半滑舌鳎溃疡相关气单胞菌的鉴定及其致病性研究
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| 第一节 半滑舌鳎及其病害研究进展 | 第10-15页 |
| 1 半滑舌鳎 | 第10页 |
| 2 半滑舌鳎主要疾病 | 第10-11页 |
| 3 半滑舌鳎溃疡病及其病原研究进展 | 第11-15页 |
| 3.1 病毒 | 第11页 |
| 3.2 寄生虫 | 第11-12页 |
| 3.3 细菌 | 第12-15页 |
| 第二节 鱼类气单胞菌研究进展 | 第15-23页 |
| 1 鱼类常见气单胞菌及其致病性 | 第15-18页 |
| 1.1 杀鲑气单胞菌 | 第16-18页 |
| 1.2 中间气单胞菌 | 第18页 |
| 2 气单胞菌的致病机制 | 第18-20页 |
| 3 气单胞菌常用鉴定技术 | 第20-22页 |
| 3.1 基于 16S rRNA的分子鉴定方法 | 第21页 |
| 3.2 生化特征鉴定方法 | 第21页 |
| 3.3 基于管家基因的种特异性分子鉴定方法 | 第21-22页 |
| 4 气单胞菌药物敏感性 | 第22-23页 |
| 第三节 本研究的目的、意义和实验设计 | 第23-25页 |
| 第二章 半滑舌鳎溃疡相关细菌的分离与分子鉴定 | 第25-38页 |
| 第一节 半滑舌鳎溃疡相关细菌的分离 | 第25-28页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| 1.1 材料 | 第25页 |
| 1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
| 1.3 主要试剂 | 第26页 |
| 1.4 细菌分离、纯化培养 | 第26页 |
| 1.5 革兰氏染色 | 第26-27页 |
| 1.6 菌株的保存 | 第27页 |
| 2 结果 | 第27-28页 |
| 2.1 临床症状 | 第27页 |
| 2.2 分离菌特点 | 第27-28页 |
| 第二节 基于 16S rRNA基因的细菌鉴定 | 第28-32页 |
| 1 材料与方法 | 第28-30页 |
| 1.1 主要仪器 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂 | 第28页 |
| 1.3 DNA模板提取 | 第28-29页 |
| 1.4 16SrRNA基因PCR扩增 | 第29-30页 |
| 1.5 16SrRNA序列系统发育分析 | 第30页 |
| 2、结果 | 第30-32页 |
| 2.1 16SrRNA基因扩增 | 第30-31页 |
| 2.2 两株菌 16S rRNA序列系统发育分析 | 第31-32页 |
| 第三节 基于gyrB基因的菌种鉴定 | 第32-35页 |
| 1 材料与方法 | 第32-34页 |
| 1.1 主要仪器 | 第32页 |
| 1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 1.3 DNA模板提取 | 第32页 |
| 1.4 gyrB基因PCR扩增 | 第32-33页 |
| 1.5 gyrB序列系统发育分析 | 第33-34页 |
| 2 结果 | 第34-35页 |
| 2.1 gyrB基因PCR扩增 | 第34页 |
| 2.2 gyrB序列系统发育分析 | 第34-35页 |
| 讨论 | 第35-37页 |
| 1 基于16SrRNA的细菌鉴定方法 | 第35-36页 |
| 2 基于gyrB基因气单胞菌鉴定方法的建立 | 第36-37页 |
| 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 溃疡相关气单胞菌的生物学特性与药敏试验 | 第38-48页 |
| 第一节 生化特征分析 | 第38-43页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| 1.1API 20NE生化检测 | 第38-40页 |
| 1.2 其它生化指标检测 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-43页 |
| 第二节 药敏试验 | 第43-46页 |
| 1 材料与方法 | 第43-44页 |
| 1.1 菌株 | 第43页 |
| 1.2 培养基和试剂 | 第43页 |
| 1.3 主要仪器 | 第43-44页 |
| 1.4 微量肉汤稀释法实验 | 第44页 |
| 2 结果 | 第44-46页 |
| 讨论 | 第46-47页 |
| 1 气单胞菌的生化特征分析 | 第46页 |
| 2 气单胞菌的药敏实验 | 第46-47页 |
| 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 溃疡相关气单胞菌的致病性分析 | 第48-57页 |
| 第一节 两种气单胞菌对健康半滑舌鳎的致病性 | 第48-51页 |
| 1 材料与方法 | 第48-49页 |
| 1.1 材料、试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 1.2 攻毒菌液准备 | 第49页 |
| 1.3 半滑舌鳎感染实验 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-51页 |
| 2.1 菌株HX0416的致死率 | 第49-50页 |
| 2.2 菌株HX1316的致死率 | 第50-51页 |
| 第二节 两种气单胞菌胞外蛋白分析 | 第51-54页 |
| 1 材料与方法 | 第51-53页 |
| 1.1 仪器、试剂 | 第51页 |
| 1.2 蛋白提取和电泳 | 第51-52页 |
| 1.3 高表达蛋白质谱分析 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-54页 |
| 2.1 胞外蛋白电泳 | 第53-54页 |
| 2.2 杀鲑气单胞菌高表达蛋白质谱分析 | 第54页 |
| 讨论 | 第54-56页 |
| 1 气单胞菌的致病性 | 第54-55页 |
| 2 气单胞菌的胞外蛋白研究 | 第55-56页 |
| 本章小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 发表论文 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 附录A | 第69-70页 |
