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肝细胞生长因子对高糖诱导的腹膜纤维化的影响

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
缩略词表第8-10页
前言第10-11页
材料与方法第11-23页
 一、 材料第11-13页
  (一) 主要的试剂第11-12页
  (二) 主要的仪器第12-13页
 二、 方法第13-23页
  (一) 人腹膜间皮细胞原代培养第13页
  (二) 人腹膜间皮细胞传代培养第13-14页
  (三) 人腹膜间皮细胞免疫组织化学染色鉴定第14-15页
  (四) 实验细胞分组第15-16页
  (五) 免疫组织化学技术测定细胞 α-SMA 的表达第16-17页
  (六) 相对定量实时荧光 PCR 测定 α-SMA、TGF-β_1、FN mRNA 基因表达第17-20页
   1.细胞总 RNA 的提取第17页
   2.cDNA 的合成第17-18页
   3.PCR 引物设计及合成第18页
   4.相对定量实时荧光 PCR(荧光染料法)第18-20页
  (七) FN 蛋白的检测第20-21页
  (八) TGF-β_1 蛋白的检测第21页
  (九) 统计学方法第21-23页
结果第23-35页
 一、 细胞培养及鉴定第23-26页
  1.细胞生长情况第23页
  2.免疫组织化学染色鉴定第23-26页
 二、 免疫组织化学检测细胞表型转化标志物 α-SMA 的表达第26-30页
  1.高糖环境对 HPMCs 表达 α-SMA 的影响第26页
  2.HGF 对高糖环境培养下的 HPMCs 表达 α-SMA 的影响第26-30页
 三、 ELISA 法检测上清液中 FN、TGF-β_1 的含量第30-33页
  1.高糖对人腹膜间皮细胞分泌 FN 的影响第31页
  2.HGF 对高糖环境下人腹膜间皮细胞分泌 FN 的影响第31页
  3.高糖对人腹膜间皮细胞分泌 TGF-β_1 的影响第31页
  4.HGF 对高糖环境下人腹膜间皮细胞分泌 TGF-β_1 的影响第31-33页
 四、 相对定量实时荧光 PCR 检测 α-SMA、TGF-β_1、FN 基因表达第33-35页
  1.总 RNA 的纯度和完整性分析第33页
  2.熔解曲线、扩增线性与效率第33页
  3.高糖对 HPMCs 表达 α-SMA、TGF-β_1、FN mRNA 的影响第33-34页
  4.HGF 对高糖环境下 HPMCs 表达 α-SMA、TGF-β_1、FN mRNA 的影响第34-35页
讨论第35-40页
结论第40-41页
参考文献第41-45页
致谢第45-46页
综述第46-54页
 参考文献第52-54页

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