| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1 脂代谢的重要意义 | 第11页 |
| 2 脂代谢相关基因 | 第11-18页 |
| ·神经肽Y(NPY) | 第11-14页 |
| ·NPY受体 | 第12页 |
| ·NPY在哺乳动物脂代谢中的作用 | 第12-13页 |
| ·NPY在鱼类脂代谢中的作用 | 第13-14页 |
| ·解偶联蛋白2(UCP2) | 第14-16页 |
| ·UCP2在哺乳动物脂代谢中的作用 | 第14-15页 |
| ·UCP2在鱼类脂代谢中的作用 | 第15-16页 |
| ·脂蛋白脂肪酶(LPL) | 第16-17页 |
| ·LPL在哺乳动物脂代谢中的作用 | 第16-17页 |
| ·LPL在鱼类脂代谢中的作用 | 第17页 |
| ·肝脂肪酶(HL) | 第17-18页 |
| ·HL在脂代谢中的作用 | 第17-18页 |
| 3 物种亲缘远近关系的确定 | 第18-20页 |
| 4 本文的研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 5 研究思路 | 第21-22页 |
| 第二章 大口黑鲈脂代谢相关基因NPY、UCP2、LPL、HL的克隆与序列分析 | 第22-54页 |
| 1 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验鱼 | 第22页 |
| ·菌株与质粒 | 第22页 |
| ·试剂盒与试剂 | 第22页 |
| ·引物合成与序列测定 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-35页 |
| ·大口黑鲈脂代谢相关基因NPY、UCP2、LPL、HL cDNA核心片段的克隆 | 第22-29页 |
| ·大口黑鲈脑及肝脏总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·引物的设计 | 第24页 |
| ·RT-PCR扩增大口黑鲈NPY、UCP2、LPL、HL基因cDNA核心片段 | 第24-26页 |
| ·PCR产物的T载体克隆 | 第26-29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳回收PCR产物 | 第26页 |
| ·重组T质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的转化 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·重组质粒的转化 | 第27-28页 |
| ·阳性克隆的筛选(蓝白斑筛选) | 第28页 |
| ·阳性克隆的鉴定(菌落PCR鉴定) | 第28-29页 |
| ·序列测定与分析 | 第29页 |
| ·大口黑鲈NPY基因cDNA5’末端的克隆 | 第29-32页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·5’-RACE法扩增大口黑鲈NPY基因cDNA5’末端 | 第30-32页 |
| ·5’-RACE PCR产物的T载体克隆 | 第32页 |
| ·大口黑鲈NPY基因cDNA3’末端的克隆 | 第32-35页 |
| ·引物设计 | 第32页 |
| ·3’-RACE法扩增大口黑鲈NPY基因cDNA 3’末端 | 第32-34页 |
| ·3’-RACE PCR产物的T载体克隆 | 第34-35页 |
| 2 实验结果与分析 | 第35-54页 |
| ·大口黑鲈脑及肝脏总RNA的提取 | 第35页 |
| ·大口黑鲈NPY、UCP2、LPL、HL基因cDNA核心片段的克隆 | 第35-37页 |
| ·RT-PCR扩增大口黑鲈NPY、UCP2、LPL、HL基因cDNA核心片段 | 第35-36页 |
| ·PCR产物的T载体克隆和序列测定 | 第36-37页 |
| ·大口黑鲈NPY基因全长cDNA序列的克隆 | 第37-40页 |
| ·5’-RACE法扩增大口黑鲈NPY基因cDNA5’末端和序列测定 | 第37-38页 |
| ·3’-RACE法扩增大口黑鲈NPY基因cDNA 3’末端和序列测定 | 第38-40页 |
| ·大口黑鲈NPY与其它生物NPY同源性比较及系统进化分析 | 第40-46页 |
| ·大口黑鲈NPY基因cDNA全序列分析 | 第40-41页 |
| ·大口黑鲈NPY氨基酸序列的同源性分析及系统进化树的建立 | 第41-46页 |
| ·大口黑鲈UCP2与其它生物UCP2同源性比较及系统进化分析 | 第46-49页 |
| ·大口黑鲈UCP2 cDNA核心序列分析 | 第46-47页 |
| ·大口黑鲈UCP2氨基酸序列的同源性分析及系统进化树的建立 | 第47-49页 |
| ·大口黑鲈LPL、HL与其它生物LPL、HL同源性比较及系统进化分析 | 第49-54页 |
| ·大口黑鲈LPL cDNA核心序列分析 | 第49-50页 |
| ·大口黑鲈HL cDNA核心序列分析 | 第50-51页 |
| ·大口黑鲈LPL、HL氨基酸序列的同源性分析及系统进化树的建立 | 第51-54页 |
| 第三章 讨论 | 第54-57页 |
| 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录一 常用试剂与缓冲液的配置 | 第67-71页 |
| 附录二 大口黑鲈NPY基因RACE扩增示意图 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
