| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 中英文对照缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 历史回顾 | 第13-14页 |
| 1.2 PRRSV病原学研究 | 第14页 |
| 1.2.1 分类 | 第14页 |
| 1.2.2 分型 | 第14页 |
| 1.3 PRRSV基因组特征 | 第14-18页 |
| 1.3.1 非编码区 | 第15页 |
| 1.3.2 非结构蛋白 | 第15-16页 |
| 1.3.3 结构蛋白 | 第16-18页 |
| 1.4 我国猪繁殖与呼吸综合征遗传演化及流行趋势 | 第18-19页 |
| 1.5 PRRS分子诊断技术研究进展 | 第19-21页 |
| 1.5.1 常规RT-PCR | 第20页 |
| 1.5.2 套式RT-PCR | 第20页 |
| 1.5.3 实时荧光定量RT-PCR | 第20-21页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征分离株遗传进化分析 | 第22-60页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 PRRSV阳性细胞培养物 | 第23页 |
| 2.1.2 病毒全基因序列测定及分析所用材料 | 第23-25页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第25页 |
| 2.1.4 分子生物学分析软件 | 第25-26页 |
| 2.1.5 PRRSV毒株参考基因序列 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 分离毒基因扩增 | 第26-29页 |
| 2.2.2 全基因组结构分析 | 第29页 |
| 2.2.3 遗传变异分析 | 第29-30页 |
| 2.3 结果 | 第30-55页 |
| 2.3.1 全基因扩增结果 | 第30页 |
| 2.3.2 全基因序列分析 | 第30-31页 |
| 2.3.3 全基因序列遗传进化树分析 | 第31-33页 |
| 2.3.4 非编码区分析 | 第33-39页 |
| 2.3.5 Nsp2遗传变异分析 | 第39-45页 |
| 2.3.6 GP5遗传变异分析 | 第45-52页 |
| 2.3.7 GP3遗传变异分析 | 第52-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-59页 |
| 2.4.1 毒株遗传进化分析 | 第55-56页 |
| 2.4.2 非编码区遗传变异分析 | 第56页 |
| 2.4.3 Nsp2遗传变异分析 | 第56-57页 |
| 2.4.4 GP5遗传变异 | 第57-58页 |
| 2.4.5 GP3遗传变异 | 第58-59页 |
| 2.5 小结 | 第59-60页 |
| 第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒通用实时荧光RT-PCR检测方法的建立和应用 | 第60-83页 |
| 3.1 材料 | 第60-65页 |
| 3.1.1 毒株 | 第60-61页 |
| 3.1.2 设计引物探针参考序列 | 第61-64页 |
| 3.1.3 试剂 | 第64-65页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第65页 |
| 3.2 方法 | 第65-71页 |
| 3.2.1 TaqMan探针与引物的设计 | 第65-66页 |
| 3.2.2 病毒核酸的提取 | 第66-67页 |
| 3.2.3 反应体系与扩增条件 | 第67页 |
| 3.2.4 标准品的制备 | 第67-69页 |
| 3.2.5 反应条件的优化 | 第69-70页 |
| 3.2.6 方法评价 | 第70页 |
| 3.2.7 临床应用 | 第70-71页 |
| 3.3 结果 | 第71-81页 |
| 3.3.1 引物筛选 | 第71页 |
| 3.3.2 制备的标准品 | 第71-72页 |
| 3.3.3 优化的反应体系 | 第72-75页 |
| 3.3.4 绘制标准曲线并测定敏感性 | 第75-76页 |
| 3.3.5 方法评价 | 第76-78页 |
| 3.3.6 临床应用 | 第78-81页 |
| 3.4 讨论 | 第81-82页 |
| 3.5 小结 | 第82-83页 |
| 第四章 结论 | 第83-84页 |
| 创新点 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 附录 | 第93-121页 |
| 附录1 | 第93-97页 |
| 附录2 | 第97-107页 |
| 附录3 | 第107-117页 |
| 附录4 | 第117-121页 |
| 致谢 | 第121-123页 |
| 个人简介 | 第123页 |