中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
引言 | 第15-29页 |
1 ALV-J 和 REV 的基本概况 | 第15-16页 |
2 ALV-J 和REV 的分子病毒学特性 | 第16-20页 |
·ALV-J 的分子病毒学特性 | 第16-18页 |
·REV 的分子病毒学特性 | 第18-20页 |
3 ALV-J 和REV 的致病性 | 第20-22页 |
·ALV-J 的致病性 | 第20-21页 |
·REV 的致病性 | 第21-22页 |
4 ALV-J 和 REV 的免疫抑制作用 | 第22-23页 |
·ALV-J 的免疫抑制作用 | 第23页 |
·REV 的免疫抑制作用 | 第23页 |
5 ALV-J 和REV 的传播方式 | 第23-24页 |
·ALV-J 的传播方式 | 第23页 |
·REV 的传播方式 | 第23-24页 |
6 ALV-J 和REV 的鉴别与诊断 | 第24-26页 |
·ALV-J 的鉴别与诊断 | 第24-25页 |
·REV 的诊断和鉴别 | 第25-26页 |
7 ALV-J 和REV 囊膜糖蛋白基因的变异 | 第26-27页 |
8 ALV-J 和REV 的预防和控制 | 第27-28页 |
9 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
研究内容 | 第29-70页 |
试验一中国蛋鸡群ALV-J 的分离鉴定及分子进化分析 | 第29-57页 |
1 材料与方法 | 第29-41页 |
·病料的来源 | 第29页 |
·单克隆抗体 | 第29页 |
·异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗鼠和兔抗鸡二抗 | 第29页 |
·克隆载体和宿主菌 | 第29页 |
·分子生物学试剂 | 第29页 |
·病料的病理切片HE 染色检查和石蜡切片的免疫酶 | 第29-31页 |
·病理切片的制作方法 | 第29-30页 |
·病理切片HE 染色过程 | 第30页 |
·石蜡切片的免疫酶染色程序 | 第30-31页 |
·石蜡切片的免疫酶结果判定 | 第31页 |
·病毒的实验室分离 | 第31-32页 |
·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第31页 |
·病毒分离 | 第31-32页 |
·病毒的间接免疫荧光试验(IFA)鉴定 | 第32页 |
·病毒的PCR 鉴定 | 第32-33页 |
·env 基因的扩增、克隆与测序 | 第33-38页 |
·病毒模板的制备 | 第33页 |
·env 基因的扩增 | 第33-34页 |
·env 基因PCR 产物DNA 电泳 | 第34页 |
·PCR 产物的回收与定量 | 第34-35页 |
·DNA 的连接反应 | 第35-36页 |
·TG1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第36页 |
·连接产物的转化 | 第36-37页 |
·质粒DNA 的提取 | 第37-38页 |
·重组质粒DNA 的酶切鉴定 | 第38页 |
·阳性克隆序列测定 | 第38页 |
·分离株gp85 和gp37 的氨基酸序列及3′Ter 核苷酸序列的比较 | 第38-39页 |
·ALV-J SD07LK1 株和NX0101 株对海兰灰蛋鸡的致病性试验 | 第39-41页 |
·病毒 | 第39页 |
·实验动物 | 第39页 |
·免疫动物用疫苗 | 第39页 |
·Reed-Muench 氏法测定病毒的TCID50 方法 | 第39-40页 |
·1 日龄商品代海兰灰蛋鸡的人工感染 | 第40页 |
·ND、AIV 灭活疫苗的免疫及HI 抗体滴度的测定 | 第40-41页 |
2 结果 | 第41-54页 |
·病理切片检测结果 | 第41-42页 |
·免疫酶染色结果 | 第42-44页 |
·IFA 检测结果 | 第44页 |
·env 基因PCR 扩增结果 | 第44-45页 |
·env 基因重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第45页 |
·SD07LK1 和SD07LK2 株gp85 基因编码的氨基酸同源性比较 | 第45-47页 |
·SD07LK1 和SD07LK2 株gp37 基因编码的氨基酸同源性比较 | 第47-48页 |
·SD07LK1 和SD07LK2 株与其他毒株的3′Ter 序列比较 | 第48-51页 |
·SD07LK1 株和NX0101 株对海兰灰蛋鸡致病性试验结果 | 第51-54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
4 结论 | 第56-57页 |
试验二 间接免疫荧光方法检测肿瘤疑似病料中的ALV-J 和REV | 第57-63页 |
1 材料与方法 | 第57-59页 |
·病料来源 | 第57页 |
·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第57-58页 |
·单克隆抗体 | 第58页 |
·异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗鼠二抗 | 第58页 |
·病毒分离与复制 | 第58-59页 |
·血液中分离ALV-J 或REV | 第58页 |
·病料组织中分离ALV-J 或REV | 第58-59页 |
·间接免疫荧光试验(IFA) | 第59页 |
2 结果 | 第59-61页 |
·用ALV-J 特异性单克隆抗体IFA 检测结果 | 第59-60页 |
·用REV 特异性单克隆抗体IFA 检测结果 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
4 结论 | 第62-63页 |
实验三 从蛋鸡群患有腺胃炎的病鸡中分离出REV | 第63-70页 |
1 材料与方法 | 第63-66页 |
·病料来源 | 第63页 |
·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第63页 |
·单克隆抗体 | 第63页 |
·异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗鼠二抗 | 第63-64页 |
·引物 | 第64页 |
·病毒分离鉴定 | 第64-66页 |
·病毒分离与复制 | 第64页 |
·间接免疫荧光试验(IFA) | 第64-65页 |
·细胞DNA 的提取 | 第65页 |
·REV 病毒 env 基因 402bp 片段条带扩增 | 第65-66页 |
·PCR 产物DNA 电泳 | 第66页 |
2 结果 | 第66-68页 |
·PCR 扩增结果 | 第66-67页 |
·用REV 特异性单克隆抗体IFA 检测结果 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68页 |
4 结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读硕士研究生期间的论文情况 | 第81-82页 |
个人简历 | 第82页 |