0 前言 | 第1-13页 |
1 文献综述 | 第13-25页 |
1.1 植物雄性不育研究概况 | 第13-21页 |
1.1.1 植物雄性不育的表现 | 第13-14页 |
1.1.2 植物雄性不育的类型划分 | 第14-15页 |
1.1.3 植物雄性不育的细胞学研究 | 第15-17页 |
1.1.3.1 败育发生的不同时期 | 第15-16页 |
1.1.3.2 绒毡层与花粉败育的关系 | 第16-17页 |
1.1.4 植物雄性不育相关基因的标记定位研究 | 第17-20页 |
1.1.4.1 育性相关基因的遗传学定位 | 第17页 |
1.1.4.2 育性相关基因性状标记分析 | 第17-18页 |
1.1.4.3 育性相关基因的分子标记 | 第18-20页 |
1.1.5 植物雄性不育相关基因的克隆 | 第20-21页 |
1.2 AFLP分子标记及其在植物雄性不育研究中的应用 | 第21-25页 |
1.2.1 AFLP的基本原理 | 第21-23页 |
1.2.2 AFLP技术在植物雄性不育研究中的应用 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-34页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.2 基因组DNA的提取与检测 | 第26-27页 |
2.3 AFLP分析 | 第27-28页 |
2.3.1 AFLP反应体系 | 第27页 |
2.3.2 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27-28页 |
2.3.3 银染显色 | 第28页 |
2.4 凝胶上回收多态性DNA片段 | 第28-29页 |
2.4.1 聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA片段 | 第28页 |
2.4.2 琼脂糖凝胶上回收DNA片段 | 第28-29页 |
2.5 目的片段的克隆、测序 | 第29-31页 |
2.5.1 试剂准备 | 第29页 |
2.5.2 受体菌培养 | 第29-30页 |
2.5.3 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第30页 |
2.5.4 片段DNA与T载体的连接 | 第30页 |
2.5.5 质粒的转化 | 第30页 |
2.5.6 质粒抽提 | 第30-31页 |
2.5.7 质粒的检测 | 第31页 |
2.6 Southern印迹分析 | 第31-32页 |
2.6.1 转膜 | 第31-32页 |
2.6.2 探针标记 | 第32页 |
2.6.3 标记探针杂交 | 第32页 |
2.7 标记的SCAR转换 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-46页 |
3.1 植株性状观察及育性鉴定 | 第34页 |
3.2 花粉活力荧光观察及育性鉴定 | 第34-35页 |
3.3 白菜基因组DNA的提取与检测 | 第35-37页 |
3.4 白菜核不育两用系基因组DNA多态性分析 | 第37-38页 |
3.4.1 基因组DNA酶切连接的检测 | 第37页 |
3.4.2 引物筛选及差异条带的获得 | 第37-38页 |
3.5 差异条带回收及Southern印迹分析 | 第38-39页 |
3.6 可育株特异片段MF-14的克隆测序 | 第39-40页 |
3.7 MF-14片段序列分析 | 第40页 |
3.8 序列比较分析 | 第40-45页 |
3.9 AFLP标记转换SCAR标记分析 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-51页 |
4.1 植株育性鉴定与基因组DNA混合池的构建 | 第46-47页 |
4.2 AFLP反应体系酶切组合及选择性引物碱基数目的确定 | 第47-48页 |
4.3 白菜核雄性不育两用系育性基因位点突变探讨 | 第48-49页 |
4.4 差异片段MF-14序列比较研究 | 第49页 |
4.5 SCAR标记转换探讨 | 第49-50页 |
4.6 后续研究探讨 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |