| 提要 | 第1-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-27页 |
| ·与衰老有关问题的研究概况 | 第11-12页 |
| ·DHS 对EIF-5A 的作用 | 第12-13页 |
| ·DHS 与衰老调控有关的研究进展 | 第13-14页 |
| ·植物组织总RNA 提取方法简介 | 第14-17页 |
| ·苯酚法(phenol method) | 第15页 |
| ·异硫氰酸胍法 | 第15-16页 |
| ·氯化锂(LiCl)－尿素法 | 第16页 |
| ·植物组织总RNA 提取试剂盒法 | 第16-17页 |
| ·目的基因的PCR 扩增技术 | 第17-20页 |
| ·PCR 技术原理 | 第17页 |
| ·PCR 引物的设计 | 第17-19页 |
| ·双链DNA 模板的PCR 扩增 | 第19页 |
| ·RNA 为模板的反转录PCR 扩增 | 第19-20页 |
| ·PCR 产物检测的方法 | 第20-23页 |
| ·凝胶电泳检测 | 第20-22页 |
| ·序列分析法 | 第22-23页 |
| ·番茄基因克隆研究概述 | 第23-25页 |
| ·目的基因获得与克隆常用方法 | 第23-24页 |
| ·目前番茄已分离和克隆的基因 | 第24-25页 |
| ·研究目的与内容 | 第25-27页 |
| ·研究的目的、意义 | 第25-26页 |
| ·研究的内容、技术路线 | 第26-27页 |
| 第2章 番茄总 RNA 的提取及检测 | 第27-37页 |
| ·实验材料与设备 | 第27-30页 |
| ·试剂与设备 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·试剂配制 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·实验器具的RNA 酶处理 | 第30-31页 |
| ·番茄植株的衰老诱导 | 第31页 |
| ·番茄叶片总RNA 提取 | 第31-32页 |
| ·总RNA 的检测 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-35页 |
| ·不同方法提取总RNA 效果 | 第32-34页 |
| ·总RNA 纯度结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·番茄总RNA 的提取 | 第35页 |
| ·RNA 完整性检测 | 第35-36页 |
| ·总RNA 的溶解及电泳检测 | 第36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第3章 DHS 基因的RT-PCR 扩增与检测 | 第37-53页 |
| ·实验材料与设备 | 第37-39页 |
| ·试剂与设备 | 第37-38页 |
| ·试剂配制 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·RT-PCR 引物设计 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR 扩增DHS 基因 | 第40-42页 |
| ·RT-PCR 产物的检测 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-49页 |
| ·引物设计结果 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR 反应条件的建立 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR 产物凝胶分析结果 | 第45页 |
| ·凝胶成像系统定量结果 | 第45-46页 |
| ·DHS 基因序列测定结果 | 第46-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·PCR 引物特异性 | 第49页 |
| ·RT 反应条件 | 第49-50页 |
| ·PCR 反应条件的优化 | 第50页 |
| ·DHS 基因序列测定分析 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 第4章 DHS 基因的克隆 | 第53-63页 |
| ·实验材料与设备 | 第53-55页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·试剂配制 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| ·PCR 扩增产物DHS 基因与pMD18-T 载体连接 | 第55页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第55-56页 |
| ·连接物转化大肠杆菌 | 第56页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第56-57页 |
| ·结果 | 第57-60页 |
| ·PCR 产物与T-载体的连接 | 第57-58页 |
| ·大肠杆菌蓝白斑筛选结果 | 第58页 |
| ·重组质粒提取结果 | 第58-59页 |
| ·阳性克隆PCR 鉴定结果 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·载体的选择 | 第60页 |
| ·PCR 产物与T-载体的连接 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-63页 |
| 第5章 结论 | 第63-65页 |
| ·成功提取番茄总RNA | 第63页 |
| ·获得番茄DHS 基因 | 第63-64页 |
| ·设计了番茄DHS 基因RT-PCR 特异引物 | 第63页 |
| ·建立DHS 基因的RT-PCR 反应条件 | 第63-64页 |
| ·扩增番茄DHS 基因与已知DHS 基因序列一致 | 第64页 |
| ·获得重组克隆载体 | 第64-65页 |
| ·T 载体与PCR 产物连接比率的确定 | 第64页 |
| ·pMD-DHS 质粒提取方法的建立 | 第64页 |
| ·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 摘要 | 第70-73页 |
| ABSTRACT | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76页 |