| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 附图清单 | 第14-18页 |
| 附表清单 | 第18-19页 |
| 主要缩略词和符号表 | 第19-20页 |
| 第1章 文献综述 | 第20-34页 |
| ·G蛋白概述 | 第20-28页 |
| ·异三聚体G蛋白的种类 | 第21页 |
| ·异三聚体G蛋白的结构 | 第21-23页 |
| ·G蛋白跨膜转换细胞信号模型 | 第23-24页 |
| ·G蛋白的受体与下游效应器 | 第24-26页 |
| ·G蛋白信号调节蛋白(RGS) | 第26-28页 |
| ·动物异三聚体G蛋白及其信号途径 | 第28-29页 |
| ·动物异三聚体G蛋白α研究进展 | 第28-29页 |
| ·动物异三聚体G蛋白信号途径的研究进展 | 第29页 |
| ·异三聚体G蛋白在信号转导中的作用 | 第29-31页 |
| ·G蛋白在细胞信号转导中的作用 | 第29-30页 |
| ·G蛋白在昆虫信号传导中的作用研究 | 第30-31页 |
| ·动物G蛋白研究方法 | 第31-34页 |
| ·G蛋白研究的分子生物学方法 | 第31-32页 |
| ·G蛋白的基因工程及体外表达系统 | 第32页 |
| ·G蛋白亚基间的相互作用验证方法。 | 第32-34页 |
| 第2章 引言 | 第34-36页 |
| 第3章 家蚕G蛋白α亚基的克隆与功能初探 | 第36-65页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-48页 |
| ·材料 | 第36-39页 |
| ·方法 | 第39-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-62页 |
| ·家蚕总RNA的提取 | 第48-49页 |
| ·家蚕G蛋白α亚基的基因克隆及序列分析 | 第49-56页 |
| ·家蚕G蛋白α亚基的同源性比较 | 第56-58页 |
| ·家蚕G蛋白α亚基的保守域分析 | 第58-59页 |
| ·家蚕G蛋白α亚基BmGα73B的时空表达 | 第59-61页 |
| ·RNAi结果 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·基因克隆与序列分析 | 第62-63页 |
| ·关于半定量RT-PCR方法的探讨 | 第63页 |
| ·关于BmGα73B的表达谱 | 第63页 |
| ·RNAi | 第63-64页 |
| ·结论 | 第64-65页 |
| 第4章 家蚕G蛋白β和γ亚基的克隆与序列分析 | 第65-79页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·材料和方法 | 第65-67页 |
| ·供试昆虫、菌株、培养基、酶及试剂盒、主要仪器等同第一节 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-77页 |
| ·家蚕G蛋白β亚基扩增结果 | 第67-68页 |
| ·Gβ亚基氮基酸序列同源性的比较 | 第68-70页 |
| ·Gβ亚基的WD-40保守区搜索结果 | 第70页 |
| ·RT-PCR得到γ亚基的基因特异性片段 | 第70-71页 |
| ·Cγ30A亚基的3'RACE结果 | 第71-72页 |
| ·Gγ30A亚基的5'RACE结果 | 第72页 |
| ·家蚕G蛋白γ亚基序列的获得 | 第72-75页 |
| ·家蚕G蛋白γ亚基的序列同源性比较 | 第75-76页 |
| ·家蚕G蛋白γ亚基的保守域分析 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·结论 | 第78-79页 |
| 第5章 家蚕G蛋白亚基的原核表达 | 第79-121页 |
| ·引言 | 第79页 |
| ·材料与方法 | 第79-91页 |
| ·实验材料 | 第79-82页 |
| ·实验方法 | 第82-91页 |
| ·结果与分析 | 第91-116页 |
| ·pET-41(+)-Gα73B表达载体的构建 | 第91-93页 |
| ·重组工程菌的诱导表达结果 | 第93-94页 |
| ·重组工程菌表达条件优化 | 第94-95页 |
| ·重组蛋白的表达方式分析 | 第95-96页 |
| ·Western blotting分析重组蛋 | 第96页 |
| ·pET-41b-Gα12表达载体的构建 | 第96-98页 |
| ·重组工程菌的诱导表达结果 | 第98-99页 |
| ·重组蛋白的表达方式分析 | 第99页 |
| ·Western blotting分析重组蛋白 | 第99页 |
| ·家蚕G蛋白β亚基表达载体的构建和鉴定 | 第99-101页 |
| ·重组工程菌的诱导表达结果 | 第101-103页 |
| ·重组工程菌诱导表达条件优化 | 第103-105页 |
| ·重组工程菌诱导表达方式分析 | 第105-106页 |
| ·Western blotting分析重组蛋白 | 第106-107页 |
| ·可溶性蛋白表达条件优化 | 第107-108页 |
| ·pET-41b-Gγ1表达载体的构建 | 第108-109页 |
| ·重组工程菌的诱导表达结果 | 第109-110页 |
| ·重组工程菌表达条件优化 | 第110-111页 |
| ·重组蛋白表达方式分析 | 第111-112页 |
| ·Western blotting分析重组蛋白 | 第112页 |
| ·重组蛋白的纯化与浓度 | 第112-113页 |
| ·pET-41b-Gγ30A表达载体的构建 | 第113-114页 |
| ·重组工程菌的诱导表达结果 | 第114-115页 |
| ·重组蛋白的表达方式分析 | 第115页 |
| ·Western blotting分析重组蛋白 | 第115-116页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第116页 |
| ·讨论 | 第116-120页 |
| ·载体的选择 | 第116-117页 |
| ·原核表达载体pET-4Ib、pET-22b的选择 | 第117页 |
| ·引物设计酶切位点的选择 | 第117页 |
| ·构建表达载体的策略 | 第117-118页 |
| ·发酵条件的摸索 | 第118页 |
| ·包涵体的形成 | 第118-119页 |
| ·重组蛋白可溶性表达 | 第119页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第119-120页 |
| ·结论 | 第120-121页 |
| 第6章 用GST融合蛋白沉降技术检测β-γ亚基相互作用 | 第121-126页 |
| ·引言 | 第121页 |
| ·材料与方法 | 第121-123页 |
| ·实验材料 | 第121页 |
| ·方法 | 第121-123页 |
| ·结果与分析 | 第123-124页 |
| ·质粒pGEX-4T-3的诱导表达 | 第123页 |
| ·家蚕G蛋白β亚基与γ30A间的相互作用 | 第123-124页 |
| ·讨论 | 第124-125页 |
| ·结论 | 第125-126页 |
| 第7章 G蛋白调节因子(RGS)的基因克隆与序列分析 | 第126-133页 |
| ·引言 | 第126页 |
| ·材料与方法 | 第126-127页 |
| ·材料 | 第126页 |
| ·方法 | 第126-127页 |
| ·结果与分析 | 第127-131页 |
| ·G蛋白调节因子(RGS)的生物信息学预测结果 | 第127页 |
| ·PCR扩增 | 第127-128页 |
| ·家蚕RGS的部分序列 | 第128-130页 |
| ·保守域分析 | 第130页 |
| ·聚类分析 | 第130-131页 |
| ·讨论 | 第131-132页 |
| ·RGS的结构与分类 | 第131-132页 |
| ·RGS蛋白的结构域 | 第132页 |
| ·结论 | 第132-133页 |
| 第8章 总结与讨论 | 第133-135页 |
| 第9章 创新点 | 第135-136页 |
| 参考文献 | 第136-146页 |
| 致谢 | 第146-148页 |
| 个人简介 | 第148页 |
