| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-35页 |
| ·GFP的性质和结构 | 第12-13页 |
| ·突变GFP | 第13-15页 |
| ·GFP与其它荧光蛋白(FP)的比较 | 第15-16页 |
| ·GFP在原核生物中的应用 | 第16-27页 |
| ·GFP与原核生物基因表达研究 | 第18-19页 |
| ·GFP与活细胞内蛋白质定位与装配研究 | 第19-20页 |
| ·GFP与细菌生态学研究 | 第20-24页 |
| ·GFP作为遗传工具筛选特定环境条件下表达的启动子或基因 | 第24-26页 |
| ·GFP与其它遗传标记的联合应用 | 第26-27页 |
| ·GFP标记细胞的检测方法 | 第27-30页 |
| ·GFP标记细胞的检测方法 | 第27页 |
| ·荧光分光光度计 | 第27-28页 |
| ·荧光显微镜 | 第28页 |
| ·激光共焦扫描显微镜(LCSM) | 第28-29页 |
| ·定时显微镜(Time-lapse microscopy) | 第29页 |
| ·流式细胞仪 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30页 |
| ·本论文的研究背景及目标 | 第30-35页 |
| ·当今有关根瘤菌研究的两大热点问题 | 第30-31页 |
| ·报告基因在根瘤菌研究中的应用 | 第31-33页 |
| ·携带报告基因的转移载体系统 | 第33页 |
| ·广寄主范围、稳定性质粒载体pTR102 | 第33-34页 |
| ·华癸中生根瘤菌结瘤阶段共生关系的遗传研究 | 第34-35页 |
| 2 实验材料和方法 | 第35-47页 |
| ·材料 | 第35-39页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·供试菌株 | 第35页 |
| ·供试质粒 | 第35-38页 |
| ·主要生化试剂 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·抗生素 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-47页 |
| ·DNA重组操作技术 | 第39-43页 |
| ·蛋白质分析操作技术 | 第43页 |
| ·根瘤菌遗传操作技术 | 第43-45页 |
| ·报告基因检测方法 | 第45-46页 |
| ·紫云英根瘤的超微结构分析 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-95页 |
| ·G~-广宿主范围稳定性质粒pTR102在华癸中生根瘤菌中的稳定性测定 | 第47-54页 |
| ·含luxAB的标记质粒pHN106的稳定性检测 | 第47-50页 |
| ·含gusA的标记质粒pHN109的构建及稳定性检测 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·利用wtgfp作报告基因的启动子探针载体的构建 | 第54-64页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·wtgfp在大肠杆菌中的诱导表达 | 第54-57页 |
| ·大肠杆菌启动子探针载体pHN117的构建与验证 | 第57-59页 |
| ·G~-广宿主范围启动子探针载体pHN127的构建与验证 | 第59-61页 |
| ·7653R转录融合子库的构建与具调控活性的DNA片段的钓取 | 第61页 |
| ·共生条件下wtgfp在华癸中生根瘤菌中表达的原位监测 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·以gfpmut3作报告基因的G~-广宿主范围启动子探针载体pHN1006的构建与应用 | 第64-78页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·大肠杆菌启动子探针载体pHN1005的构建与验证 | 第64-67页 |
| ·G~-广宿主范围启动子探针载体pHN1006的构建 | 第67页 |
| ·7653R基因组中具调控活性的DNA片段的钓取 | 第67-70页 |
| ·标记质粒的稳定性 | 第70-71页 |
| ·gfp基因表达对宿主菌生长的影响 | 第71-72页 |
| ·标记菌株感染紫云英所结根瘤的超微结构 | 第72-73页 |
| ·利用激光共焦扫描显微镜原位监测7653R与紫云英共生早期结瘤过程 | 第73-74页 |
| ·利用荧光显微镜原位监测7653R与紫云英共生早期结瘤过程 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-78页 |
| ·蓝色荧光蛋白基因bfp在华癸中生根瘤菌中的表达 | 第78-84页 |
| ·引言 | 第78页 |
| ·bfp在大肠杆菌中的诱导表达 | 第78-80页 |
| ·以bfp作报告基因的大肠杆菌启动子探针载体pHN130的构建与验证 | 第80-81页 |
| ·bfp在华癸中生根瘤菌中的诱导表达 | 第81-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| ·一个重组绿色荧光蛋白基因gfp’的鉴定 | 第84-95页 |
| ·pHN122的酶切分析 | 第84-86页 |
| ·pHN122的亚克隆分析 | 第86-87页 |
| ·pHN122上bfp／gfp片段的序列分析 | 第87-90页 |
| ·光谱分析 | 第90-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| 4 总结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
