摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-23页 |
·细胞黏附分子 | 第10-11页 |
·免疫球蛋白超家族 | 第11-13页 |
·NECTIN蛋白家族及其细胞黏附作用 | 第13-17页 |
·NECTIN与CADHERIN的关系 | 第17-18页 |
·NECTIN蛋白在NK 细胞免疫中的作用 | 第18-20页 |
·NECTIN-2, CD155 及其受体CD226 | 第20-22页 |
·MHC-Ⅰ四聚体技术 | 第22-23页 |
第2章 引言 | 第23-24页 |
第3章 材料和设备 | 第24-28页 |
·实验材料及设备 | 第24-26页 |
·细胞与细胞文库 | 第24页 |
·引物 | 第24-25页 |
·载体质粒 | 第25页 |
·仪器 | 第25页 |
·试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
·溶液配制 | 第26-28页 |
第4章 实验方法 | 第28-41页 |
·CD112 V 结构域的克隆构建、蛋白制备及晶体衍射 | 第28-35页 |
·CD112 V-pET21a(+)表达质粒的构建 | 第28-32页 |
·CD112 V 结构域的小量表达分析 | 第32-33页 |
·CD112 V 结构域包涵体的大量制备 | 第33页 |
·CD112 V 结构域包涵体的复性 | 第33页 |
·CD112 V 结构域蛋白的纯化 | 第33-34页 |
·CD112 V 结构域蛋白的浓度测定 | 第34页 |
·CD112 V 结构域蛋白的结晶 | 第34-35页 |
·CD112 V 结构域硒代甲硫氨酸衍生物蛋白制备 | 第35页 |
·CD112 V 结构域及CD112 V 结构域-ΔLOOP 四聚体制备 | 第35-38页 |
·CD112 V 结构域四聚体制备 | 第35-36页 |
·CD112 V 结构域-Δloop 四聚体制备 | 第36-38页 |
·COS7 细胞培养及四聚体染色 | 第38-41页 |
·COS7 细胞复苏 | 第38页 |
·COS7 细胞传代 | 第38页 |
·COS7 细胞冻存方法 | 第38-39页 |
·COS7 细胞转染及检测 | 第39页 |
·COS7 细胞的四聚体(tetramer)染色 | 第39-41页 |
第5章 结果与分析 | 第41-60页 |
·CD112 V 结构域蛋白的表达纯化 | 第41-45页 |
·CD112 V -pET21a(+)表达质粒构建 | 第41-42页 |
·CD112 V 结构域的表达鉴定 | 第42-43页 |
·CD112 V 结构域的蛋白纯化 | 第43-45页 |
·CD112 V 结构域硒代甲硫氨酸衍生物蛋白纯化 | 第45-46页 |
·CD112 V 结构域的晶体衍射 | 第46-50页 |
·CD112 V 结构域及硒代甲硫氨酸衍生物的晶体生长 | 第46-48页 |
·CD112 V 结构域及硒代甲硫氨酸衍生物晶体的衍射数据收集及处理 | 第48-50页 |
·CD112 V 结构域晶体结构分析 | 第50-55页 |
·CD112 V 结构域晶体结构 | 第50页 |
·二聚体形成的作用力 | 第50-53页 |
·CD112 V 结构域与Necl(Necl-5 和Necl-1)结构的比较 | 第53-55页 |
·CD112 分子与其受体CD226 的相互作用研究 | 第55-58页 |
·CD112 V 结构域蛋白及CD112 V 结构域蛋白的四聚体制备 | 第55-58页 |
·COS7 细胞染色及流式细胞术鉴定 | 第58页 |
·CD112 V 结构域三种蛋白胶结果讨论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录 | 第65-67页 |
发表文章 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |