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急性肝损伤新型血清标志物BHMT的ELISA检测方法的建立及临床初探

英文缩略词表第1-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-12页
前言第12-18页
 一、肝脏损伤的原因第12-13页
 二、肝损伤的相关机制第13-14页
 三、目前肝损伤的检测指标第14-15页
 四、目前常用急性肝损伤诊断指标存在的问题第15-16页
 五、本研究的内容和意义第16-18页
第一部分 重组人 BHMT 在 293T 细胞中的表达及纯化第18-35页
 1 实验材料第18-20页
   ·质粒和菌株第18页
   ·主要试剂第18页
   ·主要培养基和溶液的配制第18-19页
   ·实验设备第19-20页
 2 实验方法第20-29页
   ·目的片段的扩增及鉴定第20-21页
   ·pMD18-BHMT-His 的构建及鉴定第21-23页
   ·pCMV-Flag-BHMT-His 的构建第23-24页
   ·pCMV-Flag-BHMT-His 转染 293T 细胞的蛋白表达及表达产物的鉴定第24-26页
   ·重组人 BHMT 真核表达载体的优选第26页
   ·pCMV-Flag-BHMT-His 在 293T 细胞中的大量表达及纯化第26-29页
 3 结果第29-33页
   ·目的片段的扩增及鉴定第29页
   ·pMD18-BHMT-His 的鉴定第29-30页
   ·pCMV-Flag-BHMT-His 的鉴定第30页
   ·pCMV-Flag-BHMT-His 转染 293T 细胞的蛋白表达与表达产物的鉴定第30-31页
   ·重组人 BHMT 真核表达载体的优选第31-32页
   ·真核细胞(293T)表达重组人 BHMT 蛋白的纯化第32-33页
 4 讨论第33-34页
 5 小结第34-35页
第二部分 检测人血清中 BHMT 的 ELISA 法的建立及其在急性肝损伤中的临床应用第35-51页
 1 材料第35-36页
   ·标本来源第35页
   ·主要试剂和耗材第35-36页
   ·溶液的配制第36页
   ·主要仪器设备第36页
 2 检测人血清中 BHMT 的 ELISA 法的建立第36-38页
   ·正交实验优选 ELISA 实验体系第36-37页
   ·ELISA 法的基本步骤第37页
   ·ELISA 法的 linearity-of-dilution 实验第37-38页
 3 ELISA 法的临床应用第38-39页
   ·建立人血清中 BHMT 的医学参考值范围第38页
   ·探讨 BHMT 和 ALT 的相关性第38页
   ·评价 BHMT 判别肝损伤的诊断方法第38-39页
   ·确定 BHMT 用于诊断急性肝损伤的 Cut-off 值第39页
   ·比较肾损伤病例与体检正常人血清中 BHMT 含量的差异第39页
   ·分析五例急性肝损伤病例血清中 BHMT 含量随时间变化的趋势第39页
 4 统计方法第39页
 5 结果第39-48页
   ·正交实验的结果第39-40页
   ·ELISA 法检测范围的确立及检测曲线的拟合第40-41页
   ·ELISA 法的 linearity-of-dilution 实验第41-42页
   ·建立人血清中 BHMT 的 95%医学参考值范围第42页
   ·探讨 BHMT 和 ALT 的相关性第42-44页
   ·评价 BHMT 判别急性肝损伤的诊断方法第44-45页
   ·确定 BHMT 用于诊断急性肝损伤的 Cut-off 值第45页
   ·探讨 BHMT 在反映急性肝损伤方面的特异性第45页
   ·探讨 BHMT 在反映急性肝损伤方面的灵敏性第45-48页
 6 讨论第48-50页
 7 小结第50-51页
总结第51-52页
参考文献第52-55页
文献综述第55-57页
代表性论著第57-60页
个人简历第60页
论文论文发表情况第60-61页
致谢第61页

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