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甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库筛选及SeM-8蛋白的分离与鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 前言第8-13页
   ·甜菜夜蛾及危害概述第8-9页
     ·甜菜夜蛾第8页
     ·甜菜夜蛾的危害第8页
     ·目前对甜菜夜蛾的防治第8-9页
   ·昆虫围食膜及围食膜蛋白第9-13页
     ·围食膜形成概述第9页
     ·围食膜的结构和组分第9-10页
     ·围食膜的功能及研究意义第10页
     ·围食膜蛋白的研究及意义第10-13页
2 材料与方法第13-22页
   ·实验材料与仪器设备第13-16页
     ·供试昆虫与菌株第13页
     ·培养基第13页
     ·溶液的配制第13-15页
     ·酶与生化试剂第15页
     ·常用仪器设备第15-16页
   ·实验方法第16-22页
     ·cDNA 文库的扩增第16页
     ·甜菜夜蛾中肠cDNA 扩增文库的滴度测定第16页
     ·特异性抗体制备第16-17页
     ·cDNA 文库的免疫筛选第17页
     ·单克隆切除第17-18页
     ·CTAB 法提取质粒DNA 及检测第18页
     ·酶切及PCR 方法鉴定第18-19页
     ·测序及序列分析第19页
     ·甜菜夜蛾中肠组织的收集第19页
     ·中肠组织总RNA 的提取第19页
     ·引物设计第19-20页
     ·5′RACE 反应第20页
     ·RACE-PCR 克隆、全长序列扩增及序列分析第20页
     ·融合基因在大肠杆菌中的表达第20-21页
     ·融合蛋白的Western blot 鉴定第21页
     ·SeM-8 粘蛋白在甜菜夜蛾幼虫中的鉴定和组织结构定位第21-22页
3 结果与分析第22-31页
   ·cDNA 文库的扩增及滴度第22页
   ·cDNA 文库的筛选第22-24页
   ·cDNA 序列的测定及分析第24-25页
   ·序列结构域分析第25-26页
   ·RNA 提取第26-27页
   ·5′RACE第27页
   ·甜菜夜蛾SeM-8 全长cDNA 的克隆及其序列分析第27-29页
   ·同源性比较第29页
   ·原核表达载体的构建及SeM-8 的诱导表达第29-30页
   ·肠粘蛋白SeM-8 在甜菜夜蛾组织中的免疫定位第30-31页
4 讨论第31-33页
5 结论第33-34页
参考文献第34-40页
在读期间发表的论文第40-41页
作者简介第41-42页
致谢第42-43页

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