| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-49页 |
| 1 重金属污染及其危害 | 第12-14页 |
| 2 高等植物耐受重金属胁迫以及超积累的细胞机制 | 第14-20页 |
| ·植物对重金属离子的驱避作用 | 第15-16页 |
| ·重金属胁迫下离子稳态的重建 | 第16-18页 |
| ·重金属离子的区隔化作用 | 第17页 |
| ·重金属离子的外排作用 | 第17-18页 |
| ·重金属离子毒害的去除 | 第18-19页 |
| ·重金属胁迫下的细胞修复 | 第19-20页 |
| 3 植物金属硫蛋白 | 第20-33页 |
| ·植物金属硫蛋白的组成 | 第21-22页 |
| ·植物金属硫蛋白的分类 | 第22-24页 |
| ·植物金属硫蛋白的理化特性、空间结构及其金属结合位点 | 第24-25页 |
| ·植物金属硫蛋白基因的结构 | 第25-26页 |
| ·植物金属硫蛋白基因的表达特征 | 第26-27页 |
| ·植物金属硫蛋白的功能 | 第27-33页 |
| ·参与金属离子的运输和供给 | 第28页 |
| ·解除金属离子的毒害、维持细胞内环境的稳定 | 第28-30页 |
| ·参与基因的表达调控 | 第30页 |
| ·清除活性氧 | 第30-33页 |
| 4 植物络合素 | 第33-38页 |
| ·植物络合素的概况 | 第34-35页 |
| ·植物络合素的功能 | 第35-36页 |
| ·植物络合素合酶及络合素合酶基因 | 第36-38页 |
| 5 重金属的植物修复技术及其应用 | 第38-49页 |
| ·植物对镉的耐受机制 | 第39-44页 |
| ·Cd~(2+)对植物的毒害 | 第39-40页 |
| ·Cd~(2+)胁迫下的植物硫代谢 | 第40-41页 |
| ·Cd~(2+)与植物的抗氧化系统 | 第41-42页 |
| ·跨质膜和液泡膜的Cd~(2+)运输 | 第42-44页 |
| ·质膜Cd~(2+)转运体 | 第42-43页 |
| ·液泡膜Cd~(2+)转运体 | 第43-44页 |
| ·砷污染的修复机理 | 第44页 |
| ·汞污染的修复机理 | 第44-46页 |
| ·硒的吸收和硒酸盐转运 | 第46页 |
| ·铁氧还原酶和铁吸收的增强 | 第46-47页 |
| ·其它有关重金属代谢的基因 | 第47-49页 |
| 第二部分 实验论文 | 第49-97页 |
| 实验材料及实验方法 | 第50-70页 |
| 实验材料 | 第50-52页 |
| 实验方法 | 第52-70页 |
| 1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第52页 |
| 2 质粒的提取 | 第52-53页 |
| 3 花生AhMT 基因的克隆 | 第53-59页 |
| ·利用RT-PCR和3’RACE克隆AhMT基因 | 第53-56页 |
| ·从花生种子cDNA文库中克隆AhMT基因的cDNA | 第56-59页 |
| 4 植物基因组DNA 的提取 | 第59页 |
| 5 Southern 杂交 | 第59-60页 |
| 6 植物总RNA 的提取 | 第60-61页 |
| 7 Northern 杂交 | 第61页 |
| 8 pET-AhMT2a 的构建、原核表达及SDS-PAGE | 第61-65页 |
| 9 pET-AhMT2a转化菌的重金属耐受性和重金属累积试验 | 第65页 |
| 10 pROK-AhMT2a 植物表达载体的构建 | 第65-66页 |
| 11 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第66-67页 |
| 12 花序浸泡法转化拟南芥 | 第67页 |
| 13 转基因植株的检测 | 第67-68页 |
| 14 野生型及转基因拟南芥在重金属胁迫下的种子萌发和幼苗生长情况 | 第68页 |
| 15 野生型及转基因拟南芥在镉胁迫下的生理指标 | 第68-70页 |
| 结果与分析 | 第70-94页 |
| 1 花生AhMT 基因的克隆及序列分析 | 第70-77页 |
| 2 花生幼苗的重金属累积 | 第77-78页 |
| 3 AhMT2a基因在不同营养器官中的表达 | 第78-79页 |
| 4 外界条件对AhMT2a基因表达的影响 | 第79-81页 |
| 5 原核表达与转化菌重金属抗性试验 | 第81-85页 |
| ·原核表达载体 pET-AhMT2a 的构建 | 第81页 |
| ·融合蛋白的表达、纯化及 SDS-PAGE | 第81-83页 |
| ·转化菌对重金属离子的耐受性 | 第83-84页 |
| ·重金属在转化菌中的累积量 | 第84-85页 |
| 6 转基因拟南芥分析 | 第85-94页 |
| ·转基因植株的 PCR 鉴定 | 第86页 |
| ·转基因植株的 Southern 分析 | 第86-87页 |
| ·转基因植株的 Northern 分析 | 第87页 |
| ·转基因和野生型拟南芥耐重金属性能研究 | 第87-94页 |
| ·拟南芥种子在重金属胁迫条件下的萌发情况 | 第87-89页 |
| ·拟南芥幼苗在重金属胁迫条件下的生长情况 | 第89-91页 |
| ·镉处理对野生型及转基因拟南芥叶绿素含量的影响 | 第91-92页 |
| ·镉处理对野生型及转基因拟南芥 MDA 含量的影响 | 第92页 |
| ·镉胁迫条件下拟南芥 Fv/Fm 的变化 | 第92-94页 |
| 讨论 | 第94-97页 |
| 参考文献 | 第97-112页 |
| 攻读博士学位期间发表及整理的论文 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
