| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第15-41页 |
| 1.1 生物防治的研究进展 | 第15页 |
| 1.2 生防菌的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 生防细菌的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.2 生防真菌的研究进展 | 第16页 |
| 1.2.3 生防放线菌的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 生防芽孢杆菌的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 芽孢杆菌生防机制 | 第18-28页 |
| 1.4.1 菌种间的竞争作用 | 第19页 |
| 1.4.2 芽孢杆菌活性物质 | 第19-25页 |
| 1.4.3 诱导植物抗性 | 第25-28页 |
| 1.5 脂肽类物质合成调控基因 | 第28-30页 |
| 1.5.1 脂肽类物质关键合成酶sfp基因 | 第28-29页 |
| 1.5.2 脂肽类物质关键合成酶lpa基因 | 第29-30页 |
| 1.6 解淀粉芽孢杆菌研究进展 | 第30页 |
| 1.7 天然产物研究进展 | 第30-36页 |
| 1.7.1 常规的分离方法 | 第31-32页 |
| 1.7.2 常规的鉴定方法 | 第32-33页 |
| 1.7.3 芽孢杆菌抗菌脂肽的检测鉴定 | 第33-36页 |
| 1.8 生物技术研究进展 | 第36-40页 |
| 1.8.1 分子鉴定技术 | 第36-37页 |
| 1.8.2 显微技术 | 第37-38页 |
| 1.8.3 芽孢杆菌转化方法 | 第38-39页 |
| 1.8.4 基因定点敲除 | 第39-40页 |
| 1.8.5 芽孢杆菌基因敲除 | 第40页 |
| 1.9 研究目的及意义 | 第40-41页 |
| 2 材料方法 | 第41-67页 |
| 2.1 供试菌株 | 第41-42页 |
| 2.2 主要仪器和试剂 | 第42-43页 |
| 2.3 培养基 | 第43-46页 |
| 2.4 HAB-2菌株菌种鉴定 | 第46-49页 |
| 2.4.1 形态学观察 | 第46页 |
| 2.4.2 分子生物学鉴定 | 第46-49页 |
| 2.5 抑菌作用测定 | 第49-50页 |
| 2.6 HAB-2菌株活性物质粗提 | 第50页 |
| 2.6.1 硫酸铵饱和沉淀法 | 第50页 |
| 2.6.2 酸沉淀法 | 第50页 |
| 2.6.3 有机溶剂萃取法 | 第50页 |
| 2.6.4 各类提取物活性测试 | 第50页 |
| 2.7 HAB-2菌株正丁醇提取物稳定性测定 | 第50-51页 |
| 2.7.1 紫外线稳定性 | 第50-51页 |
| 2.7.2 pH稳定性 | 第51页 |
| 2.7.3 热稳定性 | 第51页 |
| 2.8 脂肽类化合物分离纯化和鉴定 | 第51-52页 |
| 2.8.1 HAB-2菌株的发酵 | 第51页 |
| 2.8.2 飞行时间质谱MALDI-TOF -MS质谱鉴定 | 第51页 |
| 2.8.3 活性粗提物分离纯化 | 第51-52页 |
| 2.9 脂肽类化合物相关研究 | 第52-59页 |
| 2.9.1 脂肽类化合物合成基因扩增 | 第52-53页 |
| 2.9.2 脂肽类物质合成酶基因扩增 | 第53-54页 |
| 2.9.3 Southern杂交 | 第54-56页 |
| 2.9.4 基因定点敲除和回补 | 第56-59页 |
| 2.10 抑菌物质活性测定 | 第59-65页 |
| 2.10.1 芒果叶片离体试验 | 第59-60页 |
| 2.10.2 芒果果实保护试验 | 第60页 |
| 2.10.3 咪酰胺抑制芒果炭疽活性试验 | 第60页 |
| 2.10.4 番茄果实抑菌试验 | 第60页 |
| 2.10.5 番茄幼苗抑菌试验 | 第60-61页 |
| 2.10.6 抑菌活性物质对橡胶树白粉病的防治 | 第61页 |
| 2.10.7 抑藻活性检测试验 | 第61-62页 |
| 2.10.8 显微结构和超显微结构观察化合物H2对芒果炭疽病菌的影响 | 第62页 |
| 2.10.9 烟草过敏性反应 | 第62页 |
| 2.10.10 诱导烟草防卫反应 | 第62-65页 |
| 2.11 活性物质促生试验 | 第65-66页 |
| 2.11.1 番茄幼苗促生盆栽试验 | 第65页 |
| 2.11.2 对烟草种子促生影响 | 第65-66页 |
| 2.11.3 HAB-2菌株定殖研究 | 第66页 |
| 2.11.4 大田实验 | 第66页 |
| 2.12 斑马鱼毒性试验 | 第66-67页 |
| 2.12.1 急性毒性试验 | 第66页 |
| 2.12.2 斑马鱼胚胎发育指标 | 第66-67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-116页 |
| 3.1 HAB-2菌株的分类地位 | 第67-69页 |
| 3.1.1 形态学特征 | 第67-68页 |
| 3.1.2 HAB-2菌株在不同培养基上的生长形态情况: | 第68页 |
| 3.1.3 16S rDNA分析 | 第68-69页 |
| 3.1.4 特异性基因序列排列分析 | 第69页 |
| 3.2 HAB-2菌株拮抗作用 | 第69-72页 |
| 3.3 发酵液提取物的抑菌活性 | 第72-75页 |
| 3.3.1 各种提取物的抑菌活性 | 第72-73页 |
| 3.3.2 抑菌活性物质的种类分析 | 第73-75页 |
| 3.4 HAB-2菌株正丁醇提取物的稳定性 | 第75-77页 |
| 3.4.1 紫外线稳定性 | 第75-76页 |
| 3.4.2 正丁醇提取物pH稳定性 | 第76-77页 |
| 3.4.3 热稳定性 | 第77页 |
| 3.5 脂肽类化合物分离纯化和鉴定 | 第77-84页 |
| 3.5.1 抑菌活性粗提物飞行时间质谱MALDI-TOF-MS检测 | 第77-79页 |
| 3.5.2 抑菌活性成分分离 | 第79-82页 |
| 3.5.3 化合物H2活性鉴定 | 第82-84页 |
| 3.6 咪酰胺抑制芒果炭疽病菌 | 第84-85页 |
| 3.7 显微观察化合物H2对芒果炭疽病病原菌孢子的影响 | 第85-88页 |
| 3.8 显微观察化合物H2对水稻白叶枯菌的影响 | 第88-89页 |
| 3.9 显微观察化合物H2对菠萝泛菌的影响 | 第89-91页 |
| 3.10 化合物H2处理水稻白叶枯菌株和菠萝泛菌相关基因表达量变化 | 第91页 |
| 3.11 化合物H2对斑马鱼的急性毒性和发育影响 | 第91-92页 |
| 3.12 抑菌物质活性测定 | 第92-101页 |
| 3.12.1 对芒果炭疽病菌在芒果离体叶片上的抑制作用 | 第92-93页 |
| 3.12.2 对芒果炭疽病菌在芒果果实上的抑制作用 | 第93-94页 |
| 3.12.3 对番茄早疫病在果实上的抑制作用 | 第94-95页 |
| 3.12.4 对番茄幼苗抑菌作用 | 第95页 |
| 3.12.5 对橡胶树白粉病菌分生孢子发育的影响 | 第95-96页 |
| 3.12.6 对橡胶树白粉病防治作用 | 第96-97页 |
| 3.12.7 对铜绿微囊藻的抑制作用 | 第97-98页 |
| 3.12.8 烟草过敏性反应 | 第98-99页 |
| 3.12.9 烟草防卫反应 | 第99-101页 |
| 3.13 对植物促生作用 | 第101-106页 |
| 3.13.1 对番茄幼苗促生作用 | 第101-102页 |
| 3.13.2 对烟草种子促生作用 | 第102-103页 |
| 3.13.3 HAB-2菌株在烟草根部定殖 | 第103-104页 |
| 3.13.4 正丁醇提取物对豇豆生长及病害的影响 | 第104-106页 |
| 3.14 HAB-2菌株基因组中脂肽类物质相关基因 | 第106-116页 |
| 3.14.1 合成脂肽类物质基因检测 | 第106页 |
| 3.14.2 脂肽类物质关键合成酶基因检测 | 第106-107页 |
| 3.14.3 sfp和lpaHAB-2基因Southern杂交 | 第107-108页 |
| 3.14.4 HAB-2菌株和模式菌B.subtilis 168抑菌活性对比 | 第108页 |
| 3.14.5 定点敲除lpaHAB-2基因 | 第108-112页 |
| 3.14.6 回补lpaHAB-2基因转入模式菌株B.subtilis168 | 第112-116页 |
| 4 讨论 | 第116-125页 |
| 4.1 HAB-2菌株菌种鉴定和抑菌谱 | 第116-117页 |
| 4.2 活性成分分离鉴定及其抑菌活性 | 第117-119页 |
| 4.3 脂肽物质相关合成基因的研究 | 第119-120页 |
| 4.4 活性成分的作用机理 | 第120-122页 |
| 4.5 活性成分促进植物生长和定殖研究 | 第122-125页 |
| 5 结论 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-142页 |
| 附图 | 第142-148页 |
| 攻读学位期间发表和待发表学术论文、申请专利、获奖及项目资助情况 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
