中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-14页 |
缩写词简表 | 第14-15页 |
前言 | 第15-21页 |
技术路线 | 第21-22页 |
第一章 肿瘤标志物的生物信息学筛选及其表达谱初步分析 | 第22-43页 |
第一节 材料和方法 | 第22-29页 |
1.材料 | 第22-24页 |
·主要生物信息学分析网站资源 | 第22页 |
·细胞 | 第22-23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器和设备 | 第23页 |
·主要引物 | 第23-24页 |
2.方法 | 第24-29页 |
·常规细胞培养 | 第24-25页 |
·eDNA Xprofile筛选肿瘤差异表达基因 | 第25-27页 |
·电子杂交 | 第27页 |
·培养细胞总RNA提取 | 第27页 |
·RT-PCR扩增 | 第27-28页 |
·灰度扫描与数据处理 | 第28-29页 |
第二节 结果 | 第29-39页 |
1.cDNA Xprofile筛选得到的肿瘤特异性基因 | 第29-33页 |
2.筛选得到的肿瘤特异性基因的染色体定位 | 第33-34页 |
3.电子杂交表达谱分析 | 第34-37页 |
4.验证电子杂交结果 | 第37-39页 |
第三节 讨论 | 第39-43页 |
第二章 GABRA3基因的表达谱分析及功能研究 | 第43-83页 |
第一节 材料和方法 | 第43-54页 |
1.材料 | 第43-47页 |
·细胞 | 第43页 |
·组织 | 第43-44页 |
·实验动物 | 第44页 |
·主要引物 | 第44-46页 |
·siRNA | 第46页 |
·主要试剂 | 第46-47页 |
·主要仪器设备 | 第47页 |
2.方法 | 第47-54页 |
·常规细胞培养 | 第47页 |
·RNA提取 | 第47-48页 |
·RT-PCR | 第48-49页 |
·灰度扫描与数据处理 | 第49页 |
·免疫组织化学 | 第49-50页 |
·稳定转染siRNA人肝癌细胞株HepG2的建立 | 第50-51页 |
·细胞增殖能力测定 | 第51-53页 |
·裸鼠成瘤实验 | 第53页 |
·统计学分析 | 第53-54页 |
第二节 结果 | 第54-76页 |
1.细胞及组织总RNA分离 | 第54页 |
2.GABRA3表达谱 | 第54-62页 |
3.GABA对人肝癌细胞株HepG2恶性表型的影响 | 第62-66页 |
4.稳定转染siRNA人肝癌细胞株HepG2的建立及干扰效果鉴定 | 第66页 |
5.GABRA3在决定人肝癌细胞株HepG2恶性表型中的作用 | 第66-70页 |
6.GABA在人肝癌细胞株HepG2中通过GABRA3发挥促增殖作用 | 第70-74页 |
7.GAD在HepG2中的表达 | 第74-76页 |
第三节 讨论 | 第76-83页 |
第三章 HTA基因的表达谱分析及功能研究 | 第83-121页 |
第一节 材料和方法 | 第83-97页 |
1.材料 | 第83-87页 |
·细胞和组织 | 第83-84页 |
·实验动物 | 第84页 |
·质粒和宿主菌 | 第84-85页 |
·主要引物 | 第85页 |
·siRNA | 第85-86页 |
·主要试剂 | 第86页 |
·主要仪器设备 | 第86-87页 |
·主要生物信息学分析网站资源 | 第87页 |
·主要生物信息学软件 | 第87页 |
2.方法 | 第87-97页 |
·常规细胞培养 | 第87页 |
·RNA提取 | 第87-88页 |
·RT-PCR | 第88-89页 |
·稳定转染siRNA人肝癌细胞株HepG2的建立 | 第89页 |
·细胞增殖能力测定 | 第89-91页 |
·HTA基因编码蛋白质性质、功能分析 | 第91-92页 |
·HTA的原核表达 | 第92-96页 |
·统计学分析 | 第96-97页 |
第二节 结果 | 第97-114页 |
1.细胞及组织总RNA分离 | 第97页 |
2.HTA表达谱 | 第97-100页 |
3.稳定转染siRNA人肝癌细胞株HepG2的建立及干扰效果鉴定 | 第100页 |
4.HTA在决定人肝癌细胞株HepG2恶性表型中的作用 | 第100-104页 |
5.生物信息学分析 | 第104-110页 |
6.HTA的原核表达 | 第110-114页 |
第三节 讨论 | 第114-121页 |
结论 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-135页 |
综述 | 第135-149页 |
致谢 | 第149-150页 |
在读期间主要研究成果 | 第150页 |