| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| ·研究背景 | 第9页 |
| ·豆科植物与根瘤菌之间的分子对话 | 第9-10页 |
| ·豆科植物对根瘤菌结瘤因子的辩认 | 第10-11页 |
| ·结瘤因子的信号转导 | 第11-13页 |
| ·结瘤信号通路蛋白 | 第13-15页 |
| ·研究蛋白质之间以及蛋白与DNA之间相互作用的方法 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第15-16页 |
| ·pull-down和western印迹转移技术 | 第16页 |
| ·凝胶阻滞(EMSA-electrophoretic mobility shift assay) | 第16页 |
| ·本研究的目的、意义、技术路线 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-26页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·菌株与质粒 | 第18页 |
| ·分子生物学试剂 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·贮存液和缓冲液配方 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·用PCR扩增出序列已知的基因 | 第20页 |
| ·NSP全长及缺失突变体的表达质粒的构建 | 第20-21页 |
| ·酵母感受态细胞的制备及转化 | 第21页 |
| ·菌落PCR | 第21页 |
| ·酵母体内检测蛋白间的相互作用 | 第21-22页 |
| ·利用ONPG作为底物定量检测β-半乳糖苷酶活性 | 第22页 |
| ·靶蛋白诱导表达 | 第22-23页 |
| ·靶蛋白诱导纯化 | 第23-24页 |
| ·Western Blotting技术检测蛋白间的相互作用 | 第24页 |
| ·凝胶阻滞(EMSA)实验 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-34页 |
| ·NSP及其缺失突变体表达质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·百脉根NSP1、NSP2及其缺失突变体融合蛋白的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·百脉根NSP1、NSP2及其缺失突变体融合蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| ·百脉根NSP1与NSP2蛋白在酵母体内的相互作用 | 第29-31页 |
| ·NSP1与NSP2相互作用结构域的鉴定 | 第31-33页 |
| ·NSP1结合启动子DNA能力的鉴定 | 第33-34页 |
| 4 总结与讨论 | 第34-37页 |
| ·总结 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 论文发表情况 | 第44页 |
