| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| ·干扰素简介 | 第11-18页 |
| ·α-干扰素 | 第11-12页 |
| ·β-干扰素 | 第12-13页 |
| ·γ-干扰素 | 第13-14页 |
| ·IFN 及其相关基因的表达调控 | 第14-16页 |
| ·IFN 的抗病毒作用机理 | 第16-18页 |
| ·猪干扰素的基因工程 | 第18-19页 |
| ·猪α干扰素的基因工程 | 第18-19页 |
| ·猪β干扰素的基因工程 | 第19页 |
| ·猪γ干扰素的基因工程 | 第19页 |
| ·重组蛋白表达系统简述 | 第19-21页 |
| ·大肠杆菌表达体系 | 第20页 |
| ·酵母表达体系 | 第20-21页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统 | 第21页 |
| ·负链RNA 病毒反向遗传操作系统及其应用研究 | 第21-22页 |
| ·新城疫病毒反向遗传操作系统及其应用研究 | 第22-24页 |
| ·研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 2. 材料与方法 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·传代细胞 | 第25页 |
| ·毒种和菌种 | 第25-26页 |
| ·质粒 | 第26页 |
| ·血清 | 第26页 |
| ·单克隆抗体 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·引物 | 第27-28页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·猪干扰素-α/γ基因克隆与序列分析 | 第28-31页 |
| ·猪干扰素-β基因的人工合成 | 第31-32页 |
| ·表达猪干扰素基因的基因组全长cDNA 克隆的构建 | 第32-34页 |
| ·重组病毒的拯救 | 第34页 |
| ·重组病毒的RT-PCR 鉴定 | 第34页 |
| ·重组病毒的间接免疫荧光（IFA）检测 | 第34-35页 |
| ·Western-blot 检测重组病毒 PoIFN 基因表达 | 第35页 |
| ·重组PoIFN 抗病毒活性的测定 | 第35-36页 |
| 3 实验结果 | 第36-47页 |
| ·猪干扰素-Α/Γ全基因的克隆及序列分析 | 第36-37页 |
| ·PoIFN-α全基因克隆及序列分析 | 第36页 |
| ·PoIFN-γ全基因克隆及序列分析 | 第36-37页 |
| ·表达猪干扰素基因的基因组全长CDNA 克隆的构建 | 第37-40页 |
| ·重组型NDV 基因组全长cDNA 的构建 | 第37-38页 |
| ·pBRN- PoIFN 基因组全长cDNA 阳性克隆的酶切鉴定 | 第38-40页 |
| ·pBRN- PoIFN 基因组全长cDNA 阳性克隆的 PCR 鉴定 | 第40页 |
| ·重组病毒的拯救 | 第40-41页 |
| ·重组病毒RT-PCR 鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组病毒的间接免疫荧光（IFA）检测 | 第42-44页 |
| ·rLaSota-PoIFN-α的间接免疫荧光检测 | 第42-43页 |
| ·rLaSota-PoIFN-β的间接免疫荧光检测 | 第43页 |
| ·rLaSota-PoIFN-γ的间接免疫荧光检测 | 第43-44页 |
| ·WESTERN-BLOT检测重组病毒 POIFN 基因表达 | 第44-45页 |
| ·Western-blot 检测重组病毒 PoIFN-α基因表达 | 第44页 |
| ·Western-blot 检测重组病毒 PoIFN-β基因表达 | 第44-45页 |
| ·Western-blot 检测重组病毒 PoIFN-γ基因表达 | 第45页 |
| ·重组POIFN 抗VSV-GFP 病毒活性检测 | 第45-47页 |
| ·重组PoIFN-α抗VSV-GFP 病毒活性检测 | 第45-46页 |
| ·重组PoIFN-β抗VSV-GFP 病毒活性检测 | 第46页 |
| ·重组PoIFN-γ抗VSV-GFP 病毒活性检测 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-51页 |
| ·POIFN 基因的克隆 | 第47-48页 |
| ·新城疫病毒作为活病毒载体 | 第48-49页 |
| ·基因组全长 CDNA 克隆的构建 | 第49页 |
| ·重组病毒的拯救 | 第49-50页 |
| ·POIFN 的稳定表达 | 第50页 |
| ·重组 POIFN 抗 VSV-GFP 病毒活性测定 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
