| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 1.前言 | 第11-28页 |
| ·植物基因组学的研究进展 | 第11-17页 |
| ·拟南芥基因组研究进展 | 第11-13页 |
| ·水稻基因组研究进展 | 第13-17页 |
| ·植物基因克隆技术的发展 | 第17-20页 |
| ·PCR扩增克隆 | 第17页 |
| ·表型基因克隆法 | 第17-19页 |
| ·定位克隆 | 第19-20页 |
| ·同源序列克隆 | 第20页 |
| ·植物基因组大片段DNA文库研究进展 | 第20-25页 |
| ·Lambda噬菌体文库和Cosmid文库 | 第20页 |
| ·酵母人工染色体(YAC) | 第20-21页 |
| ·细菌人工染色体(BAC) | 第21-22页 |
| ·P1克隆系统和源于P1的人工染色体(PAC) | 第22页 |
| ·双元细菌人工染色体(BIBAC) | 第22-24页 |
| ·可转化人工染色体(TAC) | 第24-25页 |
| ·本论文立题依据、研究内容、技术路线 | 第25-28页 |
| 2.材料与方法 | 第28-41页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·菌株、质粒 | 第28页 |
| ·水稻材料 | 第28页 |
| ·研究方法 | 第28-40页 |
| ·质粒质量检测 | 第28-30页 |
| ·BIBAC2质粒的酶切和去磷酸化 | 第30-31页 |
| ·处理后载体质量的检测 | 第31-32页 |
| ·电击转化 | 第32页 |
| ·电击转化DH10B感受态的制备 | 第32-33页 |
| ·东乡野生稻核高分子量DNA的制备 | 第33-34页 |
| ·东乡野生稻核高分子DNA质量的检测 | 第34-35页 |
| ·东乡野生稻核高分子量DNA限制性酶切条件的确定 | 第35-36页 |
| ·高分子量核DNA的大量限制性酶切及高分子量DNA大片段的第一次分离 | 第36-37页 |
| ·东乡野生稻核高分子量DNA大片段的第二次分离 | 第37页 |
| ·东乡野生稻核高分子量DNA大片段的回收 | 第37页 |
| ·载体与回收的外源片段的连接 | 第37-38页 |
| ·单克隆的挑取及保存 | 第38-39页 |
| ·文库中插入片段大小的检测 | 第39页 |
| ·文库中插入片段稳定性的检测 | 第39-40页 |
| ·水稻愈伤组织的转化 | 第40-41页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第40页 |
| ·农杆菌介导转化水稻愈伤组织 | 第40-41页 |
| 3.实验结果与分析 | 第41-52页 |
| ·BIBAC2载体的检测 | 第41-44页 |
| ·BIBAC2质粒的鉴定 | 第41页 |
| ·BIBAC2质粒的浓度测定 | 第41-42页 |
| ·质粒载体的酶切和去磷酸化 | 第42-43页 |
| ·载体的连接测试 | 第43-44页 |
| ·东乡野生大片段DNA的制备 | 第44-48页 |
| ·东乡野生稻核基因组DNA的质量的鉴定 | 第44页 |
| ·东乡野生稻核基因组DNA的酶切条件的确定 | 第44-45页 |
| ·大量酶切后大片段的第一次分离 | 第45-46页 |
| ·大片段的第二次分离 | 第46页 |
| ·回收大片段及浓度测定 | 第46-47页 |
| ·大片段和载体的连接及转化 | 第47-48页 |
| ·文库质量的检测 | 第48-50页 |
| ·插入片段大小的检测 | 第48-49页 |
| ·插入片段在大肠杆菌中的稳定性检测 | 第49-50页 |
| ·同一培养基上诱导的愈伤 | 第50-51页 |
| ·农杆菌介导转化愈伤组织 | 第51-52页 |
| 4.讨论 | 第52-55页 |
| ·构建BIBAC2文库的优势 | 第52页 |
| ·对文库构建实验程序的优化 | 第52-53页 |
| ·影响农杆菌介导水稻转化几个因素 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附录1 | 第61-62页 |
| 附录2 | 第62-66页 |
| 附录3 | 第66-67页 |
| 附录4 | 第67页 |