| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1. 文献综述 | 第8-17页 |
| ·DNA 甲基化与基因表达调控 | 第8页 |
| ·植物甲基结合蛋白(MBD)的研究进展 | 第8-11页 |
| ·RNA 干扰技术在植物基因功能中的研究现状及展望 | 第11-13页 |
| ·小麦遗传转化的研究进展及应用前景 | 第13-17页 |
| ·小麦遗传转化的主要方法 | 第13-15页 |
| ·基因枪转化法 | 第13页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第13-15页 |
| ·花粉管通道法 | 第15页 |
| ·各种转化方法的应用前景 | 第15-17页 |
| 2. 引言 | 第17页 |
| 3. 材料与方法 | 第17-24页 |
| ·试验材料 | 第17-18页 |
| ·受体材料 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第17页 |
| ·质粒与菌株 | 第17页 |
| ·主要试剂配制 | 第17-18页 |
| ·PCR 引物 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-19页 |
| ·试剂和实验准备 | 第18-19页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·实验准备 | 第18-19页 |
| ·总 RNA 提取操作步骤（TRIZOL 法）及质量检测 | 第19-20页 |
| ·总 RNA 提取 | 第19页 |
| ·总RNA 质量及浓度测定 | 第19-20页 |
| ·总RNA 的纯化 | 第20页 |
| ·DNA 的消化 | 第20页 |
| ·RNA 的纯化 | 第20页 |
| ·目的基因的克隆 | 第20-24页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第20页 |
| ·基因克隆的 PCR 反应 | 第20-21页 |
| ·PCR 扩增产物的检测与回收纯化 | 第21-22页 |
| ·回收产物与pBS-T 载体的连接 | 第22页 |
| ·重组载体对大肠杆菌的转化 | 第22-23页 |
| ·感受态细胞的制备Ca-Mn 法 | 第22-23页 |
| ·2 DNA的热击转化 | 第23页 |
| ·重组质粒的阳性鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的提取、纯化及序列分析 | 第23-24页 |
| ·碱-裂解法重组质粒的提取 | 第23-24页 |
| 4 结果与分析 | 第24-40页 |
| ·小麦MBD 基因的克隆 | 第24-30页 |
| ·RNA 质量检测及第一链的获得 | 第24-25页 |
| ·小麦TaMBD1 基因的克隆及序列分析 | 第25页 |
| ·小麦TaMBD2 基因的克隆及序列分析 | 第25-27页 |
| ·小麦TaMBD1、TaMBD2基因的同源进化分析 | 第27-30页 |
| ·TaMBD1基因的真核表达载体的构建 | 第30-33页 |
| ·TaMBD1基因的过量表达表达载体pCAM1301-M1-over的构建 | 第30-31页 |
| ·TaMBD1 基因的抑制表达载体pCAM1301-M1-RNAi 的构建 | 第31-33页 |
| ·构建中间载体pUC-M1-AB | 第31-33页 |
| ·TaMBD2基因的真核表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·TaMBD2 基因的过量表达载体pCAM-M2-over 的构建 | 第33-34页 |
| ·TaMBD2 基因的抑制表达载体pCAM-M2-RNAi 的构建 | 第34-36页 |
| ·构建中间载体pUC-M2-AB | 第34-36页 |
| ·花粉管通道法的小麦遗传转化 | 第36-40页 |
| 5 结论与讨论 | 第40-42页 |
| ·成功克隆了两个小麦MBD基因TaMBD1 和TaMBD2 | 第40-41页 |
| ·构建了35S启动子驱动的小麦TaMBD1、TaMBD2的过量和RNAi抑制真核表达载体 | 第41页 |
| ·获得了初步鉴定的转基因小麦植株 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 英文摘要 | 第45-46页 |
