| 中文摘要 | 第1-23页 |
| ABSTRACT | 第23-35页 |
| 符号说明 | 第35-37页 |
| 第一部分 PDCD4在卵巢癌中的作用及其机制 | 第37-79页 |
| 第一节 PDCD4在人卵巢癌中的表达状态及其作用 | 第37-54页 |
| 前言 | 第37页 |
| 一、PDCD4的发现和生物学特点 | 第37-38页 |
| 二、PDCD4与肿瘤发生的关系 | 第38-39页 |
| 三、研究目的 | 第39页 |
| 材料 | 第39-42页 |
| 方法 | 第42-50页 |
| 一、卵巢癌细胞系的培养 | 第42-43页 |
| 二、RT-PCR | 第43-45页 |
| 三、Western blot | 第45-47页 |
| 四、免疫组化 | 第47-48页 |
| 五、外源性PDCD4转染卵巢癌细胞系及稳定克隆的建立 | 第48-49页 |
| 六、PDCD4对卵巢癌细胞在裸鼠体内成瘤能力的影响 | 第49页 |
| 七、统计学分析 | 第49-50页 |
| 结果 | 第50-51页 |
| 一、PDCD4在人卵巢癌细胞系和原发卵巢癌组织中的表达 | 第50页 |
| 二、外源性PDCD4的表达能够明显抑制卵巢癌细胞的生长及克隆形成能力 | 第50-51页 |
| 三、外源性PDCD4表达降低了卵巢癌细胞在裸鼠体内的成瘤能力 | 第51页 |
| 讨论 | 第51-53页 |
| 小结 | 第53-54页 |
| 第二节 PDCD4对卵巢癌化疗敏感性的影响及其机制研究 | 第54-67页 |
| 前言 | 第54-56页 |
| 一、卵巢癌的化疗药物和化疗敏感性 | 第54-55页 |
| 二、PDCD4的作用机制与化疗敏感性 | 第55页 |
| 三、研究目的 | 第55-56页 |
| 材料 | 第56-57页 |
| 方法 | 第57-60页 |
| 一、卵巢癌细胞系的培养及转染 | 第57页 |
| 二、RT-PCR检测PDCD4的表达 | 第57页 |
| 三、Western blot方法检测PDCD4及细胞凋亡相关分子的表达 | 第57页 |
| 四、免疫组织化学方法检测PDCD4及凋亡相关分子的表达 | 第57-58页 |
| 五、MTT法对卵巢癌细胞化疗敏感性进行测定 | 第58页 |
| 六、小干扰RNA的转染 | 第58页 |
| 七、细胞周期的检测 | 第58页 |
| 八、细胞凋亡的检测 | 第58-59页 |
| 九、体内荷瘤检测PDCD4在体内对顺铂化疗敏感性的影响 | 第59-60页 |
| 十、统计学分析方法 | 第60页 |
| 结果 | 第60-63页 |
| 一、PDCD4表达水平与卵巢癌化疗敏感性的关系 | 第60页 |
| 二、PDCD4在体外过表达可以增强卵巢癌的化疗敏感性 | 第60-61页 |
| 三、沉默表达PDCD4减低了卵巢癌对顺铂的化疗敏感性 | 第61页 |
| 四、PDCD4和顺铂在体内联合治疗能明显抑制卵巢癌的生长 | 第61-62页 |
| 五、PDCD4过表达能够明显增强顺铂诱导的细胞凋亡,但对细胞周期的改变没什么影响 | 第62页 |
| 六、PDCD4增强顺铂诱导的细胞凋亡主要通过死亡受体介导的凋亡通路 | 第62-63页 |
| 讨论 | 第63-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 第三节 PDCD4在细胞发生自噬过程中的作用及其机制研究 | 第67-79页 |
| 前言 | 第67-71页 |
| 一、自噬的发生过程 | 第67-69页 |
| 二、自噬的信号通路 | 第69-70页 |
| 三、自噬的检测方法 | 第70-71页 |
| 四、研究目的 | 第71页 |
| 材料 | 第71-72页 |
| 方法 | 第72-74页 |
| 一、PCR | 第72页 |
| 二、Western blot | 第72页 |
| 三、小鼠腹腔巨噬细胞的分离 | 第72页 |
| 四、小鼠骨髓细胞的分离和骨髓来源的巨噬细胞的诱导 | 第72-73页 |
| 五、自噬的诱导 | 第73页 |
| 六、荧光显微镜下观察GFP-LC3的表达 | 第73页 |
| 七、流式细胞术检测ROS活性 | 第73-74页 |
| 结果 | 第74-75页 |
| 一、PDCD4过表达有抑制卵巢癌细胞发生自噬的作用 | 第74页 |
| 二、PDCD4-/-小鼠的巨噬细胞在自噬诱导因素下自噬明显增强 | 第74页 |
| 三、PDCD4-/-小鼠的巨噬细胞在LPS诱导下ROS活性没有明显变化 | 第74-75页 |
| 四、PDCD4抑制LPS诱导的自噬可能是通过p38MAPK通路 | 第75页 |
| 讨论 | 第75-78页 |
| 小结 | 第78-79页 |
| 第二部分 PDCD5在卵巢癌中的表达状态及临床意义 | 第79-86页 |
| 前言 | 第79-81页 |
| 一、PDCD5的发现及生物学功能 | 第79页 |
| 二、PDCD5与肿瘤的关系 | 第79-80页 |
| 三、研究目的 | 第80-81页 |
| 材料 | 第81页 |
| 方法 | 第81-82页 |
| 结果 | 第82-83页 |
| 一、PDCD5mRNA和蛋白在人卵巢癌细胞系中的表达 | 第82页 |
| 二、PDCD5mRNA和蛋白在人浆液性囊腺癌组织中的表达 | 第82页 |
| 三、PDCD5在浆液性囊腺癌的低表达状态和卵巢癌的FIGO分期相关 | 第82-83页 |
| 四、PDCD5在浆液性囊腺癌的低表达或缺失和病人的预后密切相关 | 第83页 |
| 讨论 | 第83-85页 |
| 小结 | 第85-86页 |
| 附图表 | 第86-115页 |
| 参考文献 | 第115-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 攻读博士学位期间发表论文及编著目录 | 第125-128页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第128-130页 |
| 附件1 英文文章1 | 第130-138页 |
| 附件2 英文文章2 | 第138-144页 |
| 附件3 英文文章3 | 第144-149页 |
