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油菜GolS基因的克隆、表达分析及种子脱水耐性的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
缩略词第5-8页
引言第8-9页
1 文献综述第9-17页
   ·种子的脱水耐性第9页
   ·种子对脱水胁迫的保护机制第9-12页
     ·蛋白质对脱水伤害的保护第10-11页
     ·自由基清除系统的保护作用第11页
     ·糖在种子脱水耐性中的作用第11-12页
   ·寡糖及其代谢的研究进展第12-14页
   ·肌醇半乳糖苷合成酶的研究现状第14-15页
   ·本研究的目的及意义第15-16页
   ·技术路线第16-17页
2 油菜种子脱水耐性的获得过程及生理生化指标的测定第17-25页
   ·试验材料第17-18页
     ·植物材料的准备第17页
     ·试剂及仪器设备第17-18页
   ·试验方法第18-19页
     ·种子含水量的测定第18页
     ·种子发芽率及活力的测定第18页
     ·标准品溶液的配制第18页
     ·油菜种子可溶性糖的提取第18-19页
     ·高效液相色谱(HPLC)测定可溶性糖组分含量第19页
   ·结果与分析第19-24页
     ·油菜不同成熟阶段种子的形态特征第19页
     ·油菜种子成熟过程中含水量的变化第19-20页
     ·油菜成熟过程中及干燥处理后种子发芽率的变化第20页
     ·油菜种子脱水耐性的获得第20-22页
     ·标准品的高效液相色谱分离效果第22页
     ·油菜种子中糖组分及含量的变化第22-24页
   ·小结第24-25页
3 油菜种子肌醇半乳糖苷合成酶基因的克隆及表达分析第25-43页
   ·实验材料第25-26页
     ·植物材料第25页
     ·菌株和载体第25页
     ·培养基和抗生素第25页
     ·酶,试剂盒及分子量标准第25页
     ·其他试剂第25-26页
     ·引物第26页
     ·仪器设备第26页
   ·实验方法第26-35页
     ·油菜种子总RNA的提取第26-27页
     ·CTAB法提取油菜种子DNA第27-28页
     ·油菜肌醇半乳糖苷合成酶基因cDNA序列的克隆第28-30页
     ·油菜肌醇半乳糖苷合成酶基因全长DNA序列的克隆第30页
     ·目的条带的回收、连接、转化、筛选、测序第30-31页
     ·应用生物信息学软件进行序列分析第31页
     ·BnGolS-1基因的原核表达载体的构建第31-33页
     ·重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞及表达第33-34页
     ·BnGolS-1的半定量表达分析第34-35页
   ·结果与分析第35-42页
     ·油菜种子RNA的提取第35-36页
     ·应用RACE技术扩增油菜肌醇半乳糖苷合成酶基因全长序列第36-38页
     ·BnGolS-1 DNA序列的克隆及分析第38页
     ·原核表达载体的构建及鉴定第38-40页
     ·重组质粒pET-GS在大肠杆菌中的表达分析第40页
     ·不同发育时期种子的BnGolS-1基因的表达分析第40-41页
     ·不同发育时期种子的BnGloS一1基因的表达分析第41-42页
   ·小结第42-43页
4 讨论第43-47页
   ·油菜种子脱水耐性的获得及取样方法的讨论第43-44页
   ·不同发育时期油菜种子中可溶性糖含量的变化第44页
   ·BnGolS-1基因克隆及序列分析第44-45页
   ·油菜肌醇半乳糖苷合成酶基因的原核表达第45-46页
   ·油菜种子发育期BnGolS-1基因表达水平的变化第46-47页
5 结论与展望第47-49页
   ·结论第47-48页
   ·展望第48-49页
参考文献第49-55页
个人简介第55-56页
导师简介第56-57页
获得成果目录清单第57-58页
致谢第58页

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