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拟黑多刺蚁semaphorin 2a基因的克隆与mRNA水平表达的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 前言第10-18页
   ·拟黑多刺蚁概述第10-11页
   ·semaphorin家族研究概述第11-12页
   ·Semaphorin 2a在昆虫中的研究概况第12-13页
   ·生物信息学相关概述第13-14页
   ·动物行为学相关概述第14-15页
   ·实时定量技术相关概述第15-16页
   ·研究目的与意义第16页
   ·研究内容与技术路线第16-18页
     ·研究内容第16-17页
     ·技术路线第17-18页
第2章 拟黑多刺蚁sema2a基因全长cDNA序列的克隆第18-38页
   ·实验材料第18-19页
     ·生物材料第18页
     ·仪器设备以及耗材第18页
     ·实验试剂第18-19页
     ·常用溶液配方第19页
   ·实验方法第19-32页
     ·拟黑多刺蚁总RNA的提取第19-20页
     ·总RNA质量鉴定第20页
     ·第一链cDNA的合成第20-21页
     ·引物设计与合成第21-22页
     ·拟黑多刺蚁sema2a cDNA序列保守区域的扩增第22-32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·拟黑多刺蚁总RNA的提取第32页
     ·拟黑多刺蚁sema2a基因全长cDNA序列的扩增第32-33页
     ·拟黑多刺蚁sema2a cDNA序列开放阅读框分析第33-36页
   ·讨论第36-38页
第3章 拟黑多刺蚁pv-sema-2a蛋白序列的生物信息学分析第38-48页
   ·方法第38-40页
     ·氨基酸组成、分子量、等电点分析第38页
     ·疏水性分析第38页
     ·信号肽分析第38-39页
     ·基于NCBI/BLAST软件的蛋白质同源性分析第39页
     ·蛋白质的功能基序分析第39页
     ·蛋白质二级结构分析第39页
     ·蛋白质三级结构分析第39页
     ·蛋白质序列之间的多重比对及分子进化分析第39-40页
   ·结果与分析第40-46页
     ·氨基酸组成、分子量、等电点分析第40页
     ·疏水性分析第40-41页
     ·信号肽分析第41-42页
     ·同源性分析第42页
     ·蛋白质的功能基序分析第42-43页
     ·蛋白质二级结构分析第43-44页
     ·蛋白质三级结构分析第44页
     ·蛋白质序列之间的多重比对及分子进化分析第44-46页
   ·讨论第46-48页
第4章 荧光实时定量RT-PCR技术检测拟黑多刺蚁Pv-sema-2a基因mRNA水平的表达第48-61页
   ·实验材料第48-49页
     ·生物材料第48页
     ·主要试剂与仪器第48-49页
   ·实验方法第49-52页
     ·幼虫龄期的划分第49页
     ·总RNA的提取第49页
     ·第一链cDNA的制备第49页
     ·内参的选择第49页
     ·引物设计第49-50页
     ·引物有效性及模板质量检测第50页
     ·SYBR Green实时定量PCR检测第50-51页
     ·重复性实验与数据分析第51-52页
   ·结果与分析第52-59页
     ·引物有效性及模板质量检测第52-53页
     ·拟黑多刺蚁不同发育阶段虫体Pv-sema-2a mRNA的相对表达第53-56页
     ·拟黑多刺蚁不同品级成虫头部Pv-sema-2a mRNA的相对表达第56-59页
   ·讨论第59-61页
第5章 拟黑多刺工蚁行为学训练与Pv-sema-2a基因mRNA水平的表达第61-68页
   ·实验材料第61-62页
     ·主要试剂与仪器第61-62页
   ·实验方法第62页
     ·拟黑多刺蚁的训练第62页
     ·重复性实验与数据分析第62页
     ·总 RNA的提取第62页
     ·其他第62页
   ·实验结果第62-66页
     ·训练后拟黑多刺蚁所需时间关系第63页
     ·学习行为训练对拟黑多刺蚁工蚁头部Pv-sema-2a表达的影响第63-66页
   ·讨论第66-68页
第6章 总结第68-70页
参考文献第70-78页
致谢第78-79页
攻读硕士期间研究成果第79页

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