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成年皮肤成纤维细胞克隆绵羊的生产

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 引言第9-20页
   ·核移植概念第9-10页
   ·核移植发展历程第10-13页
     ·核移植历史回顾第10-11页
     ·核移植研究现状第11页
     ·核移植应用前景第11-13页
   ·核移植机理的研究第13-14页
     ·成熟促进因子(MPF)在重编程中所起的作用第13页
     ·DNA 甲基化第13页
     ·核质相互作用第13-14页
   ·核移植的技术程序第14-19页
     ·受体细胞的准备第14-16页
     ·供体细胞的准备第16页
     ·重构胚的构建第16-17页
     ·重构胚激活第17-19页
     ·重构胚的培养第19页
   ·体细胞核移植存在的问题第19-20页
2 实验研究第20-37页
   ·绵羊皮肤成纤维细胞的分离和培养第21-23页
     ·绵羊皮肤的采集第21-22页
     ·原代培养第22页
     ·皮肤成纤维细胞与上皮样细胞的纯化第22页
     ·绵羊成纤维细胞的冷冻保存及解冻第22页
     ·绵羊皮肤成纤维细胞生长曲线第22-23页
     ·绵羊成纤维细胞染色体的制备第23页
   ·绵羊卵母细胞的采集第23-24页
     ·卵巢卵母细胞的采集第23页
     ·卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟培养第23页
     ·成熟卵的检查第23-24页
   ·卵母细胞的孤雌激活及发育培养第24页
     ·电激活第24页
     ·化学激活第24页
   ·绵羊克隆的程序第24-26页
     ·核供体的准备第24-25页
     ·核移植第25页
     ·融合第25页
     ·重构胚的激活及体外培养第25页
     ·受体羊的准备第25-26页
     ·克隆绵羊围产期的维护第26页
     ·克隆绵羊的鉴定第26页
   ·结果第26-32页
     ·绵羊皮肤成纤维细胞原代和传代培养第26-27页
     ·绵羊皮肤成纤维细胞的生长曲线第27页
     ·绵羊皮肤成纤维细胞染色体数目第27页
     ·不同激活电压对绵羊卵母细胞孤雌激活的结果第27-28页
     ·不同激活方法处理绵羊卵母细胞的孤雌激活结果第28-29页
     ·不同融合电压对核移植效率的影响第29页
     ·不同胚龄重构胚的胚胎移植结果第29-30页
     ·克隆羊的鉴定结果第30-32页
   ·讨论第32-36页
     ·绵羊皮肤成纤维细胞的培养第32-33页
     ·卵母细胞的孤雌激活第33页
     ·供体细胞的处理方式对重构胚的影响第33-34页
     ·不同融合参数对重构胚的影响第34-35页
     ·不同胚龄重构胚胚胎移植对妊娠的影响第35页
     ·克隆动物对其成活率的影响第35-36页
   ·结论第36-37页
致谢第37-38页
参考文献第38-44页
附图第44-47页
作者简介第47页

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