| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 目录 | 第12-16页 |
| 第一部分 冷冻对人精子核DNA完整性影响的研究 | 第16-33页 |
| 第1章 前言 | 第16-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-25页 |
| ·研究对象 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要试剂配制及耗材准 | 第19-21页 |
| ·瑞氏染液的配制 | 第19页 |
| ·姬姆萨染液的配制 | 第19页 |
| ·正甲苯胺蓝白细胞染液的配制 | 第19页 |
| ·磷酸缓冲液(PBS)的配制 | 第19页 |
| ·琼脂糖溶液的配制 | 第19-20页 |
| ·彗星实验裂解液的配制 | 第20页 |
| ·彗星实验碱性电泳液的配制 | 第20页 |
| ·EB染色液的配制 | 第20页 |
| ·DTT的配制 | 第20页 |
| ·载玻片的准备 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·计算机辅助精液常规参数分析 | 第22页 |
| ·瑞氏—姬姆萨染色法精子形态学分析 | 第22页 |
| ·正甲苯胺蓝过氧化物酶法检测精液中白细胞数量 | 第22页 |
| ·精液冷冻 | 第22-23页 |
| ·精液解冻 | 第23页 |
| ·计算机辅助精液常规参数分析 | 第23页 |
| ·彗星实验 | 第23-24页 |
| ·统计学处理 | 第24-25页 |
| 第3章 结果 | 第25-28页 |
| ·精液冻融前后活力参数的变化 | 第25页 |
| ·精液冻融前后彗星实验各指标变化 | 第25-28页 |
| 第4章 讨论 | 第28-32页 |
| 第5章 结论 | 第32-33页 |
| 第二部分 添加抗氧化剂改善冻融人精子活力参数、活性氧、精子线粒体膜电位水平、调亡的研究 | 第33-52页 |
| 第1章 前言 | 第33-35页 |
| 第2章 材料与方法 | 第35-38页 |
| ·研究对象与分组 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要实验仪器 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·精液冷冻 | 第36页 |
| ·精液解冻 | 第36-37页 |
| ·计算机辅助精液常规参数分析 | 第37页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第37页 |
| ·数据统计学分析 | 第37-38页 |
| 第3章 结果 | 第38-52页 |
| ·常规精液参数分析 | 第38页 |
| ·流式细胞仪检测结果 | 第38-39页 |
| ·各组检测指标与 ROS相关性分析 | 第39-52页 |
| 第三部分 抗氧化剂改善冻融人精子氧化应激性 DNA损伤的研究 | 第52-63页 |
| 第1章 前言 | 第52-54页 |
| 第2章 材料与方法 | 第54-55页 |
| ·研究对象与分组 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·溶液的配制 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·精液冷冻 | 第54页 |
| ·精液解冻 | 第54页 |
| ·计算机辅助精液常规参数分析 | 第54页 |
| ·流式细胞仪检测活性氧水平 | 第54页 |
| ·彗星实验 | 第54-55页 |
| 第3章 结果 | 第55-58页 |
| ·冻融前后各实验组活力参数及冷冻后各实验组 ROS水平 | 第55页 |
| ·冷冻后实验组彗星实验结果 | 第55-56页 |
| ·冻融后各组活力、核损伤指标与相应 ROS的关系 | 第56-58页 |
| 第4章 讨论 | 第58-62页 |
| 第5章 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 综述 精液冷冻导致的氧化应激损伤及其预防 | 第69-81页 |
| 1 冷冻过程各冷休克和冰晶形成对精子造成的损伤 | 第69-70页 |
| ·冷休克和冰晶形成 | 第69-70页 |
| ·冷休克和冰晶形成造成精子的损伤 | 第70页 |
| 2 冷冻过程导致精液产生过量的ROS | 第70-73页 |
| ·精液中ROS的主要成分、产生和清除 | 第70-72页 |
| ·冷冻过程导致精液产生过量 ROS | 第72-73页 |
| 3 ROS导致的冻融精子损伤 | 第73-74页 |
| ·ROS对精子的损伤 | 第73页 |
| ·ROS导致的冻融精子的损伤 | 第73-74页 |
| 4 冷冻过程中 ROS过量产生的预防 | 第74-76页 |
| ·抗氧化剂的使用 | 第74-75页 |
| ·优选精子冷冻保存 | 第75页 |
| ·精液处理后加精浆冷冻保存 | 第75-76页 |
| 5 结束语 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 硕士生学习期间发表论文及学术活动 | 第82页 |
