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双链RNA介导的拟南芥Cat3基因沉默

缩写表第1-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-11页
1. 前言第11-23页
 1.1 过氧化氢酶第11-18页
  1.1.1 过氧化氢酶的结构和功能第11-12页
  1.1.2 植物过氧化氢酶的分子进化及分类第12-14页
  1.1.3 拟南芥过氧化氢酶第14-16页
  1.1.4 植物中过氧化氢酶基因功能的研究第16页
  1.1.5 SA对过氧化氢酶的影响第16-18页
 1.2 研究基因功能的方法第18-21页
  1.2.1 正向和反向遗传学第18-19页
  1.2.2 RNAi现象及其机制第19页
  1.2.3 RNAi技术用于基因功能研究的优点及其在植物中的应用第19-21页
 1.3 论文的选题意义及依据第21-23页
2. 材料与方法第23-34页
 2.1 实验材料和试剂第23-24页
 2.2 实验方法第24-32页
  2.2.1 拟南芥(Arabidopsis thaliana)野生型材料的种植方法第24页
  2.2.2 CTAB法制备拟南芥基因组DNA第24-25页
  2.2.3 PCR扩增第25页
  2.2.4 DNA的琼脂糖凝胶电泳第25-26页
  2.2.5 从低熔点琼脂糖中回收目的DNA片段第26页
  2.2.6 核酸的定量第26页
  2.2.7 DNA的限制性内切酶消化第26-27页
  2.2.8 酶切产物的连接第27页
  2.2.9 大肠杆菌(E.coli)质粒提取第27-28页
  2.2.10 大肠杆菌(E.coli)感受态细胞的制备和转化第28页
  2.2.11 DNA末端的去磷酸化第28-29页
  2.2.12 农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)质粒提取第29页
  2.2.13 农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)感受态的制备及转化第29页
  2.2.14 农杆菌介导拟南芥转化(Floraldip)第29-30页
  2.2.15 潜在转化株系的筛选第30页
  2.2.16 Trizol法提取拟南芥总RNA第30页
  2.2.17 RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳第30-31页
  2.2.18 反转录制备拟南芥cNDA第31页
  2.2.19 从cDNA中扩增目的基因第31-32页
 2.3 实验溶液第32-34页
  2.3.1 常用溶液第32页
  2.3.2 抗生素第32页
  2.3.3 培养基第32-34页
3. 实验步骤及结果第34-52页
 3.1 生物信息学分析结果第34-35页
  3.1.1 植物几种过氧化氢酶间的同源性分析结果第34页
  3.1.2 拟南芥Cat3启动子区域结构分析第34-35页
 3.2 拟南芥Cat3基因片段的克隆:第35-39页
  3.2.1 引物设计第35-37页
  3.2.2 基因扩增第37页
  3.2.3 目的基因扩增产物的测序第37-39页
 3.3 质粒构建:第39-48页
  3.3.1 质粒构建方案:第39-42页
   3.3.1.1 质粒pFGC5941cat3as的构建方案第39-40页
   3.3.1.2 质粒pMD18T-cat3的构建方案第40-41页
   3.3.1.3 质粒pFGC5941cat3ds的构建方案第41-42页
  3.3.2 质粒构建步骤及结果第42-48页
   3.3.2.1 质粒pFGC5941cat3as的构建第42-44页
   3.3.2.2 质粒pMD18T-cat3的构建第44-46页
   3.3.3.3 质粒pFGCcat3ds的构建第46-48页
 3.4 重组pFGCcat3ds质粒对农杆菌的转化:第48-49页
 3.5 农杆菌介导的拟南芥转化第49页
 3.6 潜在转化株的筛选第49-50页
 3.7 不同处理对Cat3基因转录水平的影响第50-52页
4. 讨论第52-57页
5. 结论第57-58页
6. 参考文献第58-63页
致谢第63页

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