摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-16页 |
缩略词 | 第16-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-40页 |
1 开花决定 | 第19-22页 |
·光周期诱导途径 | 第19-21页 |
·春化作用途径 | 第21页 |
·自主途径 | 第21页 |
·赤霉素(GA)诱导途径 | 第21页 |
·开花抑制基因 | 第21-22页 |
2 花的发端 | 第22页 |
3 花器官的发育 | 第22-31页 |
·花发育的ABC模型及其发展 | 第23-26页 |
·花发育的ABC模型 | 第23页 |
·花发育的ABCD模型 | 第23-24页 |
·花发育的ABCDE模型 | 第24-25页 |
·花发育的四重奏模型 | 第25-26页 |
·MADS-box基因研究进展 | 第26-31页 |
·MADS-box基因的类型及其结构特点 | 第26-27页 |
·MADS-box基因的重复及其功能的多样性 | 第27-31页 |
·AP1/FRUITFULL(FUL)-like亚家族(A类) | 第28-29页 |
·AP3/PI-like(DEF/GLO)亚家族(B类) | 第29页 |
·AG-like 家族(C/D类) | 第29-30页 |
·SEP-like亚家族(E类) | 第30-31页 |
4 葡萄花发育的分子生物学研究进展 | 第31-38页 |
·葡萄的开花过程 | 第31-32页 |
·卷须和花序是相关的结构 | 第32-33页 |
·葡萄的花序起始和发育 | 第33-35页 |
·葡萄的开花转变 | 第33-34页 |
·赤霉素和基因VvGAI1对葡萄开花的影响 | 第34页 |
·分生组织决定基因 | 第34-35页 |
·葡萄的花和果实发育 | 第35-38页 |
·花和果实的器官决定基因 | 第35-36页 |
·葡萄的MADS-box基因 | 第36-38页 |
·VvMADS1:一个推定的C类基因 | 第36-37页 |
·VvMADS2和VvMADS4:推定的SEPALLATA基因 | 第37页 |
·VvMADS3和VvMADS5:未知功能的MADS-box基因 | 第37-38页 |
·VvMADS8:SOC1的同源基因 | 第38页 |
·VvMADS9:一个B类MADS-box基因 | 第38页 |
5 小结与展望 | 第38-40页 |
第二章 葡萄MADS-box家族基因保守片段的克隆与序列分析 | 第40-48页 |
1 材料与方法 | 第41-43页 |
·试验材料 | 第41页 |
·总RNA的提取及检测 | 第41-42页 |
·cDNA第一链的合成 | 第42页 |
·RT-PCR | 第42-43页 |
·序列及系统发育分析 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43-47页 |
·总RNA提取 | 第43-44页 |
·RT-PCR扩增葡萄MADS-box基因保守片段 | 第44页 |
·序列及系统发育分析 | 第44-47页 |
3 讨论 | 第47-48页 |
第三章 葡萄LEAFY基因启动子的克隆与序列分析 | 第48-58页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
·材料 | 第49页 |
·植物材料 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49页 |
·方法 | 第49-51页 |
·总DNA提取 | 第49页 |
·LFY基因克隆 | 第49-50页 |
·LEAFY基因5′上游序列的克隆 | 第50-51页 |
·接头、引物设计与合成 | 第50页 |
·基因组步移文库的构建 | 第50页 |
·PCR反应 | 第50-51页 |
·启动子序列分析 | 第51页 |
2 结果与分析 | 第51-56页 |
·LFY基因克隆与序列分析 | 第51页 |
·LFY基因5′侧翼区域的克隆与序列分析 | 第51-56页 |
·引物设计 | 第51页 |
·基因组DNA的酶切、接头连接 | 第51-52页 |
·Touch-Down PCR | 第52-53页 |
·序列分析及顺式元件预测 | 第53-55页 |
·不同物种FLO/LFY同源基因启动子序列的比较 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
第四章 葡萄AGAMOUS-like MADS-box基因的克隆与表达特性研究 | 第58-72页 |
1 材料和方法 | 第59-64页 |
·试验材料 | 第59-60页 |
·总RNA的提取 | 第60页 |
·cDNA第一链的合成 | 第60页 |
·3′RACE及VvAG编码区全长cDNA的扩增 | 第60页 |
·VvAG序列多比对及系统发育树的构建 | 第60-61页 |
·半定量RT-PCR检测VvAG在不同葡萄组织中的表达 | 第61页 |
·VvAG基因结构分析 | 第61页 |
·VvAG双元表达载体的构建及鉴定 | 第61页 |
·农杆菌介导VvAG转化烟草 | 第61-62页 |
·转VvAG基因烟草的分子检测 | 第62-64页 |
·烟草总DNA的提取 | 第62页 |
·烟草总RNA的提取 | 第62-63页 |
·总RNA中DNA的消化 | 第63页 |
·PCR及RT-PCR反应 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-71页 |
·VvAG基因的克隆 | 第64页 |
·VvAG基因的序列分析 | 第64-67页 |
·VvAG在不同葡萄组织中的表达分析 | 第67-68页 |
·VvAG基因的基因组结构 | 第68页 |
·VvAG双元表达载体的构建及鉴定 | 第68-70页 |
·转VvAG基因烟草的PCR检测 | 第70页 |
·转VvAG基因烟草的RT-PCR检测 | 第70-71页 |
3 讨论 | 第71-72页 |
第五章 葡萄APETALA3(AP3)同源基因的克隆与表达特性研究 | 第72-83页 |
1 材料和方法 | 第73-74页 |
·试验材料 | 第73页 |
·总RNA的提取 | 第73页 |
·cDNA第一链的合成 | 第73页 |
·VvAP3 cDNA编码区全长的克隆与序列测定 | 第73-74页 |
·VvAP3 cDNA序列对比及系统发育分析 | 第74页 |
·VvAP3基因mRNA组织表达的RT-PCR分析 | 第74页 |
·VvAP3基因组结构分析 | 第74页 |
·VvAP3基因双元表达载体的构建及鉴定 | 第74页 |
·VvAP3基因转化烟草及分子检测 | 第74页 |
2 结果与分析 | 第74-82页 |
·VvAP3 cDNA全长的克隆与序列分析 | 第74-76页 |
·VvAP3基因的系统发育分析 | 第76-78页 |
·VvAP3基因在不同葡萄组织中的表达分析 | 第78-79页 |
·VvAP3基因组结构分析 | 第79页 |
·VvAP3双元表达载体的构建及鉴定 | 第79-81页 |
·转VvAP3基因烟草的PCR检测 | 第81页 |
·转VvAP3基因烟草的RT-PCR分析 | 第81-82页 |
3 讨论 | 第82-83页 |
第六章 葡萄FLOWERING LOCUSC(FLC)类MADS-box基因的克隆与表达特性研究 | 第83-93页 |
1 材料和方法 | 第84-85页 |
·试验材料 | 第84页 |
·总RNA的提取 | 第84页 |
·cDNA第一链的合成 | 第84页 |
·VvFLC cDNA克隆与序列测定 | 第84-85页 |
·VvFLC cDNA序列对比分析及系统发育树的构建 | 第85页 |
·VvFLC基因mRNA组织表达的RT-PCR分析 | 第85页 |
·VvFLC基因组结构分析 | 第85页 |
·VvFLC基因双元表达载体的构建及鉴定 | 第85页 |
·VvFLC基因转化烟草及分子检测 | 第85页 |
2 结果与分析 | 第85-92页 |
·VvFLC cDNA全长的克隆与序列分析 | 第85-87页 |
·VvFLC基因的系统发育分析 | 第87-89页 |
·VvFLC基因在葡萄不同组织器官的表达分析 | 第89页 |
·VvFLC基因组结构分析 | 第89-90页 |
·VvFLC双元表达载体的构建及鉴定 | 第90-91页 |
·转VvFLC基因烟草的PCR检测 | 第91页 |
·转VvFLC基因烟草的RT-PCR检测 | 第91-92页 |
3 讨论 | 第92-93页 |
第七章 葡萄FLOWERING LOCUST(FT)基因的克隆、表达及功能研究 | 第93-107页 |
1 材料和方法 | 第95-96页 |
·试验材料 | 第95页 |
·总RNA的提取 | 第95页 |
·cDNA第一链的合成 | 第95页 |
·VvFT cDNA克隆与序列测定 | 第95页 |
·VvFT cDNA序列分析 | 第95页 |
·VvFT基因mRNA组织表达的RT-PCR分析 | 第95-96页 |
·VvFT基因组全长的克隆及基因结构分析 | 第96页 |
·VvFT基因的二级及三级结构预测 | 第96页 |
·VvFT基因正义表达载体的构建及鉴定 | 第96页 |
·农杆菌介导VvFT转化烟草 | 第96页 |
·转VvFT基因烟草的分子检测 | 第96页 |
·转VvFT基因烟草的表型观察 | 第96页 |
2 结果与分析 | 第96-105页 |
·葡萄FT基因编码区全长cDNA的克隆与序列分析 | 第96-98页 |
·VvFT基因组全长的克隆及基因结构分析 | 第98-99页 |
·VvFTmRNA在不同葡萄组织中的表达分析 | 第99-100页 |
·VvFT的二级和三级结构预测 | 第100-101页 |
·VvFT超表达载体的构建及鉴定 | 第101-103页 |
·转VvFT基因烟草的PCR检测 | 第103-104页 |
·转VvFT基因烟草的RT-PCR检测 | 第104页 |
·转VvFT基因烟草表型观察 | 第104-105页 |
3 讨论 | 第105-107页 |
全文讨论 | 第107-112页 |
1 葡萄中的MADS-box家族基因 | 第107页 |
2 葡萄中C/D类MADS-box基因的基因重复及表达模式 | 第107-108页 |
3 葡萄中B类基因的重复及表达模式的多样性 | 第108-110页 |
4 葡萄FLC亚家族基因的克隆及表达 | 第110页 |
5 VvFT基因的功能及其应用前景 | 第110-111页 |
6 葡萄LFY基因启动子序列特征及其在基因表达调控中的作用 | 第111-112页 |
全文结论 | 第112-114页 |
创新点 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-125页 |
附录 | 第125-132页 |
攻读博士期间发表论文 | 第132-133页 |
致谢 | 第133页 |