摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
缩略语表 | 第14-22页 |
第1章 绪论 | 第22-38页 |
1.1 茅苍术 | 第22-24页 |
1.1.1 茅苍术生物学特性 | 第22页 |
1.1.2 茅苍术资源现状 | 第22-23页 |
1.1.3 茅苍术活性成分及药用价值 | 第23-24页 |
1.2 植物内生菌 | 第24-25页 |
1.2.1 内生菌的特性 | 第24页 |
1.2.2 内生菌与植物的互作 | 第24-25页 |
1.3 内生菌对植物生长和代谢的影响 | 第25-36页 |
1.3.1 内生菌促进植物的生长 | 第25-26页 |
1.3.2 内生菌促进植物次级代谢物的积累 | 第26-27页 |
1.3.3 内生菌诱导子促进植物次级代谢物的积累 | 第27-28页 |
1.3.4 共生微生物对植物激素信号转导的影响 | 第28-33页 |
1.3.4.1 植物和微生物互作中的植物激素平衡 | 第28-29页 |
1.3.4.2 微生物分泌激素对植物生长和代谢的影响 | 第29-30页 |
1.3.4.3 微生物对植物激素信号转导途径的干预 | 第30-33页 |
1.3.4.4 内生菌经激素信号促进植物次级代谢物的积累 | 第33页 |
1.3.5 共生微生物诱导植物活性氧的迸发 | 第33-34页 |
1.3.6 内生菌对植物生长和代谢的间接影响 | 第34-36页 |
1.3.7 内生菌提高中药材品质的开发与利用 | 第36页 |
1.4 本论文的研究内容和意义 | 第36-38页 |
第2章 茅苍术内生细菌的分离及促挥发油积累菌株的筛选 | 第38-62页 |
2.1 材料与方法 | 第38-43页 |
2.1.1 茅苍术无菌组培苗系的建立和生长条件 | 第38-39页 |
2.1.2 内生细菌的分离 | 第39页 |
2.1.3 内生细菌的多样性分析 | 第39-40页 |
2.1.4 内生细菌的植物促生活性分析 | 第40-41页 |
2.1.4.1 固氮活性的分析 | 第40页 |
2.1.4.2 解磷活性的分析 | 第40页 |
2.1.4.3 解钾活性的分析 | 第40页 |
2.1.4.4 吲哚乙酸合成能力的分析 | 第40-41页 |
2.1.5 内生菌的接种和化学药品的处理 | 第41页 |
2.1.6 茅苍术挥发油的提取和气相色谱分析 | 第41-42页 |
2.1.7 茅苍术内源吲哚乙酸含量的测定 | 第42页 |
2.1.8 内生细菌ALEB7B的分子鉴定 | 第42-43页 |
2.1.9 内生细菌ALEB7B吲哚乙酸合成途径的分析 | 第43页 |
2.1.10 数据统计与分析 | 第43页 |
2.2 结果 | 第43-58页 |
2.2.1 茅苍术内生细菌的分离 | 第43页 |
2.2.2 茅苍术内生细菌的多样性分析 | 第43-46页 |
2.2.2.1 内生细菌的ARDRA分析 | 第43-46页 |
2.2.2.2 ARDRA聚类簇内菌株的BOX-PCR分析 | 第46页 |
2.2.3 茅苍术内生细菌植物促生活性的筛选 | 第46-48页 |
2.2.4 茅苍术内生固氮细菌nifH基因的扩增与16S rRNA序列的测定 | 第48-50页 |
2.2.4.1 nifH基因的扩增 | 第48-49页 |
2.2.4.2 16S rRNA序列的测定和系统发育树的构建 | 第49-50页 |
2.2.5 茅苍术内生细菌溶磷和发酵液pH值的测定 | 第50-52页 |
2.2.5.1 无机磷溶解量的测定 | 第50-51页 |
2.2.5.2 有机磷溶解量的测定 | 第51-52页 |
2.2.6 内生细菌ALEB7B显著促进茅苍术挥发油的积累 | 第52-53页 |
2.2.7 内生细菌ALEB7B的鉴定 | 第53-55页 |
2.2.8 荧光假单胞菌增加茅苍术中吲哚乙酸的含量 | 第55页 |
2.2.9 荧光假单胞菌经吲哚-3-乙酰胺途径合成吲哚乙酸 | 第55-57页 |
2.2.10 外源吲哚乙酸促进茅苍术挥发油的积累 | 第57-58页 |
2.2.11 1-萘氧乙酸部分逆转荧光假单胞菌对茅苍术挥发油积累的促进 | 第58页 |
2.3 讨论 | 第58-62页 |
第3章 荧光假单胞菌拮抗茅苍术病原真菌罗耳阿太菌的作用机制 | 第62-84页 |
3.1 材料与方法 | 第63-68页 |
3.1.1 茅苍术无菌组培苗系的建立和生长条件 | 第63页 |
3.1.2 病原真菌SY4的分离与鉴定 | 第63页 |
3.1.3 荧光假单胞菌定殖的扫描电子显微镜观察 | 第63页 |
3.1.4 荧光假单胞菌和罗耳阿太菌间的拮抗 | 第63-64页 |
3.1.5 荧光假单胞菌和罗耳阿太菌养分利用的比较 | 第64页 |
3.1.6 荧光假单胞菌发酵液和挥发物拮抗真菌的效率 | 第64-65页 |
3.1.7 荧光假单胞菌挥发物的顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用鉴定 | 第65页 |
3.1.8 荧光假单胞菌发酵液二氯甲烷萃取物的拮抗真菌作用和活性物质鉴定 | 第65页 |
3.1.9 荧光假单胞菌释放抗生素和胞外水解酶的检测 | 第65-66页 |
3.1.10 2-哌啶酮、二甲基二硫醚、1-十一烯的抗真菌能力 | 第66-67页 |
3.1.11 内生细菌和病原真菌的挑战性接种 | 第67-68页 |
3.1.12 数据统计与分析 | 第68页 |
3.2 结果 | 第68-82页 |
3.2.1 病原真菌SY4的鉴定 | 第68-70页 |
3.2.2 荧光假单胞菌在茅苍术中的定殖 | 第70页 |
3.2.3 荧光假单胞菌抑制罗耳阿太菌的生长 | 第70-72页 |
3.2.4 荧光假单胞菌挥发物抑制罗耳阿太菌的生长 | 第72-75页 |
3.2.5 荧光假单胞菌发酵液二氯甲烷萃取物抑制罗耳阿太菌的生长 | 第75-78页 |
3.2.6 荧光假单胞菌产生的抗生素和胞外水解酶 | 第78-80页 |
3.2.7 荧光假单胞菌降低茅苍术的白绢病发病率 | 第80-82页 |
3.3 讨论 | 第82-84页 |
第4章 荧光假单胞菌释放挥发性物质对茅苍术生长和挥发油积累的促进 | 第84-98页 |
4.1 材料与方法 | 第84-87页 |
4.1.1 茅苍术无菌组培苗系的建立和生长条件 | 第84页 |
4.1.2 内生细菌的接种 | 第84-85页 |
4.1.3 化学药品的处理 | 第85-86页 |
4.1.4 荧光假单胞菌在茅苍术中的定殖浓度 | 第86页 |
4.1.5 植株生长和光合参数的测定 | 第86页 |
4.1.6 茅苍术挥发油的提取和气相色谱分析 | 第86页 |
4.1.7 植物防御响应的分析 | 第86页 |
4.1.8 荧光假单胞菌挥发性物质的收集与鉴定 | 第86-87页 |
4.1.9 数据统计与分析 | 第87页 |
4.2 结果 | 第87-95页 |
4.2.1 荧光假单胞菌在茅苍术中的定殖 | 第87-88页 |
4.2.2 荧光假单胞菌挥发性物质促进茅苍术的生长和挥发油积累 | 第88-89页 |
4.2.3 荧光假单胞菌挥发性物质诱导的植物防御响应 | 第89-90页 |
4.2.4 荧光假单胞菌挥发性物质的鉴定 | 第90-92页 |
4.2.5 荧光假单胞菌含氮挥发物的促生作用和苯甲醛的促挥发油积累作用 | 第92-93页 |
4.2.6 苯甲醛诱导的茅苍术防御响应 | 第93-94页 |
4.2.7 茅苍术-荧光假单胞菌共生体释放细菌挥发物的检测 | 第94-95页 |
4.3 讨论 | 第95-98页 |
第5章 荧光假单胞菌胞外蛋白和多糖诱导子对茅苍术倍半萜积累的促进 | 第98-112页 |
5.1 材料与方法 | 第99-101页 |
5.1.1 茅苍术无菌组培苗系的建立和生长条件 | 第99页 |
5.1.2 内生细菌的接种和诱导子的处理 | 第99页 |
5.1.3 内生细菌胞外蛋白的提取和纯化 | 第99页 |
5.1.4 内生细菌胞外多糖的提取和纯化 | 第99页 |
5.1.5 茅苍术挥发油的提取和气相色谱分析 | 第99-100页 |
5.1.6 植物RNA的提取和荧光定量PCR分析 | 第100页 |
5.1.7 内生细菌胞外多糖的组成鉴定 | 第100页 |
5.1.8 内生细菌胞外蛋白的分离 | 第100页 |
5.1.9 胶内蛋白的酶解 | 第100-101页 |
5.1.10 蛋白的MALDI-TOF MS和MS/MS分析 | 第101页 |
5.1.11 数据统计与分析 | 第101页 |
5.2 结果 | 第101-109页 |
5.2.1 荧光假单胞菌胞外蛋白和多糖促进茅苍术倍半萜的积累 | 第101-102页 |
5.2.2 荧光假单胞菌胞外蛋白和多糖对茅苍术倍半萜不同组分积累的影响 | 第102-104页 |
5.2.3 荧光假单胞菌胞外蛋白和胞外多糖对HMGR和DXR基因表达的影响 | 第104-105页 |
5.2.4 荧光假单胞菌胞外蛋白主成分的鉴定及其对茅苍术倍半萜积累的影响 | 第105-106页 |
5.2.5 荧光假单胞菌胞外多糖的组分鉴定 | 第106-107页 |
5.2.6 荧光假单胞菌胞外多糖水解单糖对茅苍术倍半萜积累的影响 | 第107-108页 |
5.2.7 荧光假单胞菌胞外蛋白和多糖诱导茅苍术过氧化氢的积累 | 第108-109页 |
5.3 讨论 | 第109-112页 |
第6章 荧光假单胞菌诱导的活性氧直接增加茅苍术含氧倍半萜的含量和多样性 | 第112-129页 |
6.1 材料与方法 | 第113-116页 |
6.1.1 茅苍术无菌组培苗系的建立和生长条件 | 第113页 |
6.1.2 内生细菌的接种 | 第113页 |
6.1.3 荧光假单胞菌在茅苍术中的定殖浓度 | 第113页 |
6.1.4 化学药品的处理 | 第113-115页 |
6.1.5 光合作用的测定 | 第115页 |
6.1.6 植株可溶性糖、乙酰辅酶A、丙酮酸、丙二醛含量的测定 | 第115页 |
6.1.7 内源活性氧的检测和组织化学染色 | 第115页 |
6.1.8 茅苍术挥发油的提取和气相色谱分析 | 第115页 |
6.1.9 倍半萜体外氧化产物的鉴定 | 第115页 |
6.1.10 数据统计与分析 | 第115-116页 |
6.2 结果 | 第116-126页 |
6.2.1 荧光假单胞菌在茅苍术中的定殖动态 | 第116页 |
6.2.2 荧光假单胞菌诱导茅苍术活性氧的迸发和含氧倍半萜的积累 | 第116-119页 |
6.2.3 外源过氧化氢和单线态氧增加茅苍术中含氧倍半萜的积累 | 第119-121页 |
6.2.4 抗坏血酸逆转荧光假单胞菌引起的含氧倍半萜积累 | 第121-122页 |
6.2.5 过氧化氢和单线态氧化倍半萜的体外实验 | 第122-124页 |
6.2.6 倍半萜在茅苍术与荧光假单胞菌拮抗平衡互作中的功能 | 第124-126页 |
6.3 讨论 | 第126-129页 |
第7章 荧光假单胞菌诱导茅苍术挥发油积累的活性氧和激素信号级联 | 第129-144页 |
7.1 材料与方法 | 第129-131页 |
7.1.1 茅苍术无菌组培苗系的建立和生长条件 | 第129页 |
7.1.2 内生细菌的接种 | 第129页 |
7.1.3 化学药品的处理 | 第129-130页 |
7.1.4 茅苍术挥发油的提取和气相色谱分析 | 第130页 |
7.1.5 植物内源过氧化氢含量的测定 | 第130页 |
7.1.6 植物内源赤霉素含量的测定 | 第130页 |
7.1.7 植物内源乙烯含量的测定 | 第130页 |
7.1.8 植物内源脱落酸含量的测定 | 第130-131页 |
7.1.9 植物RNA的提取及qPCR分析 | 第131页 |
7.1.10 HMGR和DXR活性测定 | 第131页 |
7.1.11 数据统计与分析 | 第131页 |
7.2 结果 | 第131-140页 |
7.2.1 荧光假单胞菌促进茅苍术挥发油的积累 | 第131-132页 |
7.2.2 内源过氧化氢参与荧光假单胞菌诱导的茅苍术挥发油积累 | 第132-133页 |
7.2.3 内源赤霉素参与荧光假单胞菌诱导的茅苍术挥发油积累 | 第133-134页 |
7.2.4 内源乙烯参与荧光假单胞菌诱导的茅苍术挥发油积累 | 第134-135页 |
7.2.5 内源脱落酸参与荧光假单胞菌诱导的茅苍术挥发油积累 | 第135-136页 |
7.2.6 赤霉素、乙烯、脱落酸是过氧化氢的下游信号 | 第136-139页 |
7.2.7 脱落酸是乙烯的下游信号 | 第139页 |
7.2.8 赤霉素和脱落酸增加HMGR和DXR的基因表达和酶活性 | 第139-140页 |
7.3 讨论 | 第140-144页 |
第8章 全文总结与展望 | 第144-147页 |
8.1 主要结论 | 第144-145页 |
8.2 创新点 | 第145页 |
8.3 研究展望 | 第145-147页 |
附录A 茅苍术挥发油的总离子流图 | 第147-148页 |
附录B 茅苍术挥发油主成分的质谱图 | 第148-149页 |
附录C 茅苍术挥发油组分气相检测的线性范围和最低检测限 | 第149-150页 |
附录D 茅苍术挥发油组分气相检测的可靠性 | 第150-151页 |
附录E 脱落酸标品的高效液相图谱 | 第151-152页 |
参考文献 | 第152-183页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第183-185页 |
在读期间所获荣誉 | 第185-186页 |
致谢 | 第186-187页 |