摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第9-19页 |
1 多环芳烃的分布 | 第9-10页 |
2 多环芳烃的毒性和致癌性 | 第10页 |
3 多环芳烃在水、大气、土壤中污染情况 | 第10-15页 |
·水 | 第10-13页 |
·空气 | 第13-14页 |
·土壤 | 第14-15页 |
4 多环芳烃的修复与降解 | 第15-17页 |
·微生物降解 | 第15-16页 |
·光辐射讲解 | 第16页 |
·微波辐射讲解 | 第16页 |
·植物修复 | 第16-17页 |
5 拟南芥 | 第17页 |
6 本研究的意义与内容 | 第17-19页 |
第二章 菲胁迫拟南芥反应体系的优化 | 第19-23页 |
1 材料、试剂与方法 | 第19-20页 |
·材料 | 第19-20页 |
·拟南芥品种 | 第19页 |
·MS 培养基 | 第19-20页 |
·试剂 | 第20页 |
·方法 | 第20页 |
·菲胁迫拟南芥 | 第20页 |
·被胁迫拟南芥根和下胚轴的测定 | 第20页 |
2 结果与分析 | 第20-23页 |
3 小结与讨论 | 第23页 |
第三章 响应PAHS 菲胁迫相关基因过量表达植株和T-DNA 插入失活突变体的菲胁迫表型分析 | 第23-51页 |
1 材料与试剂 | 第23-25页 |
·种子、载体、菌株 | 第23-24页 |
·试剂 | 第24-25页 |
·酶 | 第24页 |
·其他试剂 | 第24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-49页 |
·拟南芥的种植 | 第25页 |
·基因引物设计 | 第25页 |
·目的基因的获得 | 第25-29页 |
·PCR 扩增目的基因 | 第25-26页 |
·PCR 产物的检测 | 第26-28页 |
·目的片段的回收(天根胶回收试剂盒) | 第28-29页 |
·目的基因的克隆 | 第29-35页 |
·TA 连接 | 第29页 |
·大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第29-30页 |
·连接产物的转化 | 第30页 |
·转化子的验证 | 第30-35页 |
·TA 质粒的测序 | 第35页 |
·目的基因过量表达载体的构建 | 第35-38页 |
·目的基因和过量表达载体的重组 | 第35页 |
·连接产物转化大肠杆菌感受态 | 第35-36页 |
·重组转化子的验证 | 第36-37页 |
·提取质粒酶切验证 | 第37-38页 |
·过量表达载体转化农杆菌GV3101 | 第38-40页 |
·农杆菌GV3101 感受态的制备 | 第38页 |
·过量表达载体转化农杆菌GV3101 | 第38-39页 |
·转化子的菌液PCR 验证 | 第39-40页 |
·农杆菌转化到拟南芥上 | 第40页 |
·转化苗的验证 | 第40-46页 |
·转化苗的BASTA 筛选 | 第40-41页 |
·转化苗的BAR 基因的验证 | 第41-42页 |
·转化苗的RT-PCR 验证 | 第42-46页 |
·激活突变体的菲胁迫 | 第46-48页 |
·胁迫方法 | 第46页 |
·结果与分析 | 第46-48页 |
·T-DNA 插入失活突变体 | 第48-49页 |
·菲胁迫T-DNA 插入失活突变体的方法 | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-49页 |
3 小结与讨论 | 第49-50页 |
·继代种子抗菲胁迫降低或消失 | 第49页 |
·激酶C 受体和硫氧还蛋白在菲胁迫拟南芥时的功能 | 第49-50页 |
4. 进一步工作 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附件 TA 克隆质粒测序及其与候选基因比对结果 | 第58-64页 |