| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| 1 柱型苹果常规育种和分子育种研究 | 第12-13页 |
| ·柱型苹果常规遗传育种 | 第12-13页 |
| ·柱型苹果分子育种研究 | 第13页 |
| 2 赤霉素与植物生长发育 | 第13-21页 |
| ·赤霉素的生物合成和调节 | 第14-16页 |
| ·赤霉素受体GID1蛋白 | 第16-17页 |
| ·赤霉素介导DELLA蛋白降解的分子机制 | 第17-21页 |
| ·DELLA蛋白家族基因 | 第17-18页 |
| ·GA诱导DELLA蛋白降解的分子机制 | 第18-19页 |
| ·DELLA蛋白与植物生长发育 | 第19-21页 |
| 3 研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 4 技术路线 | 第22-24页 |
| ·柱型苹果和普通型苹果细胞学研究技术路线 | 第22-23页 |
| ·柱型苹果DELLA蛋白相关基因的克隆及表达分析技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 柱型与普通型苹果叶片结构与叶绿体超微结构比较 | 第24-34页 |
| 1 材料与方法 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·苹果组培苗的获得 | 第24-25页 |
| ·叶片石蜡切片的取样和制备 | 第25页 |
| ·叶片扫描电镜样品的取样与制备 | 第25页 |
| ·叶片透射电镜样品的取样与制备 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-31页 |
| ·大田条件下柱型和普通型苹果叶片的解剖结构比较 | 第25-27页 |
| ·大田条件下柱型和普通型苹果叶片表皮特征比较 | 第27-28页 |
| ·上表皮 | 第27页 |
| ·下表皮 | 第27-28页 |
| ·大田条件下柱型和普通型苹果叶片叶绿体超微结构比较 | 第28-29页 |
| ·柱型和普通型苹果组培苗叶片表皮结构比较 | 第29-31页 |
| ·苹果组培苗上表皮形态特征 | 第29-30页 |
| ·苹果组培苗下表皮形态特征 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 4 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 柱型和普通型苹果的激素敏感性研究 | 第34-43页 |
| 1 材料与方法 | 第34-35页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·激素处理 | 第34-35页 |
| ·内源激素含量的测定 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-41页 |
| ·外源GA_3对柱型和普通型苹果表型的影响 | 第35-37页 |
| ·外源GA_3对柱型和普通型苹果新梢生长的影响 | 第35-36页 |
| ·外源GA_3对柱型和普通型苹果叶片生长的影响 | 第36-37页 |
| ·外源BR对柱型和普通型苹果表型的影响 | 第37-38页 |
| ·外源BR对柱型和普通型苹果新梢生长的影响 | 第37页 |
| ·外源BR对柱型和普通型苹果叶片生长的影响 | 第37-38页 |
| ·外源IAA对柱型和普通型苹果表型的影响 | 第38-40页 |
| ·外源IAA对柱型和普通型苹果新梢生长的影响 | 第38-39页 |
| ·外源IAA对柱型和普通型苹果叶片生长的影响 | 第39-40页 |
| ·柱型和普通型苹果内源激素含量比较 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| 4 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 柱型苹果"鲁加5号"对外源GA_3的生理反应 | 第43-51页 |
| 1 材料与方法 | 第43-44页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·外源GA_3对"鲁加5号"苹果嫁接苗和培组苗的处理 | 第43-44页 |
| ·酶液的提取与活性测定 | 第44页 |
| ·内源激素含量的测定 | 第44页 |
| ·数据统计分析 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-49页 |
| ·柱型苹果"鲁加5号"嫁接苗对外源GA_3的生理反应 | 第44-47页 |
| ·GA_3对柱型苹果"鲁加5号"嫁接苗α淀粉酶酶活性的影响 | 第44-45页 |
| ·GA_3对柱型苹果"鲁加5号"嫁接苗POD和SOD酶活性的影响 | 第45-46页 |
| ·GA_3对柱型苹果"鲁加5号"嫁接苗内源激素的影响 | 第46-47页 |
| ·柱型苹果"鲁加5号"组培苗对外源GA_3的生理反应 | 第47-49页 |
| ·GA_3对柱型苹果"鲁加5号"组培苗表型的影响 | 第47-48页 |
| ·GA_3对柱型苹果"鲁加5号"组培苗α淀粉酶活性的影响 | 第48页 |
| ·GA_3对柱型苹果"鲁加5号"组培苗POD和SOD的影响 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49页 |
| 4 小结 | 第49-51页 |
| 第五章 柱型苹果DELLA蛋白MdGAI基因的克隆与序列分析 | 第51-72页 |
| 1 材料与方法 | 第51-58页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·菌株,载体与试剂 | 第51-52页 |
| ·苹果茎尖RNA的提取和检测(SDS法) | 第52-53页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-53页 |
| ·RNA质量的检测 | 第53页 |
| ·RT-PCR方法获得目的基因的中间片段 | 第53-54页 |
| ·反转录 | 第53页 |
| ·目的基因中间片段的PCR扩增 | 第53-54页 |
| ·目的基因中间片段的纯化回收和测序 | 第54页 |
| ·用RACE方法获得MdGAI基因的cDNA全长序列 | 第54-57页 |
| ·目的基因的3'RACE | 第54-56页 |
| ·目的基因的5'RACE | 第56-57页 |
| ·MdGAI序列拼接及全长cDNA扩增 | 第57-58页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第58页 |
| 2 结果和分析 | 第58-70页 |
| ·提取样品的总RNA | 第58页 |
| ·柱型苹果MdGAI基因全长cDNA的获得 | 第58-61页 |
| ·目的基因中间片段的获得 | 第58-59页 |
| ·柱型苹果MdGAI基因的3'RACE | 第59页 |
| ·柱型苹果MdGAI基因的5'RACE | 第59-60页 |
| ·柱型苹果MdGAI基因的全长cDNA的获得及验证 | 第60-61页 |
| ·柱型苹果MdGAI基因的生物信息学分析 | 第61-70页 |
| ·MdGAI基因的序列基本信息 | 第61-65页 |
| ·MdGAI基因的氨基酸序列比对分析 | 第65-68页 |
| ·柱型苹果MdGAI和其它物种的进化树分析 | 第68-70页 |
| ·苹果MdGAI蛋白保守结构域和三维结构预测 | 第70页 |
| 3 讨论 | 第70-71页 |
| 4 小结 | 第71-72页 |
| 第六章 苹果MdGAI1基因的Real Time PCR表达分析 | 第72-82页 |
| 1 材料与方法 | 第72-74页 |
| ·植物材料 | 第72页 |
| ·试剂与仪器 | 第72-73页 |
| ·试剂 | 第72-73页 |
| ·仪器 | 第73页 |
| ·苹果总RNA的提取和纯化 | 第73页 |
| ·反应组成及反应条件 | 第73-74页 |
| ·RT反应 | 第73-74页 |
| ·PCR反应 | 第74页 |
| ·标准曲线的制作和目的基因的相对表达量分析 | 第74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-80页 |
| ·提取样品的总RNA | 第74-76页 |
| ·管家基因MdACTIN和目的基因MdGAI1的扩增曲线、溶解曲线及标准曲线 | 第76-78页 |
| ·柱型和普通型苹果新梢顶端MdGAI1基因的相对表达量分析 | 第78-79页 |
| ·柱型和普通型苹果新梢发育初期节间中MdGAI1基因的相对表达量分析 | 第79页 |
| ·柱型苹果不同组织及其发育时期内的MdGAI1基因的相对表达量分析 | 第79-80页 |
| 3.讨论 | 第80-81页 |
| 4.小结 | 第81-82页 |
| 第七章 总结 | 第82-84页 |
| 1 主要结论 | 第82-83页 |
| 2 创新点 | 第83页 |
| 3 下一步工作设想 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 缩写词 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 作者简介 | 第96-97页 |
