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真菌新snoRNA基因簇Ⅱ的鉴定与表达分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 综述第10-31页
 第一节 非编码RNA及其研究现状第10-12页
 第二节 SNORNA概述第12-15页
  1.snoRNA的基本特点第12页
  2.snoRNA的研究历史第12-13页
  3.snoRNA的分布及命名法则第13-15页
 第三节 SNORNA的结构与分类第15-18页
  1.box C/D snoRNA第15-16页
  2.boxH/ACA snoRNA第16页
  3.snoRNA结构的多样性第16-17页
  4.snoRNA的结合蛋白第17-18页
 第四节 SNORNA的生物学功能第18-24页
  1.snoRNA与核糖体的生物合成第18-20页
  2.参与指导snRNA的核苷酸修饰第20-21页
  3.snoRNA可能的目标分子第21-23页
  4.印迹snoRNA第23-24页
 第五节 SNORNA的基因组织与表达第24-29页
  1.独立转录的snoRNA基因第24-26页
  2.内含子编码的snoRNA基因第26-27页
  3.snoRNA基因簇第27-29页
 第六节 本研究的目的和意义第29-31页
第二章 材料与方法第31-45页
 第一节 材料与试剂第31-33页
  1.主要仪器设备第31页
  2.菌株和培养基第31页
  3.引物第31-32页
  4.主要酶和试剂第32-33页
 第二节 计算机分析方法第33页
 第三节 实验方法第33-45页
  1.实验技术路线第33页
  2.菌种的培养第33-34页
  3.基因组DNA的提取第34-35页
  4.RNA的提取第35-36页
  5.甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测总RNA第36-37页
  6.总RNA的DNA酶解第37-38页
  7.逆转录反应第38页
  8.PCR反应第38-39页
  9.割胶回收第39-40页
  10.构建重组体第40页
  11.制备冰冻的感受态细胞第40-41页
  12.选择性培养基的制备第41页
  13.用重组质粒转化细菌第41-42页
  14.克隆子的筛选(菌落PCR)第42-43页
  15.目的菌落的液体培养第43页
  16.重组体质粒的提取第43-44页
  17.测序第44-45页
第三章 结果与分析第45-94页
 第一节 各真菌SNORNA基因簇Ⅱ的搜索与分析第45-81页
  1.真菌snoRNA基因簇Ⅱ的发现第45-46页
  2.各真菌snoRNA基因簇Ⅱ的结构与基因组织分析第46-78页
  3.各snoRNA的分析第78-81页
 第二节 真菌SNORNA基因簇Ⅱ的表达的研究第81-94页
  1.总RNA的提取第81页
  2.基因组DNA的提取第81-82页
  3.RT-PCR分析第82-86页
  4.cDNA文库的构建及文库的筛选第86-87页
  5.质粒提取和序列测定第87-94页
第四章 讨论第94-101页
 1.真菌中普遍存在的snoRNA基因簇Ⅱ第94-95页
 2.真菌snoRNA基因簇Ⅱ组织的高度多样性第95-96页
 3.snR57的丢失第96-97页
 4.snoRNA与系统学研究第97页
 5.非蛋白编码基因的可变剪接第97-99页
 6.重叠内含子第99-101页
参考文献第101-110页
致谢第110页

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