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白菜核不育两用系基因组AFLP差异片段筛选、克隆及序列分析

0 前言第1-13页
1 文献综述第13-25页
 1.1 植物雄性不育研究概况第13-21页
  1.1.1 植物雄性不育的表现第13-14页
  1.1.2 植物雄性不育的类型划分第14-15页
  1.1.3 植物雄性不育的细胞学研究第15-17页
   1.1.3.1 败育发生的不同时期第15-16页
   1.1.3.2 绒毡层与花粉败育的关系第16-17页
  1.1.4 植物雄性不育相关基因的标记定位研究第17-20页
   1.1.4.1 育性相关基因的遗传学定位第17页
   1.1.4.2 育性相关基因性状标记分析第17-18页
   1.1.4.3 育性相关基因的分子标记第18-20页
  1.1.5 植物雄性不育相关基因的克隆第20-21页
 1.2 AFLP分子标记及其在植物雄性不育研究中的应用第21-25页
  1.2.1 AFLP的基本原理第21-23页
  1.2.2 AFLP技术在植物雄性不育研究中的应用第23-25页
2 材料与方法第25-34页
 2.1 实验材料第25-26页
 2.2 基因组DNA的提取与检测第26-27页
 2.3 AFLP分析第27-28页
  2.3.1 AFLP反应体系第27页
  2.3.2 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第27-28页
  2.3.3 银染显色第28页
 2.4 凝胶上回收多态性DNA片段第28-29页
  2.4.1 聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA片段第28页
  2.4.2 琼脂糖凝胶上回收DNA片段第28-29页
 2.5 目的片段的克隆、测序第29-31页
  2.5.1 试剂准备第29页
  2.5.2 受体菌培养第29-30页
  2.5.3 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第30页
  2.5.4 片段DNA与T载体的连接第30页
  2.5.5 质粒的转化第30页
  2.5.6 质粒抽提第30-31页
  2.5.7 质粒的检测第31页
 2.6 Southern印迹分析第31-32页
  2.6.1 转膜第31-32页
  2.6.2 探针标记第32页
  2.6.3 标记探针杂交第32页
 2.7 标记的SCAR转换第32-34页
3 结果与分析第34-46页
 3.1 植株性状观察及育性鉴定第34页
 3.2 花粉活力荧光观察及育性鉴定第34-35页
 3.3 白菜基因组DNA的提取与检测第35-37页
 3.4 白菜核不育两用系基因组DNA多态性分析第37-38页
  3.4.1 基因组DNA酶切连接的检测第37页
  3.4.2 引物筛选及差异条带的获得第37-38页
 3.5 差异条带回收及Southern印迹分析第38-39页
 3.6 可育株特异片段MF-14的克隆测序第39-40页
 3.7 MF-14片段序列分析第40页
 3.8 序列比较分析第40-45页
 3.9 AFLP标记转换SCAR标记分析第45-46页
4 讨论第46-51页
 4.1 植株育性鉴定与基因组DNA混合池的构建第46-47页
 4.2 AFLP反应体系酶切组合及选择性引物碱基数目的确定第47-48页
 4.3 白菜核雄性不育两用系育性基因位点突变探讨第48-49页
 4.4 差异片段MF-14序列比较研究第49页
 4.5 SCAR标记转换探讨第49-50页
 4.6 后续研究探讨第50-51页
参考文献第51-54页

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