英文缩略词表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
前言 | 第12-18页 |
一、肝脏损伤的原因 | 第12-13页 |
二、肝损伤的相关机制 | 第13-14页 |
三、目前肝损伤的检测指标 | 第14-15页 |
四、目前常用急性肝损伤诊断指标存在的问题 | 第15-16页 |
五、本研究的内容和意义 | 第16-18页 |
第一部分 重组人 BHMT 在 293T 细胞中的表达及纯化 | 第18-35页 |
1 实验材料 | 第18-20页 |
·质粒和菌株 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·主要培养基和溶液的配制 | 第18-19页 |
·实验设备 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-29页 |
·目的片段的扩增及鉴定 | 第20-21页 |
·pMD18-BHMT-His 的构建及鉴定 | 第21-23页 |
·pCMV-Flag-BHMT-His 的构建 | 第23-24页 |
·pCMV-Flag-BHMT-His 转染 293T 细胞的蛋白表达及表达产物的鉴定 | 第24-26页 |
·重组人 BHMT 真核表达载体的优选 | 第26页 |
·pCMV-Flag-BHMT-His 在 293T 细胞中的大量表达及纯化 | 第26-29页 |
3 结果 | 第29-33页 |
·目的片段的扩增及鉴定 | 第29页 |
·pMD18-BHMT-His 的鉴定 | 第29-30页 |
·pCMV-Flag-BHMT-His 的鉴定 | 第30页 |
·pCMV-Flag-BHMT-His 转染 293T 细胞的蛋白表达与表达产物的鉴定 | 第30-31页 |
·重组人 BHMT 真核表达载体的优选 | 第31-32页 |
·真核细胞(293T)表达重组人 BHMT 蛋白的纯化 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-34页 |
5 小结 | 第34-35页 |
第二部分 检测人血清中 BHMT 的 ELISA 法的建立及其在急性肝损伤中的临床应用 | 第35-51页 |
1 材料 | 第35-36页 |
·标本来源 | 第35页 |
·主要试剂和耗材 | 第35-36页 |
·溶液的配制 | 第36页 |
·主要仪器设备 | 第36页 |
2 检测人血清中 BHMT 的 ELISA 法的建立 | 第36-38页 |
·正交实验优选 ELISA 实验体系 | 第36-37页 |
·ELISA 法的基本步骤 | 第37页 |
·ELISA 法的 linearity-of-dilution 实验 | 第37-38页 |
3 ELISA 法的临床应用 | 第38-39页 |
·建立人血清中 BHMT 的医学参考值范围 | 第38页 |
·探讨 BHMT 和 ALT 的相关性 | 第38页 |
·评价 BHMT 判别肝损伤的诊断方法 | 第38-39页 |
·确定 BHMT 用于诊断急性肝损伤的 Cut-off 值 | 第39页 |
·比较肾损伤病例与体检正常人血清中 BHMT 含量的差异 | 第39页 |
·分析五例急性肝损伤病例血清中 BHMT 含量随时间变化的趋势 | 第39页 |
4 统计方法 | 第39页 |
5 结果 | 第39-48页 |
·正交实验的结果 | 第39-40页 |
·ELISA 法检测范围的确立及检测曲线的拟合 | 第40-41页 |
·ELISA 法的 linearity-of-dilution 实验 | 第41-42页 |
·建立人血清中 BHMT 的 95%医学参考值范围 | 第42页 |
·探讨 BHMT 和 ALT 的相关性 | 第42-44页 |
·评价 BHMT 判别急性肝损伤的诊断方法 | 第44-45页 |
·确定 BHMT 用于诊断急性肝损伤的 Cut-off 值 | 第45页 |
·探讨 BHMT 在反映急性肝损伤方面的特异性 | 第45页 |
·探讨 BHMT 在反映急性肝损伤方面的灵敏性 | 第45-48页 |
6 讨论 | 第48-50页 |
7 小结 | 第50-51页 |
总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
文献综述 | 第55-57页 |
代表性论著 | 第57-60页 |
个人简历 | 第60页 |
论文论文发表情况 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |