中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 前言 | 第7-20页 |
第二章 实验材料与方法 | 第20-44页 |
·蛋白 | 第20-27页 |
·人CRP纯化 | 第20页 |
·重组人mCRP的制备与纯化 | 第20-21页 |
·变性mCRP的制备 | 第21页 |
·CRP与特异性配体结合 | 第21-22页 |
·CRP/mCRP抗原性检测 | 第22-23页 |
·分子筛排阻层析 | 第23页 |
·1/20SDS-PAGE电泳 | 第23页 |
·内毒素检测与去除 | 第23-25页 |
·叠氮化钠的去除 | 第25页 |
·CRP的biotin标记 | 第25-26页 |
·CRP的FITC标记 | 第26页 |
·蛋白总量测定方法 | 第26-27页 |
·抗体及其他材 | 第27-30页 |
·CRP/mCRP/C1q/C3d单抗 | 第27-28页 |
·热聚集IgG的制备 | 第28页 |
·CRP肽段、Latex Bead、PMA、多粘菌素B等 | 第28-30页 |
·生化实验 | 第30-31页 |
·蛋白直接包被ELISA板各抗原性检测 | 第30页 |
·包被CRP/mCRP与biotin-pCRP的结合 | 第30-31页 |
·biotin-CRP与FITC-CRP结合 | 第31页 |
·PC/单抗/肽段/mCRP与biotin-CRP的竞争结合 | 第31页 |
·补体沉积 | 第31-33页 |
·C1q沉积 | 第32-33页 |
·C3d沉积 | 第33页 |
·细胞系和原代细胞 | 第33-37页 |
·U937/THP-1的培养 | 第33-36页 |
·U937/THP-1的诱导分化 | 第36页 |
·小鼠腹腔原代巨噬细胞的获得及培养 | 第36-37页 |
·蛋白与细胞相互作用 | 第37-44页 |
·蛋白包被珠子及状态检测 | 第37页 |
·单核巨噬细胞效应 | 第37-44页 |
第三章 实验结果 | 第44-54页 |
·疏水界面诱导pCRP变构,呈现双抗原性 | 第44-46页 |
·pCRP铺板后五聚体抗原性来源于后结合pCRP和变构分子 | 第46-49页 |
·铺板pCRP与游离pCRP的结合机制及"变构分子"的获得方法 | 第49-51页 |
·变构分子易于补体激活 | 第51-52页 |
·变构分子具有与pCRP、mCRP不同的对单核巨噬细胞的刺激效应 | 第52-54页 |
第四章 讨论 | 第54-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
附录 | 第67-74页 |
在学期间的研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |