摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 综述 | 第10-31页 |
第一节 非编码RNA及其研究现状 | 第10-12页 |
第二节 SNORNA概述 | 第12-15页 |
1.snoRNA的基本特点 | 第12页 |
2.snoRNA的研究历史 | 第12-13页 |
3.snoRNA的分布及命名法则 | 第13-15页 |
第三节 SNORNA的结构与分类 | 第15-18页 |
1.box C/D snoRNA | 第15-16页 |
2.boxH/ACA snoRNA | 第16页 |
3.snoRNA结构的多样性 | 第16-17页 |
4.snoRNA的结合蛋白 | 第17-18页 |
第四节 SNORNA的生物学功能 | 第18-24页 |
1.snoRNA与核糖体的生物合成 | 第18-20页 |
2.参与指导snRNA的核苷酸修饰 | 第20-21页 |
3.snoRNA可能的目标分子 | 第21-23页 |
4.印迹snoRNA | 第23-24页 |
第五节 SNORNA的基因组织与表达 | 第24-29页 |
1.独立转录的snoRNA基因 | 第24-26页 |
2.内含子编码的snoRNA基因 | 第26-27页 |
3.snoRNA基因簇 | 第27-29页 |
第六节 本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
第二章 材料与方法 | 第31-45页 |
第一节 材料与试剂 | 第31-33页 |
1.主要仪器设备 | 第31页 |
2.菌株和培养基 | 第31页 |
3.引物 | 第31-32页 |
4.主要酶和试剂 | 第32-33页 |
第二节 计算机分析方法 | 第33页 |
第三节 实验方法 | 第33-45页 |
1.实验技术路线 | 第33页 |
2.菌种的培养 | 第33-34页 |
3.基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
4.RNA的提取 | 第35-36页 |
5.甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测总RNA | 第36-37页 |
6.总RNA的DNA酶解 | 第37-38页 |
7.逆转录反应 | 第38页 |
8.PCR反应 | 第38-39页 |
9.割胶回收 | 第39-40页 |
10.构建重组体 | 第40页 |
11.制备冰冻的感受态细胞 | 第40-41页 |
12.选择性培养基的制备 | 第41页 |
13.用重组质粒转化细菌 | 第41-42页 |
14.克隆子的筛选(菌落PCR) | 第42-43页 |
15.目的菌落的液体培养 | 第43页 |
16.重组体质粒的提取 | 第43-44页 |
17.测序 | 第44-45页 |
第三章 结果与分析 | 第45-94页 |
第一节 各真菌SNORNA基因簇Ⅱ的搜索与分析 | 第45-81页 |
1.真菌snoRNA基因簇Ⅱ的发现 | 第45-46页 |
2.各真菌snoRNA基因簇Ⅱ的结构与基因组织分析 | 第46-78页 |
3.各snoRNA的分析 | 第78-81页 |
第二节 真菌SNORNA基因簇Ⅱ的表达的研究 | 第81-94页 |
1.总RNA的提取 | 第81页 |
2.基因组DNA的提取 | 第81-82页 |
3.RT-PCR分析 | 第82-86页 |
4.cDNA文库的构建及文库的筛选 | 第86-87页 |
5.质粒提取和序列测定 | 第87-94页 |
第四章 讨论 | 第94-101页 |
1.真菌中普遍存在的snoRNA基因簇Ⅱ | 第94-95页 |
2.真菌snoRNA基因簇Ⅱ组织的高度多样性 | 第95-96页 |
3.snR57的丢失 | 第96-97页 |
4.snoRNA与系统学研究 | 第97页 |
5.非蛋白编码基因的可变剪接 | 第97-99页 |
6.重叠内含子 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-110页 |
致谢 | 第110页 |