| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1 防御素概述 | 第9-13页 |
| ·防御素简介 | 第9页 |
| ·人β防御素 2(Human defensin 2, HBD2)结构与功能 | 第9-11页 |
| ·HBD2 抗肿瘤活性及其机制 | 第11-13页 |
| ·HBD2 作为抗肿瘤潜能分子所存在的瓶颈 | 第13页 |
| 2 HER2 靶向的药物运载系统 | 第13-19页 |
| ·HER2 简介及 HER2 靶向药物疗法 | 第13-17页 |
| ·HER2 靶向抗体运载系统 | 第17-19页 |
| 3 课题思路 | 第19-20页 |
| 4 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 基因的克隆、表达及蛋白质的纯化 | 第21-33页 |
| 1 实验仪器和材料 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-26页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第22-24页 |
| ·融合蛋白 SUMO-HBD2-4D5 的纯化鉴定 | 第24-26页 |
| ·融合蛋白 SUMO-4D5 纯化与鉴定 | 第26页 |
| 3 实验结果 | 第26-33页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第26-30页 |
| ·融合蛋白的纯化与鉴定 | 第30-33页 |
| 第三章 蛋白体外生物活性检测 | 第33-46页 |
| 1 实验仪器和材料 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-37页 |
| ·激光共聚焦扫描显微镜观察蛋白与肿瘤细胞表面 HER2 的特异性结合能力 | 第34页 |
| ·CCK-8 法检测蛋白药物对肿瘤细胞的细胞毒性作用 | 第34-35页 |
| ·流式细胞检测 HBD2-4D5 对细胞状态的影响 | 第35页 |
| ·Western blot 检测 HBD2-4D5 对乳腺癌细胞凋亡通路 Bax 和 Bcl-2 的影响 | 第35-36页 |
| ·扫描电子显微镜观察 HBD2-4D5 对细胞膜的影响 | 第36页 |
| ·透射电子显微镜观察 HBD2-4D5 对细胞超微结构的影响 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-46页 |
| ·激光共聚焦扫描显微镜观察 | 第37-39页 |
| ·CCK-8 法检测蛋白药物对肿瘤细胞的细胞毒性作用 | 第39页 |
| ·流式细胞术检测 HBD2-4D5 对细胞状态的影响 | 第39-41页 |
| ·Western blot 检测 HBD2-4D5 对乳腺癌细胞凋亡通路 Bax 和 Bcl-2 的影响 | 第41-42页 |
| ·药物对细胞形态结构的影响 | 第42-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-52页 |
| 1 融合蛋白的设计和表达纯化策略 | 第46-49页 |
| 2 HBD2-4D5 的靶向细胞毒作用及其机制探讨 | 第49-52页 |
| 结论 | 第52-54页 |
| 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 附录一：各种试剂和培养基的配制 | 第62-65页 |
| 附录二：目的蛋白的氨基酸序列 | 第65页 |
| 附录三：SUMO 基因序列 | 第65-66页 |
| 英文缩略词表 | 第66-67页 |
| 攻硕期间发表论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
