单环刺螠纤溶酶分离纯化、免疫原性及其基因克隆的初步研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-30页 |
| ·研究背景 | 第10-28页 |
| ·血栓性疾病及其危害 | 第10页 |
| ·血栓形成 | 第10-13页 |
| ·血栓病治疗方法 | 第13-14页 |
| ·抗血栓药物研究进展 | 第14-17页 |
| ·天然来源溶栓剂 | 第17-20页 |
| ·溶栓酶基因克隆表达研究进展 | 第20-27页 |
| ·单环刺螠研究概况 | 第27-28页 |
| ·立题依据及研究目标 | 第28-30页 |
| ·立题依据 | 第28-29页 |
| ·研究目标 | 第29-30页 |
| 第二章 单环刺螠纤溶酶的分离纯化 | 第30-43页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-37页 |
| ·单环刺螠纤溶酶活力测定方法 | 第31-33页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第33-35页 |
| ·纤溶酶粗品的制备 | 第35页 |
| ·纤溶酶的纯化 | 第35页 |
| ·蛋白质纯度鉴定及分子量测定 | 第35-37页 |
| ·蛋白质测序 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·粗酶制备 | 第37页 |
| ·Sephadex-G-75凝胶过滤层析 | 第37页 |
| ·DE 52阴离子交换柱层析 | 第37-38页 |
| ·Sephacryl S-100HR凝胶过滤层析 | 第38-39页 |
| ·纤溶酶纯化总结 | 第39页 |
| ·纤溶酶纯度鉴定 | 第39-40页 |
| ·纤溶酶分子量测定 | 第40-41页 |
| ·氨基酸序列测定及比对 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 第三章 单环刺螠纤溶酶免疫原性的初步研究 | 第43-48页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·抗原的准备 | 第43-44页 |
| ·免疫动物 | 第44页 |
| ·血清中抗体效价的测定 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 单环刺螠纤溶酶基因cDNA的克隆 | 第48-61页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第48页 |
| ·常用液体配制 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-55页 |
| ·实验材料及器材的预处理: | 第49页 |
| ·总RNA提取 | 第49-50页 |
| ·RNA质量鉴定 | 第50-51页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第51-52页 |
| ·引物设计与合成 | 第52-53页 |
| ·Touchdown PCR | 第53页 |
| ·目的片段的回收及克隆 | 第53-55页 |
| ·测序 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-60页 |
| ·总RNA提取 | 第55页 |
| ·纤溶酶基因cDNA片段的克隆与分析 | 第55-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 总结 | 第61-63页 |
| 1.主要研究结论与创新点 | 第61页 |
| 2.不足之处与未来展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 发表文章 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
