| 提要 | 第1-9页 |
| 引言 | 第9-31页 |
| 1 重组蛋白的纯化 | 第9-17页 |
| ·纯化原则 | 第9-10页 |
| ·层析技术 | 第10-16页 |
| ·分子筛层析 | 第11页 |
| ·疏水作用层析 | 第11-12页 |
| ·离子交换层析 | 第12-14页 |
| ·亲和层析 | 第14-16页 |
| ·膜色谱层析 | 第16页 |
| ·热原质的去除 | 第16-17页 |
| 2 重组蛋白的冷冻干燥 | 第17-31页 |
| ·干燥的种类 | 第17页 |
| ·冷冻干燥的原理 | 第17-18页 |
| ·冷冻干燥的优点 | 第18页 |
| ·冷冻干燥的缺点 | 第18页 |
| ·冷冻干燥技术的应用 | 第18-19页 |
| ·蛋白质的稳定性 | 第19页 |
| ·蛋白质变性机理 | 第19-20页 |
| ·引起蛋白质损伤的各种应力 | 第20-21页 |
| ·保护剂的应用 | 第21-23页 |
| ·保护机理 | 第21页 |
| ·保护剂分类 | 第21-23页 |
| ·冷冻干燥的过程 | 第23-25页 |
| ·预冻 | 第23-24页 |
| ·升华干燥 | 第24-25页 |
| ·解析干燥 | 第25页 |
| ·药品的贮存 | 第25-31页 |
| 材料与方法 | 第31-41页 |
| 1 实验材料 | 第31-33页 |
| ·主要实验仪器 | 第31页 |
| ·主要试剂和材料 | 第31-32页 |
| ·主要溶液 | 第32-33页 |
| 2 主要方法 | 第33-41页 |
| ·一级种子液 | 第33页 |
| ·二级种子液 | 第33-34页 |
| ·发酵培养 | 第34页 |
| ·装柱 | 第34页 |
| ·裂菌 | 第34-35页 |
| ·Q-Sepharose 层析 | 第35页 |
| ·复性透析 | 第35-36页 |
| ·Phenyl-Sepharose 层析 | 第36页 |
| ·除内毒素 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE | 第37页 |
| ·蛋白质浓度检测 | 第37-38页 |
| ·内毒素检测 | 第38页 |
| ·小鼠脾细胞悬浮液的制备 | 第38-39页 |
| ·~3H-TdR 掺入法检测法 | 第39页 |
| ·流式细胞仪检测法 | 第39-40页 |
| ·统计学分析 | 第40-41页 |
| 实验结果 | 第41-51页 |
| 1 重组蛋白HSP-MUC1 的纯化 | 第41-48页 |
| ·HSP-MUC1 发酵条件的选择 | 第42页 |
| ·HSP-MUC1 的变复性纯化 | 第42-46页 |
| ·Q-Sepharose FF 层析洗脱条件 | 第42-43页 |
| ·缓冲液pH 值的影响 | 第43页 |
| ·透析复性 | 第43-44页 |
| ·Phenyl-Sehparose FF 层析洗脱条件 | 第44-45页 |
| ·除内毒素 | 第45页 |
| ·变复性纯化流程的确定 | 第45-46页 |
| ·HSP-MUC1 活性的研究 | 第46-48页 |
| ·刺激小鼠脾细胞增殖 | 第46-47页 |
| ·刺激小鼠单个核细胞CD80 上调 | 第47-48页 |
| 2 重组蛋白FMDV-VP1 的冷冻干燥 | 第48-51页 |
| ·FMDV-VP1 发酵条件的选择 | 第48页 |
| ·FMDV-VP1 冻干过程的选择 | 第48-49页 |
| ·FMDV-VP1 冻干保护剂的选择 | 第49-51页 |
| 图片和表格 | 第51-69页 |
| 讨论 | 第69-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 中文摘要 | 第82-86页 |
| ABSTRACT | 第86-90页 |
| 致谢 | 第90页 |