| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 正文 | 第12-49页 |
| 材料与方法 | 第12-30页 |
| 1.材料 | 第12-14页 |
| ·引物合成及序列测定 | 第12页 |
| ·菌株和细胞株 | 第12页 |
| ·质粒及基因组 | 第12-13页 |
| ·分子生物学工具酶 | 第13页 |
| ·常用试剂盒 | 第13页 |
| ·细胞培养试剂 | 第13页 |
| ·抗体 | 第13-14页 |
| ·主要实验仪器 | 第14页 |
| 2.方法 | 第14-30页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第14-26页 |
| ·hTERT启动子的扩增和连接 | 第14-18页 |
| ·HSV-TK基因的扩增和连接 | 第18-20页 |
| ·人IL-12 p40基因的扩增 | 第20-21页 |
| ·人IL-12 p35基因的扩增 | 第21页 |
| ·人IL-12 p70基因的扩增 | 第21-22页 |
| ·人IL-12 p70点突变体基因的扩增和连接 | 第22-26页 |
| ·重组表达载体的表达鉴定 | 第26-30页 |
| ·表达细胞的选择和培养 | 第26页 |
| ·表达细胞真核高效转染 | 第26-27页 |
| ·细胞真核表达的Western blot分析 | 第27-28页 |
| ·细胞真核表达的免疫荧光分析 | 第28-30页 |
| 结果 | 第30-43页 |
| 第一部分 重组表达载体的构建 | 第30-40页 |
| ·hTERT启动子的特异性扩增 | 第30页 |
| ·HSV-TK-linker基因的特异性扩增 | 第30-31页 |
| ·人IL-12 p40基因的扩增 | 第31页 |
| ·人IL-12 p35基因的扩增 | 第31-32页 |
| ·人IL-12 p70基因的重组扩增 | 第32-33页 |
| ·人IL-12 p70基因点突变体上下游的扩增 | 第33页 |
| ·人IL-12 p70点突变全长基因的重组扩增 | 第33-34页 |
| ·pShuttle-hTERTp-HSV-TK-linker-IL-12重组质粒的鉴定 | 第34-39页 |
| 小结 | 第39-40页 |
| 第二部分 重组表达载体的表达鉴定 | 第40-43页 |
| ·重组表达载体转染细胞的western-blot检测 | 第40页 |
| ·重组表达载体转染细胞的细胞间接免疫荧光检测 | 第40-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 结论总结 | 第43-44页 |
| 讨论 | 第44-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 文献综述 | 第49-61页 |
| 附录 | 第61-64页 |
| 英文缩写词表 | 第61-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |