| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 文献综述 | 第9-21页 |
| 第一章 转基因动物技术研究概述 | 第9-16页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·常用转基因技术的概述 | 第9-13页 |
| ·显微注射法 | 第9-10页 |
| ·逆转录病毒介导法 | 第10页 |
| ·胚胎干细胞介导法 | 第10-11页 |
| ·原始生殖细胞介导法 | 第11页 |
| ·精子介导法 | 第11-12页 |
| ·体细胞核移植法 | 第12-13页 |
| ·转基因动物的应用 | 第13-14页 |
| ·生物制药 | 第13页 |
| ·异种器官移植 | 第13-14页 |
| ·建立人类疾病的动物模型 | 第14页 |
| ·畜禽抗病育种和提高畜禽生产性能 | 第14页 |
| ·转基因动物技术存在的问题与展望 | 第14-16页 |
| ·转基因动物的成功率较低 | 第15页 |
| ·外源基因的整合率低、表达可控性差 | 第15页 |
| ·外源基因转入的细节过程及其理论不清楚 | 第15页 |
| ·安全性问题 | 第15-16页 |
| 第二章 人溶菌酶研究概述 | 第16-21页 |
| ·引言 | 第16页 |
| ·溶菌酶的来源及种类 | 第16-17页 |
| ·动物源溶菌酶 | 第16-17页 |
| ·植物源溶菌酶 | 第17页 |
| ·微生物源溶菌酶 | 第17页 |
| ·溶菌酶的理化特性 | 第17页 |
| ·人溶菌酶的药理作用 | 第17-18页 |
| ·抗菌消炎 | 第17-18页 |
| ·抗病毒 | 第18页 |
| ·增强免疫力 | 第18页 |
| ·人溶菌酶的应用 | 第18页 |
| ·天然人溶菌酶的提取 | 第18页 |
| ·重组人溶菌酶的制备 | 第18-21页 |
| ·微生物表达系统 | 第18-19页 |
| ·转基因生物反应器 | 第19-21页 |
| 实验部分 | 第21-38页 |
| 第三章 人溶菌酶基因乳腺特异性表达载体的构建 | 第21-29页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·质粒和菌株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-24页 |
| ·EGFP 和牛β－酪蛋白基因3'调控序列的PCR 扩增 | 第22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| ·目的片段EGFP 和BBC3 的回收纯化 | 第22页 |
| ·目的片段的亚克隆、转化及质粒提取 | 第22-23页 |
| ·用内切酶酶切鉴定重组质粒 | 第23页 |
| ·乳腺特异性表达载体pLEBH 的构建 | 第23-24页 |
| ·结果 | 第24-27页 |
| ·EGFP 基因的PCR 的扩增 | 第24页 |
| ·BBC3 基因的PCR 的扩增 | 第24页 |
| ·重组质粒pMD-EGFP 与pMD-BBC3 双酶切鉴定结果 | 第24-25页 |
| ·质粒pLNCX2、pLE、pLEB 与pEBH 双酶切结果 | 第25-27页 |
| ·重组质粒pLEBH 的构建图及其鉴定 | 第27页 |
| ·讨论 | 第27-28页 |
| ·结论 | 第28-29页 |
| 第四章 牛乳腺上皮细胞的培养及其转染 | 第29-35页 |
| ·材料和方法 | 第29-31页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·结果 | 第31-33页 |
| ·牛乳腺上皮细胞原代、传代培养和冻存复苏培养结果 | 第31-32页 |
| ·NIH-3T3 细胞的抗性浓度及其病毒滴度的确定 | 第32页 |
| ·感染逆转录病毒液乳腺上皮细胞的EGFP 的表达 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·结论 | 第34-35页 |
| 第五章 人溶菌酶基因在小鼠乳腺癌细胞的表达 | 第35-38页 |
| ·材料和方法 | 第35-36页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-37页 |
| ·感染逆转录病毒液EMT6 细胞的EGFP 的表达 | 第36页 |
| ·Human Lysozyme 基因PCR 检测结果 | 第36-37页 |
| ·Human Lysozyme 基因转录水平检测结果 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 个人简介 | 第49页 |
