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重组表达稻瘟菌激发子对水稻油菜生长和抗性的影响

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
第一章 文献综述第11-27页
   ·植物与病原物的相互作用第11页
   ·激发子的分类第11-14页
     ·寡糖激发子第12页
     ·脂类激发子第12页
     ·蛋白激发子第12页
     ·其他激发子第12-14页
   ·蛋白激发子的种类及研究进展第14-16页
     ·过敏蛋白Harpin第14-15页
     ·隐地蛋白第15-16页
     ·植物激活蛋白第16页
   ·植物的诱导抗性第16-18页
     ·系统获得性中诱导发生的早期事件第16-17页
     ·GTP结合蛋白的激活第17页
     ·离子流和Ca~(2+)信号第17页
     ·活性氧(Reactive oxygen species,ROS)猝发第17-18页
     ·激发子处理植物以后信号转导过程第18页
   ·表达差异蛋白的筛选方法第18-25页
     ·双向电泳的方法第18-20页
     ·高效液相与其联用技术第20-22页
     ·同位素代码与其标记技术第22-23页
     ·蛋白芯片第23-25页
   ·立题依据和实验设计第25-27页
     ·实验背景第25-26页
     ·实验设计第26-27页
第二章 稻瘟菌激发子蛋白的纯化第27-37页
   ·材料与方法第27-28页
     ·菌种及植物材料第27页
     ·实验试剂第27页
     ·培养基及缓冲液的配制第27-28页
     ·实验仪器第28页
   ·稻瘟菌激活蛋白的提纯第28-31页
     ·粗蛋白的提纯第28-29页
     ·激发子蛋白的进一步纯化第29页
     ·激发子蛋白氨基酸序列的测定第29页
     ·激发子蛋白的糖基化检测第29页
     ·烟草愈伤组织和悬浮细胞的获得第29-30页
     ·稻瘟菌激发子的抗体制备第30-31页
     ·稻瘟菌激发子抗体的纯化第31页
   ·结果分析第31-36页
     ·烟草悬浮细胞的获得第31-32页
     ·稻瘟菌植物激活蛋白的分离和纯化第32-34页
     ·对稻瘟菌激发子的质谱测序和糖蛋白检测第34-35页
     ·稻瘟菌激发子抗体纯化的结果第35-36页
   ·小节讨论第36-37页
第三章 稻瘟菌激发子基因克隆第37-45页
   ·材料与方法第37-38页
     ·菌株与载体第37页
     ·主要试剂及缓冲液第37-38页
     ·主要仪器及耗材第38页
   ·试验方法第38-40页
     ·总RNA提取第38-39页
     ·第一链cDNA合成第39页
     ·RT-PCR第39-40页
   ·结果分析第40-44页
     ·RNA提取结果第40-41页
     ·稻瘟菌激发子pemg1的获得第41-44页
   ·小节与讨论第44-45页
第四章 pemg1基因的原核表达和重组激发子对水稻生物活性的测定第45-69页
   ·材料与方法第45-46页
     ·载体,菌株与植物材料第45页
     ·实验试剂及培养基配方第45-46页
     ·实验仪器第46页
   ·试验方法第46-51页
     ·His_6-PEMG1p在大肠杆菌中的表达和纯化第46页
     ·His_6-PEMG1p诱导水稻稻瘟病抗性和油菜菌核病抗影响第46页
     ·His_6-PEMG1p对水稻和油菜防御相关指标影响第46页
     ·His_6-PEMG1p对种子萌发,幼苗根系活力和幼苗茎长的影响第46-47页
     ·稻瘟菌激发子pemg1基因在大肠杆菌中的表达的步骤第47页
     ·His_6-PEMG1p的纯化步骤第47-48页
     ·His_6-PEMG1p在大肠杆菌中表达的验证第48页
     ·稻瘟病病情指数的统计第48-49页
     ·POD和PAL活性的测定步骤第49页
     ·His_6-PEMG1p诱导水稻防御相关基因表达的影响第49-50页
     ·发芽率,根系活力,根系活力茎长和光合作用强度的测定步骤第50-51页
     ·双向电泳及质谱鉴定的步骤第51页
   ·结果与分析第51-66页
     ·最优表达条件的确定第51-52页
     ·His_6-PEMG1p的纯化第52-54页
     ·His_6-PEMG1p对水稻PAL和POD的影响第54-55页
     ·His_6-PEMG1p处理对水稻防御相关基因的激活第55-56页
     ·His_6-PEMG1p处理对水稻抗稻瘟菌的影响第56-57页
     ·His_6-PEMG1p诱导水稻叶片蛋白表达的变化第57-58页
     ·His_6-PEMG1p对油菜种子萌发及幼苗生长的影响第58-60页
     ·His_6-PEMG1p处理对油菜的光合作用的影响第60页
     ·His_6-PEMG1p对油菜抗菌核病的影响第60-61页
     ·His_6-PEMG1p对油菜叶蛋白表达的影响第61-66页
   ·讨论第66-69页
参考文献第69-77页
英文缩略表第77-78页
资助项目第78页
发表文章第78-79页
致谢第79-81页
作者简历第81页

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