中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-15页 |
1 引言 | 第15-37页 |
·植物的耐盐性 | 第16-22页 |
·盐胁迫对植物的危害 | 第16页 |
·Na~+毒性的主要基础 | 第16-18页 |
·植物的耐盐机制 | 第18-22页 |
·耐盐基因和耐盐基因工程 | 第22-24页 |
·植物的抗旱性 | 第24-27页 |
·植物耐旱机制 | 第24-25页 |
·植物耐旱的基因工程 | 第25-27页 |
·Na~+/H~+逆向运转蛋白 | 第27-29页 |
·Na~+/H~+逆向运转蛋白的结构特征 | 第27-29页 |
·Na~+/H~+逆向转运蛋白的功能 | 第29页 |
·酵母双杂交 | 第29-35页 |
·酵母双杂交技术的原理 | 第30-31页 |
·酵母双杂交系统构成 | 第31-32页 |
·酵母双杂交体系的应用 | 第32-34页 |
·酵母双杂交体系的优点及一些注意的问题 | 第34-35页 |
·本研究的目的及意义 | 第35-37页 |
2 材料与方法 | 第37-75页 |
·材料 | 第37-39页 |
·植物材料 | 第37页 |
·菌株与质粒 | 第37页 |
·酵母菌株和载体 | 第37页 |
·酶及生化试剂 | 第37-38页 |
·实验引物 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-75页 |
·RNA 提取 | 第39-40页 |
·RNA 纯化 | 第40页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第40-41页 |
·目的基因GhN1、ScN1、AtN1、TaN1、SsN1 的分离 | 第41-42页 |
·GhN1、SsN1 基因3’末端的缺失 | 第42页 |
·DNA 片断与克隆载体的连接 | 第42-43页 |
·大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第43页 |
·大肠杆菌细胞的转化 | 第43-44页 |
·序列测定 | 第44页 |
·质粒DNA 的提取 | 第44-45页 |
·凝胶电泳中DNA 片段的回收 | 第45-46页 |
·Northern 杂交 | 第46-48页 |
·酵母表达载体的构建与转化 | 第48-50页 |
·酵母双杂交 | 第50-69页 |
·植物正义表达载体的构建与转化 | 第69-72页 |
·植物生理指标的测定 | 第72-75页 |
3 结果与分析 | 第75-106页 |
·棉花、酵母、拟南芥、小麦、碱蓬液泡型Na~+H~+逆向运转体基因的分离及功能比较 | 第75-89页 |
·棉花、酵母、拟南芥、小麦、碱蓬液泡型Na~+H~+逆向运转体基因的分离 | 第75页 |
·不同来源的Na~+/H~+逆向运转体基因同源性比较 | 第75-79页 |
·棉花、酵母、拟南芥、小麦、碱蓬液泡型Na~+H~+逆向运转体基因的功能比较分析 | 第79-89页 |
·GhN1、SsN1 3’端缺失后基因功能的分析 | 第89-93页 |
·GhN1、SsN1 基因3’端的缺失 | 第89-90页 |
·GhN1、SsN1 3’端缺失基因在酵母突变体中的功能互补 | 第90-91页 |
·GhN1、SsN1 3’端缺失基因在拟南芥中的表达分析 | 第91-93页 |
·酵母双杂交筛选与GhN1 N、C 末端作用的蛋白 | 第93-106页 |
·GhN1 N、C 末端序列的扩增 | 第93-94页 |
·诱饵载体pGBKT7-GhNN_(40aa) 和pGBKT7-GhNC_(109aa) 的构建 | 第94-96页 |
·构建的诱饵蛋白不具备转录激活活性 | 第96-97页 |
·诱饵蛋白对酵母细胞的生长没有影响 | 第97页 |
·cDNA 文库的构建 | 第97页 |
·用GhN1 N、C 末端分别作诱饵蛋白筛选cDNA 文库的结果 | 第97-106页 |
4 讨论 | 第106-113页 |
5 结论 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-128页 |
致谢 | 第128页 |