缩写词 | 第1-13页 |
摘要 | 第13-15页 |
Abstract | 第15-17页 |
前言 | 第17-19页 |
1 文献综述 | 第19-37页 |
1.1 植物开花转变研究进展 | 第19-27页 |
1.1.1 影响开花转变的环境因子 | 第19-20页 |
1.1.2 植物向生殖生长转变的模式 | 第20页 |
1.1.3 与开花转化有关的基因 | 第20-21页 |
1.1.3.1 晚开花突变 | 第20页 |
1.1.3.2 早开花突变 | 第20-21页 |
1.1.3.3 开花时间的天然变异 | 第21页 |
1.1.4 控制开花转换的遗传途径 | 第21-24页 |
1.1.4.1 长日光周期促进途径 | 第21页 |
1.1.4.2 春化途径 | 第21-23页 |
1.1.4.3 开花自主途径 | 第23-24页 |
1.1.4.4 赤霉素途径 | 第24页 |
1.1.5 开花途径的整合 | 第24页 |
1.1.6 开花途径的互作 | 第24-25页 |
1.1.7 春化作用的分子机理研究 | 第25-27页 |
1.1.8 小麦春化作用研究概况 | 第27页 |
1.2 分子标记概述 | 第27-29页 |
1.2.1 RFLP标记 | 第27-28页 |
1.2.2 RAPDs标记 | 第28页 |
1.2.2 AFLPs标记 | 第28页 |
1.2.4 SSR标记 | 第28-29页 |
1.2.5 STS标记 | 第29页 |
1.2.6 CAPs标记 | 第29页 |
1.3 基因定位策略 | 第29-32页 |
1.3.1 质量性状基因的分子定位 | 第29-31页 |
1.3.1.1 近等基因系 | 第29-30页 |
1.3.1.2 分离群体分组分析法 | 第30页 |
1.3.1.3 极端个体分组和隐性基因分组分析 | 第30页 |
1.3.1.4 DNA池分析 | 第30-31页 |
1.3.2 QTL定位的方法 | 第31页 |
1.3.3 QTL定位的策略 | 第31-32页 |
1.3.3.1 选择性基因型分析 | 第31-32页 |
1.3.3.2 混合群体分离分析法 | 第32页 |
1.4 芸薹属抽薹开花时间研究 | 第32-37页 |
1.4.1 芸薹属抽薹开花时间的QTL定位 | 第32-34页 |
1.4.1.1 芸薹属抽薹开花性状的遗传规律 | 第32-33页 |
1.4.1.2 芸薹属抽薹开花时间的QTL定位研究 | 第33-34页 |
1.4.2 十字花科作物抽薹开花期的比较作图 | 第34-35页 |
1.4.3 芸薹属FLC基因研究 | 第35-37页 |
2 白菜开花时间相关基因分子标记 | 第37-59页 |
2.1 材料与方法 | 第37-44页 |
2.1.1 植物材料 | 第37-38页 |
2.1.2 基因组DNA提取 | 第38-39页 |
2.1.3 AFLP分析 | 第39-41页 |
2.1.3.1 AFLP分析方法 | 第39-40页 |
2.1.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第40页 |
2.1.3.3 银染显色 | 第40-41页 |
2.1.4 凝胶上回收多态性 DNA片段 | 第41页 |
2.1.5 目的片段的克隆、测序 | 第41-43页 |
2.1.5.1 试剂准备 | 第41-42页 |
2.1.5.2 受体菌培养 | 第42页 |
2.1.5.3 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第42页 |
2.1.5.4 片断DNA与T载体的连接 | 第42页 |
2.1.5.5 质粒的转化 | 第42-43页 |
2.1.5.6 质粒抽提 | 第43页 |
2.1.5.7 质粒的检测 | 第43页 |
2.1.6 标记的SCAR和CAPS转化 | 第43-44页 |
2.1.6.1 标记的SCAR转化 | 第43-44页 |
2.1.6.2 标记的CAPS转化 | 第44页 |
2.1.6.3 SCAR标记的多重PCR扩增 | 第44页 |
2.2 结果与分析 | 第44-56页 |
2.2.1 F_2代田间表现 | 第44-45页 |
2.2.2 F_2代开花时间调查 | 第45页 |
2.2.3 早花池和极端晚花池的构建 | 第45-46页 |
2.2.4 DNA的提取与检测 | 第46页 |
2.2.5 基因组DNA酶切连接的检测 | 第46页 |
2.2.6 AFLP标记分析 | 第46-49页 |
2.2.6.1 引物筛选 | 第46-48页 |
2.2.6.2 差异带的单株及亲本验证 | 第48-49页 |
2.2.7 差异带的单株及亲本验证 | 第49-50页 |
2.2.8 AFLP标记的SCAR转化 | 第50-53页 |
2.2.9 AFLP标记的CAPS转化 | 第53-56页 |
2.2.10 SCAR标记的双重PCR检测 | 第56页 |
2.3 讨论 | 第56-59页 |
2.3.1 AFLP特异片段的回收克隆和SCAR及CAPS转化 | 第57页 |
2.3.2 运用BSA群体处理方法研究数量性状的可行性 | 第57-59页 |
3 白菜人工春化条件下花芽形态观察 | 第59-63页 |
3.1 材料与方法 | 第59-60页 |
3.1.1 植物材料 | 第59页 |
3.1.2 同一时间低温处理 | 第59页 |
3.1.3 不同时间低温处理 | 第59页 |
3.1.4 石蜡切片制作 | 第59-60页 |
3.2 结果与分析 | 第60-62页 |
3.2.1 同一时间低温处理花芽分化时的形态变化 | 第60-61页 |
3.2.2 不同时间低温处理花芽分化时的形态变化 | 第61-62页 |
3.3 讨论 | 第62-63页 |
4 白菜春化相关基因的克隆和表达分析 | 第63-81页 |
4.1 材料和方法 | 第63-66页 |
4.1.1 实验材料 | 第63页 |
4.1.2 材料处理 | 第63-64页 |
4.1.3 RNA提取 | 第64页 |
4.1.3.1 器皿的准备 | 第64页 |
4.1.3.2 试剂 | 第64页 |
4.1.3.3 提取 RNA的操作步骤 | 第64页 |
4.1.3.4 RNA的检测 | 第64页 |
4.1.3.5 cDNA第一链的合成 | 第64页 |
4.1.4 引物的设计 | 第64-65页 |
4.1.4.1 FLC引物设计 | 第64-65页 |
4.1.4.2 FCA引物设计 | 第65页 |
4.1.4.3 FT引物设计 | 第65页 |
4.1.5 PCR扩增体系 | 第65页 |
4.1.6 PCR反应程序 | 第65-66页 |
4.1.7 PCR产物的回收、纯化、连接、转化和测序 | 第66页 |
4.1.8 RT-PCR表达分析 | 第66页 |
4.2 结果与分析 | 第66-78页 |
4.2.1 RNA提取和检测 | 第66页 |
4.2.2 白菜和菜心FLC的克隆和结构分析 | 第66-73页 |
4.2.2.1 上海青FLC基因部分cDNA序列的分离 | 第67页 |
4.2.2.2 上海青BrcFLC基因3’末端cDNA序列的分离 | 第67-68页 |
4.2.2.3 上海青和四九BrcFLC基因编码序列的获得与分析 | 第68-70页 |
4.2.2.4 上海青和四九BrcFLC第一个内含子的扩增 | 第70-73页 |
4.2.3 FCA的克隆和序列分析 | 第73-75页 |
4.2.3.1 FCA的克隆 | 第73-75页 |
4.2.3.2 BrcFCA编码序列拼接和比对 | 第75页 |
4.2.4 FT片段的扩增 | 第75页 |
4.2.5 BrcFLC、BrcFT及BrcFCA的RT-PCR分析 | 第75-78页 |
4.3 讨论 | 第78-81页 |
结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-90页 |