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杉木端粒相关序列和5S rDNA序列分析及染色体定位

致谢第1-4页
摘要第4-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-22页
 1 杉木概况第10-12页
   ·杉木的生物学特征及利用价值第10页
   ·杉木的研究进展第10-12页
     ·育种方面的研究第10-11页
     ·细胞水平的研究第11页
     ·分子水平的研究第11-12页
 2 植物端粒相关序列与5S rDNA 的研究进展第12-18页
   ·植物端粒及端粒相关序列的研究概况第12-16页
     ·端粒第12-15页
       ·端粒的结构第12页
       ·端粒的功能第12-13页
       ·端粒的合成第13-14页
       ·植物端粒的研究进展第14-15页
     ·端粒相关序列第15-16页
       ·端粒相关序列概述第15-16页
       ·植物端粒相关序列的研究进展第16页
   ·植物5S rDNA 的研究概况第16-18页
     ·5S rDNA第16-17页
     ·植物5S rDNA 的研究进展第17-18页
 3 原位杂交技术的研究进展第18-21页
   ·荧光原位杂交技术的应用第18-19页
     ·在植物遗传研究上的应用第18-19页
     ·在植物起源进化研究上的应用第19页
     ·在植物染色体物理图谱构建上的应用第19页
     ·在林木遗传育种上的应用现状第19页
   ·FISH 常用的靶DNA 和探针类型第19-21页
     ·中期染色体的原位杂交技术第20页
     ·减数分裂的粗线期染色体原位杂交技术第20页
     ·伸展DNA 纤维染色体原位杂交技术第20-21页
   ·FISH 的研究进展第21页
 4 本课题的研究目的和意义第21-22页
第二章 杉木端粒相关序列的克隆第22-36页
 1 材料与方法第22-28页
   ·实验材料第22-23页
     ·植物材料第22页
     ·菌株与质粒第22页
     ·实验试剂第22-23页
     ·实验仪器第23页
   ·实验方法第23-28页
     ·杉木基因组DNA 的制备(CTAB 法)第23-24页
     ·端粒相关序列的PCR 扩增第24页
     ·切胶回收第24-25页
     ·感受态的制备第25页
     ·PCR 产物的载体连接第25-26页
     ·连接产物的转化第26页
     ·转化产物的检测第26页
     ·菌液PCR第26-27页
     ·质粒的提取第27页
     ·核酸序列分析第27-28页
 2 实验结果与分析第28-34页
   ·杉木DNA 的初提及纯化第28页
   ·杉木端粒相关序列(TAS)PCR 条件的优化第28-31页
     ·不同退火温度第28-29页
     ·不同模板浓度第29页
     ·不同dNTP 浓度第29-30页
     ·不同Mg~(2+)浓度第30页
     ·杉木端粒相关序列PCR 体系的建立第30-31页
   ·端粒相关序列菌液PCR 及质粒情况第31-32页
     ·TAS 菌液PCR第31页
     ·质粒检测第31-32页
   ·杉木端粒相关序列的测序结果及分析第32-34页
     ·杉木端粒相关序列的测序结果第32-33页
     ·测序结果BLAST 比对结果第33页
     ·TAS 的同源性分析第33-34页
 3 结论与讨论第34-36页
   ·杉木DNA 的提取第34-35页
   ·杉木端粒相关序列的PCR 体系建立第35页
   ·杉木端粒相关序列的序列分析第35-36页
第三章 杉木及其近缘物种5S rDNA 结构比较第36-44页
 1 材料与方法第36-37页
   ·实验材料第36页
     ·植物材料第36页
     ·菌株与质粒第36页
     ·实验试剂第36页
     ·实验仪器第36页
   ·实验方法第36-37页
     ·基因组DNA 的制备(CTAB 法)第36页
     ·5S rDNA 的PCR 扩增第36-37页
     ·目的片段的扩增第37页
 2 实验结果与分析第37-41页
   ·东方杉、墨西哥落羽杉、中山杉、池杉、落羽杉5S rDNA 的扩增第37-38页
   ·墨西哥落羽杉5S rDNA 的测序结果第38页
   ·池杉5S rDNA 的测序结果第38页
   ·落羽杉5S rDNA 的测序结果第38-39页
   ·东方杉5S rDNA 的测序结果第39页
   ·中山杉5S rDNA 的测序结果第39-40页
   ·杉木及其近缘物种5S rDNA 基因序列的比较第40-41页
 3 结论与讨论第41-44页
   ·墨西哥落羽杉、东方杉、中山杉、池杉、落羽杉5S rDNA 基因序列分析第41-42页
   ·杉科植物5S rDNA 基因序列的比较第42-44页
第四章 杉木端粒相关序列及5S rDNA 的染色体荧光原位杂交第44-54页
 1 实验材料及方法第44-48页
   ·实验材料第44-45页
     ·植物材料第44页
     ·主要仪器第44页
     ·主要药品第44-45页
   ·实验方法第45-48页
     ·实验材料准备第45页
       ·杉木组培苗生根第45页
       ·杉木扦插苗生根第45页
     ·染色体制片第45-46页
       ·减数分裂染色体制片第45-46页
       ·有丝分裂染色体制片第46页
     ·染色体原位杂交第46-48页
       ·原位杂交试剂的配制第46-47页
       ·探针标记第47页
       ·探针与靶杂交第47-48页
       ·杂交信号检测第48页
 2 实验结果与分析第48-51页
   ·杉木组配苗和扦插苗的生根状况第48-49页
   ·探针标记体系的优化第49-50页
   ·标记探针检测第50页
   ·端粒相关序列和5S rDNA 的定位第50-51页
 3 结论与讨论第51-54页
   ·杉木染色体制片第51-52页
   ·探针的标记第52页
   ·杉木端粒相关序列和5S rDNA 的定位第52-54页
第五章 结论与展望第54-56页
 1 结论第54页
 2 展望第54-56页
参考文献第56-62页
详细摘要第62-63页

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