| 目录 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·抗病基因工程策略 | 第11-14页 |
| ·利用植物的R基因(Resistance gene) | 第12-13页 |
| ·利用抗菌蛋白基因的策略 | 第13-14页 |
| ·几丁质酶及其在植物抗病基因工程中的应用 | 第14-21页 |
| ·几丁质酶的分类 | 第15-17页 |
| ·微生物几丁质酶 | 第17页 |
| ·几丁质酶对植物病原真菌的作用及机制 | 第17-18页 |
| ·几丁质酶在植物抗病研究中的应用 | 第18-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-23页 |
| ·研究的背景与意义 | 第21-22页 |
| ·研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 第三章:材料与方法 | 第23-37页 |
| ·材料 | 第23-27页 |
| ·植物病原菌菌株 | 第23页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·载体与宿主菌 | 第23页 |
| ·主要化学试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·使用的贮存液和缓冲液 | 第24-26页 |
| ·常用培养基 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-37页 |
| ·Bbchit1的表达与脱盐处理 | 第27-28页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染 | 第28页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第28页 |
| ·Bbchit1对植物病原真菌菌丝生长的作用测定 | 第28-29页 |
| ·Bbchit1对植物病原真菌孢子萌发的作用测定 | 第29页 |
| ·植物表达载体构建 | 第29-31页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态的制备及转化 | 第31页 |
| ·根癌农杆菌感受态的制备及转化 | 第31页 |
| ·烟草的遗传转化及转基因植株的获得 | 第31-32页 |
| ·转基因植物GUS组织化学鉴定 | 第32页 |
| ·转基因烟草纯合株系的确定 | 第32-33页 |
| ·烟草基因组DNA的提取与Southern杂交 | 第33页 |
| ·转基因烟草的抗病性检测 | 第33-34页 |
| ·转基因叶片总蛋白提取与Western blot | 第34-35页 |
| ·转基因烟草几丁质酶活性的测定 | 第35-37页 |
| 第四章 结果与分析 | 第37-51页 |
| ·Bbchit1的表达与制备 | 第37-38页 |
| ·Bbchit1对植物病原真菌菌丝生长的抑制作用 | 第38-39页 |
| ·Bbchit1对植物病原真菌孢子萌发的抑制作用 | 第39-40页 |
| ·植物表达载体构建 | 第40-42页 |
| ·转基因植物GUS组织化学鉴定 | 第42-43页 |
| ·转基因烟草纯合株系的确定 | 第43-44页 |
| ·转Bbchit1烟草T_1代种子GUS染色 | 第43页 |
| ·烟草DNA的提取与Southern杂交 | 第43-44页 |
| ·T_0代转基因烟草抗病性检测 | 第44-46页 |
| ·超量表达Bbchit1的转基因烟草T_0代对赤星病的抗性检测 | 第44-46页 |
| ·具不同抗性转基因烟草的T_0代几丁质酶活性 | 第46页 |
| ·超量表达Bbchit1烟草T_2代纯合株系的抗病性检测 | 第46-50页 |
| ·超量表达Bbchit1烟草T_2代纯合株系对烟草赤星病的抗性检测 | 第46-47页 |
| ·超量表达Bbchit1烟草T_2代纯合株系对烟草青枯病的抗性检测 | 第47-49页 |
| ·转基因烟草几丁质酶活性的测定 | 第49-50页 |
| ·转基因叶片总蛋白提取与Western blot | 第50-51页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第51-55页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·几丁质酶在毕赤酵母中的表达 | 第51页 |
| ·Bbchit1对病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制 | 第51-52页 |
| ·转Bbchit1基因提高烟草的抗病性 | 第52-53页 |
| ·植物抗病基因工程的思索 | 第53-54页 |
| ·主要结论 | 第54页 |
| ·创新之处 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
