中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
缩略词对照表 | 第10-12页 |
1 绪论 | 第12-24页 |
1.1 腹主动脉瘤 | 第12-17页 |
1.1.1 腹主动脉瘤的简介 | 第12页 |
1.1.2 腹主动脉瘤的发病机制 | 第12-15页 |
1.1.3 腹主动脉瘤动物模型的建立 | 第15-17页 |
1.2 SERCA调控细胞内的钙稳态 | 第17-20页 |
1.2.1 SERCA的生物学特性和各亚型 | 第17页 |
1.2.2 SERCA维持细胞内钙稳态 | 第17-18页 |
1.2.3 胞浆钙相关的CaN-NFAT信号通路 | 第18-19页 |
1.2.4 SERCA2及其C674位点在血管中的作用 | 第19-20页 |
1.3 研究目的和研究内容 | 第20-22页 |
1.3.1 研究目的 | 第20页 |
1.3.2 主要研究内容 | 第20-22页 |
1.4 本研究的创新点 | 第22-24页 |
2 SERCA2 C674的不可逆氧化加剧AngII诱导的腹主动脉瘤进程 | 第24-44页 |
2.1 前言 | 第24页 |
2.2 实验材料 | 第24-27页 |
2.2.1 实验动物 | 第24页 |
2.2.2 主要仪器 | 第24-25页 |
2.2.3 实验试剂 | 第25-26页 |
2.2.4 相关试剂的配制 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-31页 |
2.3.1 实验小鼠的基因鉴定 | 第27页 |
2.3.2 AngII诱导腹主动脉瘤模型 | 第27-28页 |
2.3.3 小鼠的主动脉取材 | 第28页 |
2.3.4 冰冻切片 | 第28页 |
2.3.5 冰冻切片的免疫组化染色 | 第28-29页 |
2.3.6 HE染色 | 第29页 |
2.3.7 Masson Trichrome染色 | 第29-30页 |
2.3.8 Verhoeff-Van Gieson染色 | 第30页 |
2.3.9 免疫组化染色结果统计方法 | 第30-31页 |
2.3.10 Masson Trichrome染色切片的胶原沉积统计方法 | 第31页 |
2.3.11 Verhoeff-Van Gieson染色切片的弹性纤维破坏程度统计方法 | 第31页 |
2.3.12 统计分析方法 | 第31页 |
2.4 实验结果 | 第31-42页 |
2.4.1 小鼠基因的鉴定 | 第31-32页 |
2.4.2 AngII增加腹主动脉SERCA2 C674的不可逆氧化 | 第32-33页 |
2.4.3 AngII增加腹主动脉瘤平滑肌细胞SERCA2 C674的不可逆氧化 | 第33页 |
2.4.4 SERCA2 C674的不可逆氧化加重AngII诱导的腹主动脉瘤 | 第33-38页 |
2.4.5 AngII诱导腹主动脉瘤体的常规组织学染色 | 第38-42页 |
2.5 本章小结 | 第42-44页 |
3 SERCA2 C674的不可逆氧化促进了ECM的合成和降解失平衡和炎性反应的发生 | 第44-70页 |
3.1 前言 | 第44页 |
3.2 实验材料 | 第44-48页 |
3.2.1 实验动物 | 第44-45页 |
3.2.2 主要仪器 | 第45-46页 |
3.2.3 实验试剂 | 第46-47页 |
3.2.4 相关试剂的配制 | 第47-48页 |
3.3 实验方法 | 第48-54页 |
3.3.1 主动脉平滑肌细胞的培养 | 第48-50页 |
3.3.2 细胞免疫荧光染色 | 第50页 |
3.3.3 细胞RNA的提取 | 第50页 |
3.3.4 荧光定量PCR | 第50-51页 |
3.3.5 AngII处理细胞 | 第51页 |
3.3.6 细胞和组织总蛋白的提取和定量 | 第51-52页 |
3.3.7 蛋白质印迹法(Western Blot) | 第52-53页 |
3.3.8 明胶酶谱 | 第53-54页 |
3.3.9 统计分析方法 | 第54页 |
3.4 实验结果 | 第54-69页 |
3.4.1 原代培养血管平滑肌细胞的鉴定 | 第54-55页 |
3.4.2 主动脉平滑肌细胞SERCA2 C674的不可逆氧化不影响SERCA2的表达 | 第55-56页 |
3.4.3 主动脉SERCA2 C674的不可逆氧化上调腹主动脉瘤相关蛋白和炎性反应相关因子 | 第56-60页 |
3.4.4 主动脉平滑肌细胞SERCA2 C674的不可逆氧化上调腹主动脉瘤相关蛋白和炎性反应相关因子 | 第60-65页 |
3.4.5 AngII上调主动脉平滑肌细胞的腹主动脉瘤相关蛋白和炎性反应相关因子 | 第65-69页 |
3.5 本章小结 | 第69-70页 |
4 SERCA2 C674的不可逆氧化通过激活CaN-NFAT信号通路调控腹主动脉瘤的形成 | 第70-82页 |
4.1 前言 | 第70页 |
4.2 实验材料 | 第70-72页 |
4.2.1 实验动物 | 第70页 |
4.2.2 主要仪器 | 第70-71页 |
4.2.3 实验试剂 | 第71-72页 |
4.2.4 相关试剂的配制 | 第72页 |
4.3 实验方法 | 第72-73页 |
4.3.1 主动脉平滑肌细胞的培养 | 第72页 |
4.3.2 CsA处理细胞 | 第72页 |
4.3.3 细胞免疫荧光染色 | 第72页 |
4.3.4 细胞总蛋白的提取和定量 | 第72-73页 |
4.3.5 蛋白质印迹法(Western Blot) | 第73页 |
4.3.6 统计分析方法 | 第73页 |
4.4 实验结果 | 第73-80页 |
4.4.1 主动脉平滑肌细胞SERCA2 C674的不可逆氧化激活CaN-NFAT信号通路 | 第73-74页 |
4.4.2 主动脉平滑肌细胞SERCA2 C674的不可逆氧化通过激活CaN-NFAT信号通路上调腹主动脉瘤相关蛋白和炎性反应相关因子的表达水平 | 第74-80页 |
4.5 本章小结 | 第80-82页 |
5 结论与展望 | 第82-84页 |
5.1 主要研究结论 | 第82页 |
5.2 后期研究展望 | 第82-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-96页 |
附录 | 第96页 |
A.作者在攻读学位期间发表的论文 | 第96页 |
B.作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第96页 |