| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| ·植物非生物胁迫研究进展 | 第11-14页 |
| ·非生物胁迫及对植物生长的影响 | 第11-12页 |
| ·植物响应非生物胁迫的分子机制 | 第12-14页 |
| ·植物钙网织蛋白(Calreticulin,CRTs)研究进展 | 第14-20页 |
| ·CRT家族的结构域 | 第14-15页 |
| ·CRT家族的亚型 | 第15-16页 |
| ·CRTs在植物中的生物学功能 | 第16-20页 |
| ·高山冰缘植物概况 | 第20-25页 |
| ·高山冰缘植物生理生态特征 | 第20-21页 |
| ·高山离子芥研究进展 | 第21-23页 |
| ·本研究的科学意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-35页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·半定量PCR法(RT-PCR) | 第25-27页 |
| ·高山离子芥总RNA提取 | 第25-26页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第26页 |
| ·RT-PCR建立优化 | 第26-27页 |
| ·载体构建 | 第27-28页 |
| ·植物超表达载体构建 | 第27-28页 |
| ·RNAi表达载体构建 | 第28页 |
| ·农杆菌介导的烟草瞬时转化 | 第28-29页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·烟草介导的瞬时转化 | 第29页 |
| ·CbCRT1基因开放阅读框区域原核表达及蛋白纯化 | 第29-30页 |
| ·原核诱导表达 | 第29页 |
| ·镍柱亲合层析法纯化蛋白 | 第29-30页 |
| ·Western-blot | 第30-31页 |
| ·转膜法纯化抗体 | 第30-31页 |
| ·植物总蛋白的提取 | 第31页 |
| ·Western-blot步骤 | 第31页 |
| ·高山离子芥悬浮细胞原生质体的提取 | 第31页 |
| ·流式细胞术 | 第31-32页 |
| ·负载钙离子荧光染料 | 第31页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第31-32页 |
| ·农杆菌介导的转基因方法及转基因种子的筛选 | 第32页 |
| ·浸花法转染拟南芥 | 第32页 |
| ·转基因纯合体的获得 | 第32页 |
| ·拟南芥纯合突变体的筛选鉴定 | 第32-33页 |
| ·纯合突变体的筛选 | 第32-33页 |
| ·纯合突变体CRT1表达量的鉴定 | 第33页 |
| ·拟南芥纯合突变体表型研究 | 第33-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-48页 |
| ·高山离子芥钙网织蛋白基因(CbCRT1)组织表达分析 | 第35页 |
| ·高山离子芥钙网织蛋白基因(CbCRT1)亚细胞定位分析 | 第35-37页 |
| ·原核表达及蛋白纯化分析 | 第37页 |
| ·高山离子芥钙网织蛋白基因(CbCRT1)对NaCl处理的响应 | 第37-39页 |
| ·转录水平对NaCl处理的响应 | 第38页 |
| ·翻译水平对NaCl处理的响应 | 第38-39页 |
| ·高山离子芥钙网织蛋白基因(CbCRT1)对ABA处理的响应 | 第39-41页 |
| ·转录水平对ABA处理的响应 | 第39-40页 |
| ·翻译水平对ABA处理的响应 | 第40-41页 |
| ·高山离子芥细胞内钙离子响应NaCl、ABA处理 | 第41-42页 |
| ·高山离子芥钙网织蛋白基因(CbCRT1)超表达阳性转基因植株的获得 | 第42-43页 |
| ·T-DNA插入拟南芥纯合突变体的筛选 | 第43-44页 |
| ·突变体PCR筛选 | 第43-44页 |
| ·纯合突变体CRT1基因表达量鉴定 | 第44页 |
| ·T-DNA插入拟南芥纯合突变体表型研究 | 第44-48页 |
| ·营养生长 | 第44-45页 |
| ·萌发特征 | 第45-46页 |
| ·幼苗根长 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第48-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
