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大豆尿黑酸叶绿醇转移酶(HPT)基因的分离与功能分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 绪论第11-27页
   ·天然维生素E 研究进展第11-20页
     ·天然维生素E 的结构及分类第11-13页
     ·天然维生素E 的合成部位及分布第13页
     ·天然维生素E 的功能与应用第13-14页
     ·天然维生素E(α-生育酚)生物合成途径研究进展第14-16页
     ·天然维生素E 生物合成的调控和基因工程第16-20页
   ·植物逆境与维生素E第20-21页
   ·植物遗传转化研究进展第21-24页
     ·植物遗传转化的优点第21-22页
     ·植物遗传转化方法第22-24页
   ·模式植物拟南芥的遗传转化研究进展第24-25页
     ·拟南芥的生物学特性第24-25页
     ·拟南芥的遗传转化方法第25页
   ·研究背景及意义第25-26页
   ·实验设计第26-27页
第二章 大豆HPT 基因克隆第27-36页
   ·材料第27-29页
     ·菌种第27页
     ·载体第27页
     ·工具酶第27页
     ·化学试剂第27页
     ·实验设备第27-28页
     ·常用的溶液和缓冲液第28-29页
     ·引物及DNA 合成及测序第29页
   ·实验方法第29-32页
     ·大豆叶片总RNA 的提取(Trizol 法)第29-30页
     ·反转录反应(TOYOBO 试剂盒)第30页
     ·获得大豆HPT 基因的部分cDNA 序列第30-32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·大豆中总RNA 的提取及电泳第32-33页
     ·大豆HPT 基因全长序列的获得第33-36页
第三章 大豆HPT 基因转基因拟南芥的获得及功能分析第36-55页
   ·材料第36-37页
     ·菌种和植物实验材料第36页
     ·载体第36页
     ·工具酶第36页
     ·试剂盒第36-37页
     ·测序和引物合成第37页
   ·实验方法第37-49页
     ·植物稳定转化表达载体 pBI121-HPT 的构建第37页
     ·农杆菌LBA4404 电击感受态细胞的制备和农杆菌转化第37-38页
     ·农杆菌质粒DNA 的提取第38-39页
     ·拟南芥转化(Floral Dipping)法第39-40页
     ·抗性筛选转基因植株第40-41页
     ·转基因植株PCR 检测第41-42页
     ·纯系转基因植株的获得第42-43页
     ·纯系转基因拟南芥的Northern blotting 分析第43-48页
     ·转基因拟南芥生育酚的测定第48-49页
   ·结果与分析第49-55页
     ·植物转化表达载体 pBI121-HPT 的构建第49-50页
     ·农杆菌转化第50页
     ·拟南芥的转化第50-51页
     ·转基因拟南芥的Northern blotting第51-52页
     ·转基因拟南芥维生素E 的测定第52-55页
第四章 结论第55-56页
参考文献第56-62页
附录I第62-63页
附录II第63-64页
致谢第64页

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