| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 昆虫细胞色素P450酶的特征 | 第12页 |
| 1.2 昆虫细胞色素P450酶的分类与数量 | 第12-13页 |
| 1.3 昆虫细胞色素P450酶的表达模式 | 第13-14页 |
| 1.4 植物源杀虫剂在我国的应用现状 | 第14-15页 |
| 1.5 植物次生物质种类及对昆虫的影响 | 第15-17页 |
| 1.6 植物次生物质对昆虫P450酶的诱导模式 | 第17-19页 |
| 1.7 昆虫P450基因对植物次生物质的代谢 | 第19-20页 |
| 1.8 昆虫对植物次生物质的抗药性 | 第20页 |
| 1.9 昆虫启动子的研究 | 第20-21页 |
| 1.10 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 四种植物次生物质胁迫下棉蚜解毒酶基因表达的不同响应模式 | 第23-36页 |
| 2.1 材料和方法 | 第23-26页 |
| 2.1.1 样品的处理和收集 | 第23-24页 |
| 2.1.2 Illumina高通量测序和组装 | 第24页 |
| 2.1.3 实时荧光定量PCR | 第24-26页 |
| 2.2 结果与分析 | 第26-33页 |
| 2.2.1 次生物质对棉蚜的毒力测定 | 第26页 |
| 2.2.2 Illumina高通量测序和基因注释 | 第26-28页 |
| 2.2.3 数字表达谱分析结果 | 第28-30页 |
| 2.2.4 解毒酶的鉴定和分析 | 第30-33页 |
| 2.3 讨论与展望 | 第33-36页 |
| 第三章 植物次生物质胁迫下棉蚜细胞色素P450基因的表达模式 | 第36-42页 |
| 3.1 材料和方法 | 第36-37页 |
| 3.1.1 样品的处理和收集 | 第36-37页 |
| 3.1.2 总RNA提取,cDNA合成和P450基因的全长扩增 | 第37页 |
| 3.1.3 实时荧光定量PCR | 第37页 |
| 3.1.4 数据处理 | 第37页 |
| 3.2 结果与分析 | 第37-40页 |
| 3.2.1 棉蚜五个P450基因的全长扩增 | 第37-38页 |
| 3.2.2 棉蚜五个P450基因在植物次生物质胁迫下的诱导模式 | 第38-40页 |
| 3.3 讨论与展望 | 第40-42页 |
| 第四章 鉴定棉蚜细胞色素P450基因响应植物次生物质的启动子元件 | 第42-62页 |
| 4.1 材料和方法 | 第42-47页 |
| 4.1.1 细胞培养 | 第42-43页 |
| 4.1.2 基因组提取与启动子克隆 | 第43页 |
| 4.1.3 P450基因启动子缺失片段的构建 | 第43-45页 |
| 4.1.4 瞬时转染及双荧光报告素酶基因活性检测 | 第45-46页 |
| 4.1.5 启动子区域转录因子结合位点的预测 | 第46页 |
| 4.1.6 RNA干扰 | 第46-47页 |
| 4.2 结果与分析 | 第47-59页 |
| 4.2.1 棉蚜五个细胞色素P450基因启动子及缺失片段的克隆 | 第47-49页 |
| 4.2.2 P450基因本底及植物次生物质诱导的启动子活性检测结果 | 第49-53页 |
| 4.2.3 棉蚜CYP基因启动子内转录因子结合位点的预测 | 第53-57页 |
| 4.2.4 棉蚜CYP305A1启动子区与venom protease基因的重叠区研究 | 第57-59页 |
| 4.3 讨论与展望 | 第59-62页 |
| 第五章 利用酵母单杂交系统鉴定特异性转录因子 | 第62-86页 |
| 5.1 材料与方法 | 第64-72页 |
| 5.1.1 实验试虫 | 第64页 |
| 5.1.2 酵母品系 | 第64页 |
| 5.1.3 主要实验器材 | 第64页 |
| 5.1.4 实验方法 | 第64-72页 |
| 5.2 结果与分析 | 第72-85页 |
| 5.2.1 诱饵序列的合成及鉴定 | 第72-73页 |
| 5.2.2 构建诱饵片段重组质粒结果 | 第73-74页 |
| 5.2.3 含诱饵片段酵母报告株的建立 | 第74-77页 |
| 5.2.4 使用酵母单杂交系统cDNA-AD融合表达文库的构建 | 第77-79页 |
| 5.2.5 利用酵母单杂交系统筛选与棉蚜P450基因启动子上AhR结合位点相互作用的转录因子 | 第79-83页 |
| 5.2.6 生物信息学分析结果 | 第83-85页 |
| 5.3 讨论与展望 | 第85-86页 |
| 全文总结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 附录 | 第104-130页 |
| 附录A 四种植物次生物质对棉蚜的毒性测定 | 第104-105页 |
| 附录B 棉蚜数字表达谱中GO聚类中富集可调控基因比率 | 第105-109页 |
| 附录C 四种植物次生物质处理下棉蚜unigenes的KEGG注释通路 | 第109-111页 |
| 附录D 四种植物次生物质处理下棉蚜KEGG通路 | 第111-112页 |
| 附录E 假定P450基因的BLASTX结果 | 第112-117页 |
| 附录F 假定的GSTs、CarEs和AChEs的BLASTX结果 | 第117-119页 |
| 附录G 转录组候选P450基因PCR验证引物 | 第119-122页 |
| 附录H 四种植物次生物质处理后可调控的CarE基因注释信息 | 第122-123页 |
| 附录I 四种植物次生物质处理后可调控的P450基因注释信息 | 第123-125页 |
| 附录J 棉蚜venom protease cDNA、CYP305A1启动子及豌豆蚜基因组序列比对 | 第125-130页 |
| 作者简介 | 第130-132页 |
