致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
1 杉木概况 | 第10-12页 |
·杉木的生物学特征及利用价值 | 第10页 |
·杉木的研究进展 | 第10-12页 |
·育种方面的研究 | 第10-11页 |
·细胞水平的研究 | 第11页 |
·分子水平的研究 | 第11-12页 |
2 植物端粒相关序列与5S rDNA 的研究进展 | 第12-18页 |
·植物端粒及端粒相关序列的研究概况 | 第12-16页 |
·端粒 | 第12-15页 |
·端粒的结构 | 第12页 |
·端粒的功能 | 第12-13页 |
·端粒的合成 | 第13-14页 |
·植物端粒的研究进展 | 第14-15页 |
·端粒相关序列 | 第15-16页 |
·端粒相关序列概述 | 第15-16页 |
·植物端粒相关序列的研究进展 | 第16页 |
·植物5S rDNA 的研究概况 | 第16-18页 |
·5S rDNA | 第16-17页 |
·植物5S rDNA 的研究进展 | 第17-18页 |
3 原位杂交技术的研究进展 | 第18-21页 |
·荧光原位杂交技术的应用 | 第18-19页 |
·在植物遗传研究上的应用 | 第18-19页 |
·在植物起源进化研究上的应用 | 第19页 |
·在植物染色体物理图谱构建上的应用 | 第19页 |
·在林木遗传育种上的应用现状 | 第19页 |
·FISH 常用的靶DNA 和探针类型 | 第19-21页 |
·中期染色体的原位杂交技术 | 第20页 |
·减数分裂的粗线期染色体原位杂交技术 | 第20页 |
·伸展DNA 纤维染色体原位杂交技术 | 第20-21页 |
·FISH 的研究进展 | 第21页 |
4 本课题的研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 杉木端粒相关序列的克隆 | 第22-36页 |
1 材料与方法 | 第22-28页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株与质粒 | 第22页 |
·实验试剂 | 第22-23页 |
·实验仪器 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-28页 |
·杉木基因组DNA 的制备(CTAB 法) | 第23-24页 |
·端粒相关序列的PCR 扩增 | 第24页 |
·切胶回收 | 第24-25页 |
·感受态的制备 | 第25页 |
·PCR 产物的载体连接 | 第25-26页 |
·连接产物的转化 | 第26页 |
·转化产物的检测 | 第26页 |
·菌液PCR | 第26-27页 |
·质粒的提取 | 第27页 |
·核酸序列分析 | 第27-28页 |
2 实验结果与分析 | 第28-34页 |
·杉木DNA 的初提及纯化 | 第28页 |
·杉木端粒相关序列(TAS)PCR 条件的优化 | 第28-31页 |
·不同退火温度 | 第28-29页 |
·不同模板浓度 | 第29页 |
·不同dNTP 浓度 | 第29-30页 |
·不同Mg~(2+)浓度 | 第30页 |
·杉木端粒相关序列PCR 体系的建立 | 第30-31页 |
·端粒相关序列菌液PCR 及质粒情况 | 第31-32页 |
·TAS 菌液PCR | 第31页 |
·质粒检测 | 第31-32页 |
·杉木端粒相关序列的测序结果及分析 | 第32-34页 |
·杉木端粒相关序列的测序结果 | 第32-33页 |
·测序结果BLAST 比对结果 | 第33页 |
·TAS 的同源性分析 | 第33-34页 |
3 结论与讨论 | 第34-36页 |
·杉木DNA 的提取 | 第34-35页 |
·杉木端粒相关序列的PCR 体系建立 | 第35页 |
·杉木端粒相关序列的序列分析 | 第35-36页 |
第三章 杉木及其近缘物种5S rDNA 结构比较 | 第36-44页 |
1 材料与方法 | 第36-37页 |
·实验材料 | 第36页 |
·植物材料 | 第36页 |
·菌株与质粒 | 第36页 |
·实验试剂 | 第36页 |
·实验仪器 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-37页 |
·基因组DNA 的制备(CTAB 法) | 第36页 |
·5S rDNA 的PCR 扩增 | 第36-37页 |
·目的片段的扩增 | 第37页 |
2 实验结果与分析 | 第37-41页 |
·东方杉、墨西哥落羽杉、中山杉、池杉、落羽杉5S rDNA 的扩增 | 第37-38页 |
·墨西哥落羽杉5S rDNA 的测序结果 | 第38页 |
·池杉5S rDNA 的测序结果 | 第38页 |
·落羽杉5S rDNA 的测序结果 | 第38-39页 |
·东方杉5S rDNA 的测序结果 | 第39页 |
·中山杉5S rDNA 的测序结果 | 第39-40页 |
·杉木及其近缘物种5S rDNA 基因序列的比较 | 第40-41页 |
3 结论与讨论 | 第41-44页 |
·墨西哥落羽杉、东方杉、中山杉、池杉、落羽杉5S rDNA 基因序列分析 | 第41-42页 |
·杉科植物5S rDNA 基因序列的比较 | 第42-44页 |
第四章 杉木端粒相关序列及5S rDNA 的染色体荧光原位杂交 | 第44-54页 |
1 实验材料及方法 | 第44-48页 |
·实验材料 | 第44-45页 |
·植物材料 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·主要药品 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-48页 |
·实验材料准备 | 第45页 |
·杉木组培苗生根 | 第45页 |
·杉木扦插苗生根 | 第45页 |
·染色体制片 | 第45-46页 |
·减数分裂染色体制片 | 第45-46页 |
·有丝分裂染色体制片 | 第46页 |
·染色体原位杂交 | 第46-48页 |
·原位杂交试剂的配制 | 第46-47页 |
·探针标记 | 第47页 |
·探针与靶杂交 | 第47-48页 |
·杂交信号检测 | 第48页 |
2 实验结果与分析 | 第48-51页 |
·杉木组配苗和扦插苗的生根状况 | 第48-49页 |
·探针标记体系的优化 | 第49-50页 |
·标记探针检测 | 第50页 |
·端粒相关序列和5S rDNA 的定位 | 第50-51页 |
3 结论与讨论 | 第51-54页 |
·杉木染色体制片 | 第51-52页 |
·探针的标记 | 第52页 |
·杉木端粒相关序列和5S rDNA 的定位 | 第52-54页 |
第五章 结论与展望 | 第54-56页 |
1 结论 | 第54页 |
2 展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
详细摘要 | 第62-63页 |