谢 | 第159-160页 |
| 作者简历 | 第160-162页 |
