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滇黑两省南瓜病毒病病原鉴定及其外壳蛋白基因克隆

摘要第1-12页
Abstract第12-14页
1 引言第14-30页
   ·葫芦科作物病毒病原研究概况第14-21页
     ·葫芦科作物病毒病原第14-19页
     ·葫芦科作物六种主要病毒病原的基本特性第19-21页
   ·葫芦科作物病毒病检测技术第21-24页
     ·生物学鉴定第21-22页
     ·光镜和电镜观察第22页
     ·血清学技术第22-23页
     ·分子生物学方法第23-24页
   ·葫芦科作物病毒病的防治第24-27页
     ·葫芦科作物抗病毒杂交育种第24-26页
     ·葫芦科作物抗病毒基因工程育种第26-27页
     ·葫芦科作物病毒病的其它防治方法第27页
   ·相关领域的研究进展第27-29页
   ·课题来源和主要研究内容第29-30页
2 材料与方法第30-39页
   ·材料第30页
     ·南瓜病毒病样的电镜、ELISA检测材料第30页
     ·南瓜病毒病原寄主范围的测定第30页
     ·南瓜病毒病样的PCR检测材料第30页
     ·南瓜抗源材料筛选第30页
   ·方法第30-39页
     ·病样的电镜检测第30-31页
     ·病样的ELISA检测第31-33页
     ·南瓜病毒病原的寄主范围测定第33页
     ·南瓜病毒病原的PCR检测第33-35页
     ·主要病毒病原的外壳蛋白基因克隆第35-37页
     ·抗源材料的筛选第37-39页
3 结果与分析第39-86页
   ·南瓜病毒病样的电镜检测第39-44页
     ·田间采集病样的表现症状第39-40页
     ·电镜的负染色法观察第40-41页
     ·病样的电镜细胞病理观察第41-44页
   ·南瓜病样的ELISA检测第44-45页
   ·南瓜主要病毒病原的寄主范围测定第45-47页
     ·CMV接种方法的确定第45页
     ·主要病毒病原的寄主范围测定第45-47页
   ·主要病毒病原外壳蛋白基因的分离克隆第47-52页
     ·主要病毒病原外壳蛋白基因的PCR检测第47页
     ·IC-PCR、RT-PCR两种检测方法灵敏度的比较第47-49页
     ·重组克隆的PCR鉴定第49-50页
     ·重组克隆的酶切鉴定第50-52页
   ·外壳蛋白基因的序列和酶切位点分析第52-82页
     ·PRSV分离物的序列和酶切位点分析第52-67页
     ·WMV分离物的序列分析和酶切位点比较第67-72页
     ·CMV分离物的序列分析和酶切位点比较第72-82页
   ·抗主要病毒病原南瓜材料的筛选第82-86页
4 讨论第86-93页
   ·黑龙江、云南两省南瓜病毒病原种类比较第86页
   ·三种主要病毒病原的株系划分第86-88页
     ·PRSV的株系划分第86-87页
     ·CMV的株系划分第87页
     ·WMV的株系划分第87-88页
   ·抗源材料的筛选第88页
     ·抗性指标的评价标准第88页
     ·南瓜抗源材料筛选第88页
   ·南瓜病毒病原的系统鉴定第88-89页
   ·PCR扩增检测第89-92页
     ·病毒外壳蛋白基因PCR扩增引物的设计第89页
     ·RT-PCR、IC-PCR两种方法的比较第89-92页
   ·本实验今后的研究展望第92-93页
5 结论第93-95页
   ·黑龙江、云南两省南瓜病毒种类及主要病毒病原第93页
   ·主要病毒病原侵染南瓜引起的细胞病理第93页
   ·南瓜三种病毒病原外壳蛋白基因的克隆和序列分析第93-94页
     ·PRSV云南五个南瓜分离物的外壳蛋白基因序列分析第93-94页
     ·WMV黑龙江南瓜分离物外壳蛋白基因的序列分析第94页
     ·CMV黑龙江、云南两个南瓜分离物的外壳蛋白基因的序列分析第94页
   ·云南、黑龙江两省南瓜抗源材料的筛选第94-95页
参考文献第95-105页
附录1 常用试剂的配制第105-107页
附录2 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器第107-108页
攻读博士学位期间所发表的学术论文第108-109页
致谢第109页

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